2 Modulo Iii
2 Modulo Iii
INSTRUMENTALES
Métodos ópticos:
Espectrofotometría de
Ultravioleta visible molecular
ANÁLISIS QUÍMICO INSTRUMENTAL
SANDRA LILIANA MOLINA CORREA
UNIVERSIDAD DE LA SABANA
2
REGIÓN DEL ESPECTRO DE RADIACIÓN
ELECTROMAGNÉTICA
La radiación ultravioleta
abarca entre 160 nm a 400
nm, región de alta energía,
por lo cual este tipo de
radiación puede generar
quemaduras o lesiones en
los ojos
E0 E0
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
4
PROCESO DE INTERACCIÓN MATERIA Y
ENERGÍA (hυ)
Contienen electrones d y f:
Específicamente con la
Pueden ser los que participan Compuestos inorgánicos con
energía que contempla la
en los enlaces químicos metales de transición,
región UV- Vis
lantánidos y actínidos
Compuestos que
Todos los compuestos
Con los hidrocarburos absorben por encima Enlazantes: δ y π
orgánicos
de 185 nm
Y los componentes
atmosféricos, absorben
en este rango.
𝐴 + 𝐵 → 𝐴𝐵
δ* Antienlazante
Orbital π* Antienlazante
molecular
antienlazante
n→δ*
n→π*
π→π*
δ→δ*
ENERGÍA
A B n No enlazante
Orbital Orbital
atómico atómico π Enlazante
AB
Orbital molecular δ Enlazante
enlazante
δ→ δ* δ→ δ*
n→ δ* δ→ δ* n→ δ*
n→π* n→ δ* n→π*
π→π* π→π*
ENERGÍA=hυ
A este conjunto
Este fenómeno se
pertenecen
presenta:
compuestos con:
dxy dxz dyz dz2 dx2-y2
Metales de En presencia de
transición solventes
A este grupo
Importancia
pertenecen: 𝑀𝐿 + ℎ𝜐 → 𝑀+ 𝐿−
+ -
Compuestos de Alta: es una de
M L
coordinación o las más usadas
complejos en la vida real
ML
Presenta altos
coeficientes de
absortividad
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
Medida de
atenuación de la luz
Luego de pasar por una
muestra 15
TRANSMITANCIA
𝑃𝑇
Como fracción: 𝑇 =
𝑃𝑂
Matemáticamente
PO PT
es:
𝑃
Como porcentaje: %𝑇 = 𝑃𝑇 ×
𝑂
100%
Absorbancia
concentración, por lo cual puede 0,4
𝐴 = − log 𝑇 0,2
0,1
𝐴 = 2 − log %𝑇 0
0 2 4 6 8 10
Concentración
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
17
EJERCICIO 11
LAMBERT-BEER
Es válida con luz
monocromática
LEY DE
PO PT Ley de Beer:𝐴 ∝ 𝐶
Ley de Lambert: 𝐴 ∝ 𝑏
Ecuación
𝑨 = 𝒂𝒃𝑪 𝒐 𝑨 = 𝜺𝒃𝑪
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
20
ABSORBANCIA Y CONCENTRACIÓN:
COEFICIENTE DE ABSORTIVIDAD
𝑨 = 𝜺𝒃𝑪
Se mide la absorbancia de la misma
solución a diferentes longitudes de Es la que puede generar el única variable
onda
cambio en la absorbancia.
418 g/mol
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
LIMITACIONES DE LA LEY 26
Alta concentración
DE LAMBERT-BEER
Propias: se adapta
Cambio en el índice de refracción
Luz monocromática
Instrumentales: se
eliminan
Radiación parásita
Luz monocromática
Instrumentales:
se eliminan
Radiación parásita
𝑪 ≤ 𝟎, 𝟏 𝑴
Slón diluida Slón. concentrada
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
28
Alta concentración El coeficiente de absortividad es
LIMITACIONES DE LA LEY
LIMITACIONES DE LA LEY
0,9
0,8 Propias: se
ABSORBANCIA
adapta
DE LAMBERT-BEER
0,7
0,6 Cambio en el índice de
0,5
refracción
0,4
0,3
0,2 El analito puede estar en un
Químicas: se
0,1
equilibrio y cambia la forma
0 eliminan
0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 de interacción con la luz
CONCENTRACIÓN
Luz monocromática
+ −
𝐻𝐼𝑛 ⇌ 𝐻 + 𝐼𝑛 Instrumentales:
se eliminan
Radiación parásita
Luz monocromática
Instrumentales:
se eliminan
Radiación parásita
Propias: se
adapta
DE LAMBERT-BEER
Cambio en el índice de
refracción
Luz monocromática
Instrumentales:
se eliminan
Radiación parásita
Compartimiento
La radiación parásita es el resultado de dispersiones y
reflexiones de la radiación de la fuente, en varias superficies.
