Práctica 5 Transporte de Membranas

Laboratorios de Biología Celular y Microbiología
Sebastián Pineda Pineda estudiante M. Sc. Ingeniería Química
FENÓMENOS DE TRANSPORTE A TRAVÉS DE MEMBRANAS
Las membranas celulares son esenciales para la vida de la célula, por ejemplo la membrana
plasmática encierra, define límites y mantiene las diferencias ente el citosol y el medio
ambiente extracelular. Además, permite el intercambio selectivo de sustancias con el medio
que la célula necesita para mantener la actividad en todas sus estructuras. Este intercambio
puede realizarse a través de dos fenómenos: Transporte activo (gastando energía, ATP) y
Transporte pasivo denominado difusión (sin gasto de ATP). El transporte activo es un
mecanismo que permite a la célula transportar sustancias disueltas.
Para el transporte de macromoléculas a través de membranas, existen tres mecanismos:

Endocitosis: La célula capta moléculas grandes del medio externo mediante invaginación de
la membrana en la que se engloba la partícula, formando una vesícula que se desprende de
la pared celular y se incorpora al citoplasma. Exocistosis: es el proceso celular por el cual las
vesículas situadas en el citoplasma se fusionan con la membrana citoplasmática, liberando
su contenido. La exocitosis se observa en muy diversas células secretoras, tanto en la
función de excreción como en la función endocrina. Transcitosis: Es el conjunto de
fenómenos que permiten a una sustancia atravesar todo el citoplasma celular desde un polo
al otro de la célula. Implica el doble proceso endocitosis-exocitosis. Es propio de células
endoteliales que constituyen los capilares sanguíneos, transportándose así las sustancias
desde el medio sanguíneo hasta los tejidos que rodean los capilares.
1. Fundamentación
Laboratorio 3: Transporte a través de membranas

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Transporte de moléculas de baja masa molecular:
 El transporte pasivo. Es un proceso de difusión de sustancias a través de la

membrana. Se produce siempre a favor del gradiente, es decir, de donde hay más
hacia el medio donde hay menos. Cuando ese paso se realiza sin tener una barrera
delimitada (por ejemplo agua o aire) se denomina difusión espontanea o cuando se
realiza a través de membranas selectivamente permeables recibe el nombre de
ósmosis (paso del solvente) y diálisis (paso de soluto). Estos fenómenos al igual que
los demás involucrados en la dinámica celular se ven afectados por varios factores
tales como la temperatura, concentración, calidad de las membranas, entre otros.
Este transporte puede darse por:
 Difusión simple: Es el paso de pequeñas moléculas a favor del gradiente; puede
realizarse a través de la bicapa lipídica o a través de canales proteicos.
o Difusión simple a través de la bicapa: Así entran moléculas lipídicas como
las hormonas, anestésicos como el éter y fármacos liposolubles. Y
sustancias apolares como el oxígeno y el nitrógeno atmosférico. Algunas
moléculas polares de muy pequeño tamaño, como el agua, el CO2, el
etanol y la glicerina, también atraviesan la membrana por difusión simple.
La difusión del agua recibe el nombre de ósmosis
o Difusión simple a través de canales: Se realiza mediante proteínas de
canal. Así entran iones como el Na+, K+, Ca2+, Cl-. Las proteínas de canal
son proteínas con un orificio o canal interno, cuya apertura está regulada,
por ejemplo por ligando, como ocurre con neurotransmisores u
hormonas, que se unen a una determinada región, el receptor de la
proteína de canal, que sufre una transformación estructural que induce la
apertura del canal.
 Difusión facilitada: Permite el transporte de pequeñas moléculas polares, como
los aminoácidos, monosacáridos, etc., que al no poder atravesar la bicapa
lipídica, requieren que proteínas trasportadoras faciliten su paso. Estas proteínas
al unirse a la molécula a transportar sufren un cambio en su estructura que
arrastra a dicha molécula hacia el interior de la célula.

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El agua se mueve fácilmente cruzando las membranas celulares, a través de canales

especiales revestidos de proteína. Si el total de la concentración de todos los solutos
disueltos no es igual en ambos lados, habrá un movimiento neto de moléculas de agua hacia
dentro o fuera de la célula. Para donde es el movimiento del agua, depende si el medio
donde se encuentra la célula es isotónico, hipotónico o hipertónico.
2. Objetivos:
 General
Identificar los procesos físicos de difusión, osmosis y diálisis con el proceso fisiológico
mediante el cual las moléculas se transportan a través de las membranas celulares.
 Específicos
o Determinar el efecto de la concentración del soluto y de la temperatura sobre
el tiempo de difusión.

