Scribd Logo
Cargar

¡Te damos la bienvenida a Scribd!

  • PRACTICA N3 Hemostasia

    Cargado por

    GiancarloCordovaTorres
    327 vistas6 páginas
    Este documento describe los procedimientos manuales y automatizados para realizar un recuento plaquetario. El método manual de Brecher & Cronkite involucra mezclar la sangre con oxalato de amonio para lisar los glóbulos rojos y luego contar las plaquetas en un hemocitómetro. Los métodos automatizados usan contadores hematológicos. También se discute la trombocitopenia inducida por EDTA y los métodos de Fonio, Dameshek y Dameshek Modificado para recuentos manuales.

    Descripción original:

    Título original

    PRACTICA N3 hemostasia

    Derechos de autor

    © © All Rights Reserved

    Formatos disponibles

    DOCX, PDF, TXT o lea en línea desde Scribd

    ¿Le pareció útil este documento?

    ¿Este contenido es inapropiado?

    Este documento describe los procedimientos manuales y automatizados para realizar un recuento plaquetario. El método manual de Brecher & Cronkite involucra mezclar la sangre con oxalato de amonio para lisar los glóbulos rojos y luego contar las plaquetas en un hemocitómetro. Los métodos automatizados usan contadores hematológicos. También se discute la trombocitopenia inducida por EDTA y los métodos de Fonio, Dameshek y Dameshek Modificado para recuentos manuales.

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como DOCX, PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
    Marcar por contenido inapropiado
    Descargar como docx, pdf o txt
    327 vistas6 páginas

    PRACTICA N3 Hemostasia

    Cargado por

    GiancarloCordovaTorres
    Este documento describe los procedimientos manuales y automatizados para realizar un recuento plaquetario. El método manual de Brecher & Cronkite involucra mezclar la sangre con oxalato de amonio para lisar los glóbulos rojos y luego contar las plaquetas en un hemocitómetro. Los métodos automatizados usan contadores hematológicos. También se discute la trombocitopenia inducida por EDTA y los métodos de Fonio, Dameshek y Dameshek Modificado para recuentos manuales.

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como DOCX, PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
    Marcar por contenido inapropiado
    Descargar como docx, pdf o txt
    de 6

    UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

    FACULTAD DE MEDICINA – E.P. TECNOLOGIA MEDICA


    LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA
    GUIA DE PRACTICA – HEMATOLOGIA II

    PRACTICA N° 3
    RECUENTO PLAQUETARIO

    Introducción:

    Después de reconocer su papel protagónico en el mecanismo de la coagulación, la


    determinación de las alteraciones de las plaquetas se debe iniciar, en cualquier estudio,
    con la evaluación de su número o cuantificación, como parte del hemograma o cuadro
    hemático. Al presente, este examen se hace con instrumentos automatizados, basados
    en recuentos electrónicos de partículas, bien sea por impedanciometría o por conteo
    óptico electrónico.

    Cuando la sangre se recolecta con anticoagulante EDTA (ácido


    etilendiaminotetraacético), el volumen promedio plaquetario (MVP) aumenta en la
    primera hora, es estable las tres horas siguientes y posteriormente se incrementa, como
    consecuencia del paso de las plaquetas de su forma en disco a la esférica. Hay una
    relación inversa y no linear entre el MVP y el recuento plaquetario en un individuo
    normal. De manera que para obtener resultados reproducibles, las mediciones
    automatizadas deberán hacerse entre una y tres horas después de obtener la muestra.

    Los procedimientos manuales para el recuento de plaquetas, que se mantienen como


    referencia o estándar de oro, no son fáciles de practicar y requieren de habilidad y
    experiencia por parte del técnico de laboratorio. Por el tamaño tan pequeño de las
    plaquetas, estas se pueden confundir con detritus y partículas inertes; además, su
    tendencia a la adhesividad hace engorroso su conteo en cámara con oxalato de amonio
    como diluyente y con el empleo de microscopio óptico con condensador de contraste de
    fase. Así, su reproducibilidad es muy pobre.

    En la actualidad, es obligado verificar o desvirtuar los recuentos manuales o al menos


    el reconocimiento de artefactos en los recuentos automatizados, en extendidos de
    sangre sobre lámina, bien sea de sangre capilar o del tubo de recolección de la muestra

    Método de BRECHER & CRONKITE (1,953 )

    Fundamento:
    La sangre entera se mezcla con una sustancia que lisa los glóbulos rojos dejando
    intactas las plaquetas.

    Reactivos

    EDTA – K2 (Extracción al Vacio)


    Oxalato de amonio 0,1 N 0 al 1%
    Obtención de la muestra:

    Se extrae sangre por punción venosa usando material de plástico y EDTA K2 como
    anticoagulante. El EDTA K2 debe usarse en una concentración aproximada de 2 mg por
    mL de sangre ya que a concentraciones mayores las plaquetas tienden a hincharse y
    romperse y a concentraciones menores no se evita su apelotonamiento.

    Muestra

    Si la muestra de sangre proviene de un pinchazo en el dedo, la punción debe ser limpia


    y dejar salir la sangre libremente. Desechar la primera gota de sangre. Si la muestra
    proviene de venopunción, debe ser recogida en una jeringa seca de plástico (o de cristal
    siliconado) , con una pequeña aguja, como mínimo de calibre 21. Hay que retirar la aguja
    antes de que la sangre se introduzca en un contenedor de plástico con EDTA. La sangre
    y el anticoagulante deben mezclarse cuanto antes y suavemente, para evitar la
    formación de espuma.