La radiación parásita difiere en su longitud de onda de la
radiación principal y puede no haber atravesado la muestra.
de la celda negro
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
y opaco
32
INSTRUMENTACIÓN: Fuente de
radiación
Sistema de
FUENTE DE Receptáculo tratamiento de
Monocromador Detector
RADIACIÓN de la muestra la señal y
lectura
Lugar donde se
ponen las celdas
Receptáculo de la
Compartimiento de
la celdas
Evita radiación
Es negro y opaco
muestra
parásita
Poliestireno 230-900 nm
Plástico
Polimetilmetacrilato 230-900 nm
Sistema de
Fuente de Receptáculo tratamiento de
Monocromador Detector
radiación de la muestra la señal y
lectura
Tomado de:
https://commons.wikimedia.org/wiki/File:PhotoMultiplierTubeAndScintillator.svg
Tubo fotomultiplicador
REJILLA
Emplea un gran número de diodos de
silicio dispuestos lado a lado en un solo
Tipos chip.
Sistema de
Fuente de Receptáculo tratamiento de
Monocromador Detector
radiación de la muestra la señal y
lectura
Adición
UN ANALITO
estándar
Adición
UN ANALITO
estándar
MÉTODOS DE CALIBRACIÓN
Curva de
Adición
calibración Patrón interno
estándar
sencilla
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
41
APLICACIONES CUANTITATIVAS: un
analito
MÉTODOS DE CALIBRACIÓN
Curva de
Adición
calibración Patrón interno
estándar
sencilla
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
También conocida como curva
patrón o curva analítica
42
Fundamentos En muestras sencillas
Se usa en:
No presentan errores instrumentales significativos
Preparar soluciones estándar de
forma exacta y precisa* CURVA DE CALIBRACIÓN
Sólido: disolverla en el solvente adecuado
3,5
Preparar la muestra problema 3
SEÑAL ANALITICA
Líquido: diluirla en el solvente adecuado 2,5
2
Parte 1,5
Preparar el blanco Contiene todo, menos el analito 1
experimental
0,5
CURVA DE Seleccionar la longitud óptima de 0
CALIBRACIÓN Tener la región de “luz monocromática”
medida 0 0,5 1 1,5
SENCILLA CONCENTRACIÓN
Tanto a los estándares como a la muestra
problema y blanco
Medir la absorbancia a la longitud Por encima: Diluir la muestra
de onda seleccionada
La absorbancia de la muestra debe estar dentro
del rango de medida de los estándares
Por debajo: concentrar la muestra
Corregir la señal medida en los estándares y
muestra problema, con la del blanco**
0,4
(C)= 2,57 mg/L
0,3
0,2
C2=(2,57mg/L*50,0mL)/25,00 mL
Concentración de Fe (ppm)
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
46
APLICACIONES CUANTITATIVAS: un
analito
MÉTODOS DE CALIBRACIÓN
Curva de
Adición
calibración Patrón interno
estándar
sencilla
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
Se usa cuando la matriz es
FUNDAMENTOS
muy compleja
47
Blanco Contiene todo menos el analito
SOLUCIONES
Absorbancia
Adicionar la muestra problema
PREPARACIÓN DE LAS de manera conocida y constante
ADICIÓN ESTÁNDAR
SOLUCIONES
0,700
0,600
0,500
Absorbancia
𝐶𝐴 𝑉0
𝐼𝑛𝑡𝑒𝑟𝑐𝑒𝑝𝑡𝑜 𝑒𝑛 𝑋 = −
0,400 𝐶𝑠
𝐶𝐴 𝑉0
𝐼𝑛𝑡𝑒𝑟𝑐𝑒𝑝𝑡𝑜 𝑒𝑛 𝑋 = −1,346 = −
0,300 𝐶𝑠
𝐶𝐴 = 5,38 𝑚𝑔/𝐿
0,200
Abs = 0,1533(V) + 0,2063
0,100
R² = 0,9996
0,000
0,00 1,00 2,00 3,00 4,00
Volumen estándar (mL)
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
52
APLICACIONES CUANTITATIVAS: un
analito
MÉTODOS DE CALIBRACIÓN
Curva de
Adición
calibración Patrón interno
estándar
sencilla
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
También conocida como
estándar interno
Fundamentos
Se usa cuando se presentan
errores sistemáticos y aleatorios
Principalmente debidos al instrumento, también
puede se por algún componente de la matriz
53
El estándar interno cumple con Es diferente al analito, pero presentan
las siguientes condiciones: propiedades similares.
