RECUENTO DE PLAQUETASFundamento
RECUENTO DE PLAQUETASFundamento
Técnica
1. Con una pipeta echar en un tubo de ensayo 2 ml de líquido diluidor de plaquetas.
2. Con la micropipeta automática de 20 microlitros retirar dicho volumen del tubo de ensayo.
3. Echar 20 microlitros de sangre anticoagulada homogeneizada en el tubo, haciendo
un factor de dilución de 1/100.
4. Homogeneizar bien la mezcla.
5. Poner el cubreobjetos sobre la cámara de Neubauer.
6. Cargar la cámara, por capilaridad, con la micropipeta automática.
7. Incubar durante 15 minutos en una cámara húmeda.
8. Observar al microscopio óptico, realizando un recuento de plaquetas dentro del cuadrado
central. De los 16 cuadrados medianos que componen el cuadrado central elegiremos 5 al
azar. De cada cuadrado mediano elegido leeremos 4 cuadrados pequeños, haciendo una
lectura total de 20 cuadrados pequeños.
Resultado
Se leyeron los 20 cuadrados pequeños de los cinco cuadrados medianos. Es conveniente tener
cuidado al contar las plaquetas que están en contacto con las rayas que delimitan los
cuadrados. Si una plaqueta está en contacto con las rayas superior y derecha, entonces se
cuenta. En cambio, si está en contacto con las rayas inferior e izquierda, no se cuenta.
Lectura de los cinco cuadrados medianos seleccionados con anterioridad. Cada uno de ellos posee 16 cuadrados pequeños, de los
que se leen 4.
Cinco cuadrados elegidos para leer dentro del cuadrado grande central de la cámara de
Neubauer.
Los conteos fueron los siguientes: 3, 2, 3, 4 y 10 haciendo una suma de 22 plaquetas en esos 20
cuadrados pequeños. El cálculo consiste en una simple regla de 3, si hay 22 plaquetas en
20*(0,05*0,05*0,1) mm3, en 1 mm3 habrá X plaquetas. La resolución de esta regla de 3, una vez
despejada la X, es de 4400 plaquetas/mm 3 diluídas.
Esa cifra hay que multiplicarla por la inversa del factor de dilución (1/100), es decir, 4400*100
= 440000 plaquetas/mm3 o, lo que es lo mismo, 440 Gp/L.
Incubando las cámaras de Neubauer en un cristalizador con papel de filtro empapado en agua desionizada.
Incubando el líquido diluidor con los 20 microlitros de sangre de la muestra problema.