    Equipo
     Cámara de recuento fina de fondo plano (hemocitómetro de contraste de fase
    con reglas Neubauer).
     Preferiblemente, un microscopio de contraste de fase, equipado con un
    condensador de fase que trabaje a larga distancia; si no se dispone de éste,
    usar un microscopio óptico corriente.
     Pipeta automática de 20 microlitros (Volumen fijo).
     Pipeta automática de 100 – 500 µL
     Tubo de plástico 12 x 75 mm.
     Mezclador mecánico (Opcional)

    Procedimiento:

    1. Pipetear 0,38 ml de líquido diluyente en un tubo de plástico 12 x 75 mm


    2. Llenar una pipeta de 20 microlitros de sangre total con EDTA k2 hasta la marca,
    eliminando lo que sobre y limpiando el exterior de la puntera.
    3. Añadir el contenido de la pipeta al Oxalato de amonio al 1% y vaciar todo el
    contenido de sangre total hasta que la puntera quede limpia.
    4. Dejar en reposo de 10 – 15 minutos
    5. Pipetear la muestra preparada en el hemocitómetro en cámara humeda (Dejar un
    trozo de algodón húmedo o de papel filtrante en la placa, con el fin de evitar su
    evaporación).
    6. Cubrir la cámara con una placa de Petri durante 5 – 10 minutos, para que las
    plaquetas precipiten.
    7. Mediante un microscopio, contar las plaquetas en los mismos cuadrantes donde
    se cuentan los hematíes. Éstas pueden ser redondas u ovaladas. Se pueden ver en
    el mismo campo restos de hematíes lisados por el oxalato de amonio. Si no se
    dispone de microscopio de contraste de fase, se puede utilizar un microscopio
    óptico corriente, siempre que su condensador proporcione una luz de baja
    intensidad.
    8. Calcular el número de plaquetas por milímetro cúbico de sangre, según la fórmula
    que se describirá más adelante.
    Cálculo: Recuento = N x D/A x 10

    N x 400/80 x 20 x 10 = Número de plaquetas pmmc

     N = número de plaquetas contadas en los 5 cuadrantes


     400 = número total de cuadrantes de la cámara
     80 = número total de cuadrantes leídos
     20 = inversa de la dilución
     10 = se multiplica por 10 para expresar el resultado pmmc

    Valores referenciales:

    Adultos : 150,000 – 400,000 pmmc


    150 – 400 x 109 ( SI )

    Métodos Automatizados en el Recuento Plaquetario

    Se emplean contadores hematológicos donde el recuento plaquetario forma parte del


    perfil celular sanguíneo. Independientemente del método de recuento empleado, es
    importante observar al microscopio un frotis de sangre periférica, para evaluar cantidad,
    distribución, forma y tamaño plaquetario. Asimismo la observación del mismo permitirá
    dilucidar una trombocitopenia producida como consecuencia de acúmulos.
    Trombocitopenia inducida por EDTA
    Algunos pacientes presentan en su plasma un anticuerpo que reacciona con un
    criptoantígeno en presencia de EDTA. Este criptoantígeno se encuentra en la GP IIb –
    IIIa, lo que lleva a la aglutinación in vitro de las plaquetas con la consiguiente
    disminución en el recuento de plaquetas en la muestra obtenida con EDTA. Este
    descenso no se correlaciona con la cantidad de plaquetas presentes in vivo ni con la
    observación del frotis sanguíneo. En estos casos el recuento plaquetario se debe realizar
    con otros anticoagulantes como citrato o heparina.

    Método Manual

    El recuento de plaquetas en lámina periférica ha tenido a través del tiempo un sin


    número de metodologías ( Fonio, Dameshek, Factor 20000 y cada uno con sus
    respectivas modificaciones en el tiempo ) y todos ellos tratando de ser cada vez más
    fiables que el otro. Sin embargo posee una gran imprecisión que va según varios autores
    por el orden de 30%. Por esta razón, el recuento de plaquetas en sangre periférica solo
    nos brindara un aproximado del contaje real, siendo el método inmunológico ( CD 41 –
    CD 61 ) el Gold Standard aceptado por la ICSH en la actualidad.

    Método de Fonio

    Número de plaquetas en “n” campos x RBC ( x mm3 )


    N° Plaq (pmmc) =
    N° de hematíes en “n” campos

    Ejemplo General: se cuentan 10 campos óptimos de lectura y se hallan 350 plaquetas.


    El paciente tiene un conteo de hematíes de 4,500,000 pmmc y Hto = 46

    N° Plaq (pmmc) = 350 x 4,500,000 = 450,000


    3500

    Método de Damesheck

    N° Plaq (pmmc) = Número de plaquetas en “n” campos x (Hto + N) x 100 x 1000


    N° de hematíes en “n” campos
    Donde :
    N = 0, Hto igual o mayor a 44%
    N = 1, Hto entre 40 – 43%
    N = 3, Hto entre 36 – 39 %
    N = 5, Hto entre es menor o igual a 35%

    N° Plaq (pmmc) = 350 x (46 + 0 ) x 100 x 1000 = 460,000


    3000

    Método de Damesheck Modificado

    N° Plaq (pmmc) = N° plaquetas en 1000 hematíes x (Hto + N) x 100

    N° Plaq (pmmc) = 100 x (46 + 0 ) x 100 = 460,000

    También podría gustarte