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o Visualizar y diferenciar los fenómenos de osmosis y diálisis en las células y

modelos celulares.
o Comprender la importancia que tienen las concentraciones de distintas
soluciones en el mantenimiento de la integridad de las células vegetales y
animales.
3. Materiales y Reactivos
Materiales
 Placa de calentamiento  Gradilla
 Termómetros  Tapón de corcho con tubo capilar
 Goteros  6 Tubos de ensayo
 Pinzas  Cronómetro
 3 Beaker 150 mL  Cubos de hielo
 Pipeta 10 y 5 mL
LEERME!!!!!
Los estudiantes deben llevar
 Intestino de cerdo lavado aprox. 30 cm por todo el grupo.

RECOMENDACIONES: EL INTESTINO DEBE SER FRESCO, NO ADICIONARLE SAL, NI
CONGELARLO.
 Cauchos para el cabello finos (de los de hacer trenzas pequeñas)
 Guantes
Reactivos
 CaCl2 al 10% (gotero)
 KMnO4
 Glucosa al 20%
 NaCl al 10%
 Almidón al 10%
 Solución de Yodo

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4. Procedimiento
a) Coloque en tres tubos de ensayo 15 mL de agua destilada a igual temperatura y
numérelos. A otros tres tubos de ensayo agregue 5 mL de agua destilada a diferente
temperatura. Deslice por la pared de cada tubo KMnO4 de la siguiente forma:
TUBO KMnO4 TEMPERATURA TIEMPO (min)

Tubo 1 1 gota 0,1% T. ambiente:____
Tubo 4 1 gota 0,1% T. helada:____
Tubo 6 1 gota 0,1% T. caliente:____
Mida el tiempo de difusión en cada caso. Para ello anote el tiempo inicial cuando se agregó
el colorante y el tiempo final cuando toque el fondo del tubo. La diferencia entre ambos es el
tiempo de difusión. Haga una gráfica Concentración vs. Tiempo de difusión a una misma
temperatura y otra grafica Temperatura vs. Tiempo de difusión a una misma concentración
de colorante. Analice lo sucedió.
b) Tome 5 cm de intestino de cerdo (el cual servirá como modelo de membrana

semipermeable). Haga el montaje indicado por el docente y agregue las soluciones
que el monitor preparó con anticipación. Lave el sistema con agua destilada,
introdúzcalo y sujételo verticalmente en un beaker de 150 mL que contenga agua
destilada. Tome muestra cada 15 min y realice las pruebas indicadas por el docente.
Preguntas sugeridas:
1. ¿En qué consiste el transporte activo? Explique la bomba de sodio – Potasio

2. ¿Cuál es la importancia fisiológica del transporte activo de Na+ y K+?
3. ¿Explique los diversos tipos de endocitosis?
4. ¿Qué efecto tiene la temperatura sobre la velocidad de difusión?
5. ¿Qué es presión osmótica?
6. ¿Cuál es la diferencia entre osmosis y diálisis?

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BIBLIOGRAFÍA
Universidad de Puerto Rico. Laboratorio 7. La membrana y el transporte celular. Solomon,

Eldra Pearl; Berg, Linda R.; Martin, Diana W. Biology, 7th Edición. 2004.
http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/D/Diffusion.html. Transport Across

Cell Membranes.
Curtis, Helena; Barnes, Sue; Schnek, Adriana; Flores, Graciela. Biología. 6th Edición. 2004.
Purves, William; Sadava, David; Orians, Gordon; Heller, Craig. Vida “La Ciencia de la
Biología”. 2003
Proyecto ARCANO; Osorio, H.J.; Cardona, C.A., Montes, L.M.; Gobernación de Caldas,
Programa de las Naciones Unidad para el Desarrollo PNUD, Universidad Nacional de
Colombia; SENA; Cartilla 16: Manual de prácticas de laboratorio en ciencias biológicas. 2007.

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Para el transporte de macromoléculas a través de membranas, existen tres mecanismos:

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Transporte de moléculas de baja masa molecular:

 El transporte pasivo. Es un proceso de difusión de sustancias a través de la

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 Intestino de cerdo lavado aprox. 30 cm por todo el grupo.

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http://users.rcn.com/jkimball.ma.ultranet/BiologyPages/D/Diffusion.html. Transport Across

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