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Informe 2 - Colorimetria
Informe 2 - Colorimetria
Resumen:
La colorimetría estudia las propiedades de los colores para desarrollar métodos que permitan su
cuantificación, basándose en que el color depende de las ondas electromagnéticas que inciden sobre
un cuerpo o sustancia con determinada longitud de onda. La luz es la parte de la radiación
electromagnética que puede ser percibida por el ojo humano. Cuando un rayo de luz a determinada
longitud de onda incide sobre una sustancia que absorba luz, una parte atravesara la sustancia
mientras que otra será absorbida por la misma. La absorbancia y transmitancia son las propiedades
que cuantifican la cantidad de luz absorbida o transmitida respectivamente. A partir de la relación
lineal entre la absorbancia y la concentración de una disolución indicada en la ley de Lambert-Beer,
se busca construir una curva de calibración que permita conocer la absorbancia o concentración de
una disolución desconocida conociendo alguno de los dos datos. Se comprobó la relación
directamente proporcional de la absorbancia y la concentración, relacionándolo con la intensidad de
color de diferentes diluciones y calculando a partir de la ecuación de la recta hallada mediante un
ajuste lineal de la curva de calibración, la concentración desconocida de una disolución de azul de
metileno.
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cual debe estar la concentración de la muestra a. Absorbancia y transmitancia
problema (procedimiento descrito en la figura 2).
Se realizó la gráfica del espectro de
absorción de la disolución Stock y se obtuvo que
la longitud de onda con mayor absorción por
parte de la sustancia fue de 680 nm con 2.898 de
Tomar solucion Medir con la pipeta absorbancia. Los datos que daban 0% de
stock de azul aforada el volumen transmitancia no fueron tenidos en cuenta
de metiieno deseado (Consultar apéndice A para mayores detalles).
Repetir
Transferir a tubo de procedimiento con
ensayo diferentes
volumenes
Figura 3 Diluciones de azul de metileno
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Así mismo, las demás disoluciones van error debe ser mucho mayor debido a errores en la
disminuyendo su intensidad de color debido a que experimentación. El equipo al ser manipulado por
disminuye su concentración. Cuando hay mayor tantas personas al mismo tiempo pudo
cantidad de moléculas de soluto, las disoluciones descalabrarse, igualmente, las celdas no estaban
absorben más luz y transmiten ciertas ondas que en perfectas condiciones pues algunas estaban
percibimos como color azul intenso; mientras que rayadas, lo que pudo afectar la reflexión y
si aumentan las moléculas de agua, ésta al absorbancia de la luz, además de errores por
transmitir toda la luz, las disoluciones se verán mediciones inexactas al momento de realizar las
cada vez más claras. diluciones.
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La intensidad del color de una disolución
depende de la concentración de soluto, ya que a
mayor soluto mayor será la cantidad absorbida de
luz y menor la que se transmite. Sólo las
longitudes de onda que atraviesan el objeto o
disolución podrán ser vistas por el ojo y por tanto
en el cerebro sólo percibirá el color de
determinada longitud de onda.
IV. REFERENCIAS
La concentración obtenida es comprobada a
través de la ecuación dada por la ley de Lambert-
Beer (A = ε·c·l ), donde “A” es absorbancia, “ε” es 1.
Brown, T.; Lemay, H.; Murphy,C.; Bursten,
la constante de absortividad molar, y “l” la B.; Woodward, P. Química La ciencia central.
distancia que recorre la luz por la solución, o la 11ª ed., Pearson Education. pp 212-213. 2009
longitud de la celda. Despejando la constante de 2.
absortividad molar tenemos: ε= A/c·l y Nieves, A.;Bárcena, J.;Fernández, E.; Galván,
remplazando por los valores obtenidos: ε= A. (2012). Espectrofometría: Espectros de
1,422/6,878x10-5 M · 1cm dando como resultado absorción y cuantificación colorimétrica de
ε=20674,61 L mol-1 cm-1 el cual se compara con la biomoléculas. 24 de marzo de 2016, de
constante de absortividad molar teórica calculada Departamento de Bioquímica y Biología
a partir de la pendiente de la recta de la gráfica de Molecular, Sitio web:
calibración: a 680 nm la absortividad molar de la http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-
disolución desconocida debe ser de 19286,955 L mol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETR%C3%
mol-1 cm-1, dato aproximado al obtenido y el cual 8DA.pdf
comprueba la fiabilidad de la práctica. 3.
Harris, D.; Análisis Químico Cuantitativo. 2ª
ed., Reverte S.A.pp 502, 505, 506. 2002
4.
Figura 1 tomada de
III. CONCLUSIONES
http://www.materialesdelaboratorio.net/wp-
content/uploads/2012/02/GRADILLA-
PARA-TUBO-DE-ENSAYO.jpg
Al realizar la curva de calibración de una 5.
disolución, la relación lineal entre la absorbancia Figura 2 tomada de:
y la concentración, planteada en la Ley de http://www.labbrands.com/778-
Lambert-Beer, permite conocer la absorbancia de large/espectrofotometro-visible-v1200-
una solución conociendo su concentración o mapada.jpg
viceversa. Sin embargo, cada disolución tiene una
Cubillos G., Separación de los componentes de la
curva de calibración diferente por lo que se debe
mezcla destilación simple (2016). Guías de
repetir el proceso si se desea conocer la
Laboratorio para Laboratorio de técnicas básicas.
concentración de una disolución diferente a la de
Documento de Trabajo – Departamento de
azul de metileno.
Química – Universidad Nacional de Colombia,
Bogotá.
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Informe de laboratorio
APÉNDICE A
Tabla A1. Absorbancia analizadas de la Solución Stock de concentración 50 mg/L a través del
espectrofotómetro MAPADA V1200
350 0.002
400 0.135
450 0.160
500 0.416
550 1.167
600 3.000
620 3.000
630 3.000
650 3.000
660 3.000
670 3.000
680 2,898
690 1,465
700 0,773
Los datos de absorbancia y transmitancia del rango de longitud de onda de 600 a 670 nm no son tenidos en
cuenta para el análisis del espectro de absorción debido a que en éstas longitudes la sustancia alcanza una
absorbancia completa (pues su respectiva transmitancia es 0%) y esto no es posible en el experimento. A
partir de estos datos se crea una gráfica que permite conocer qué longitud de onda es adecuada para usar
con la determinada disolución.