PREPARACIÓN DE LAS Preparar la solución de la muestra problema de Adicional el patrón interno (preferiblemente
SOLUCIONES manera conocida constante)
Preparar el blanco
PATRÓN Parte
experimental
Donde absorbe el analito,
INTERNO
Seleccionar las longitudes de onda adecuadas
Donde absorbe el patrón interno
MEDICIONES
ESPECTROFOTOMÉTRICAS
A la λ donde absorbe el analito
Medir las absorbancias en las soluciones estándar
Corregir las absorbancias de los y la muestra problema
estándares y la muestra A la λ donde absorbe el patrón interno
problema con el blanco
Para el eje Y se hace la relación entre la señal del
Representar gráficamente la analito y el patrón interno.
relación entre la señal analítica
y la concentración Para el eje X la relación se hace, si el patrón
interno se adiciono de manera variable
Tratamiento Si en el eje X es solo [std]: εanalito/(εPI [PI])
de datos La pendiente puede ser:
Determinar la ecuación de la
Si en el eje X es solo [std]/[PI]: εanalito/εPI
gráfica
El corte en el eje Y es un valor cercano a 0
Adición
UN ANALITO
estándar
Adición
UN ANALITO
estándar
Adición
UN ANALITO
estándar
MÉTODOS DE CALIBRACIÓN
Curva de
Adición
calibración Patrón interno
estándar
sencilla
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
[A]=[B] εA>0 εB>0
εB~0 εA~0 59
[X]=[Y]
εX>εY εY>εX
Adición
UN ANALITO
estándar
𝐴550 𝑛𝑚 = 0,183 = 9970𝑀−1 𝑐𝑚−1 × 𝐶𝐹𝑒 × 1,00𝑐𝑚 + 34𝑀−1 𝑐𝑚−1 × 1,00𝑐𝑚 × 𝐶𝐹𝑒
𝐴396 𝑛𝑚 = 0,109 = 84𝑀−1 𝑐𝑚−1 × 𝐶𝐹𝑒 × 1,00𝑐𝑚 + 856𝑀−1 𝑐𝑚−1 × 1,00𝑐𝑚 × 𝐶𝐹𝑒
Fe=0,0000179 M
Cu= 0,000126 M
[X]=[Y]
εX>εY εY>εX
Adición
UN ANALITO
estándar
DEDUCCIÓN
DE LA
ECUACIÓN
PARA MLRA
𝑨𝒎𝒊𝒙 𝑪𝑿 𝑪𝒀 𝑨𝑺𝒀
= +
𝑨𝑺𝑿 𝑪𝑺𝑿 𝑪𝑺𝒀 𝑨𝑺𝑿
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
70
ANÁLISIS DE REGRESIÓN LINEAL A
MULTI-LONGITUDES DE ONDA (MLRA)
𝑨𝒎𝒊𝒙 𝑪𝑿 𝑪𝒀 𝑨𝑺𝒀
= +
𝑨𝑺𝑿 𝑪𝑺𝑿 𝑪𝑺𝒀 𝑨𝑺𝑿
y = b + m x
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
71
EJERCICIO 17
4 4
3,5 3,5
Amix/AsCr
Amix/AsCr.
3 3
2,5 2,5
60 25
40
15
Amix/AsCo
Amix/AsCo
30
10
20
5
10
0 0
0 5 10 15 20 25 0 2 4 6 8 10 12
AsCr/AsCo AsCr/AsCo
Presentación desarrollada por Sandra Liliana Molina Correa
74
EJERCICIO 18
Harris, D.C. (2010) Quantitative Chemical Analysis. Nueva York: W. H. Freeman and
Company. Pág104-111, 396-403, 419-423, 445-458
Harvey, D. (2000) Modern Analytical Chemistry. Boston: Mc Graw Hill. Pág 109-117,
382-388, 395-397, 400-402
Skoog, D.A.; Holler, F.J.; West, D.M; Crouch, S.R. (2015) Fundamentos de Química
Analítica. México: Cengage Learning Editores. Pág 658-673, 684-713, 722-734
Skoog, D.A.; Holler, F.J.; Crouch, S.R. (2008) Principios de análisis instrumental.
México: Cengage Learning Editores. Pág 336-342, 348-361, 367-371, 375-378