Practica 2 - Extracción Casera de Ácidos Nucleicos de Células Animales

EXTRACCIÓN CASERA DE ÁCIDOS NUCLEICOS DE CÉLULAS ANIMALES
Lina Dávila Aguilera, Sarimar Hernández Tapia, Lucelys Pérez Vergara, Paola Rivera Ávila,
Jorge Ramos Berrocal.
[email protected], [email protected], [email protected],
[email protected], [email protected]
Universidad de Sucre, Facultad de Educación y Ciencias
Departamento de Biología y Química
Programa de Biología
Sincelejo, Sucre, Colombia.
Marzo, 2020.
Resumen: Para la elaboración de este ensayo, se pretendía observar, a través de la extracción

de ADN de un tejido animal, las fibrillas de ADN que se encontraban en el mismo, por eso se
planteó la utilización de métodos eficaces y conocidos, para realizar este experimento.
Palabras claves: Extracción, ácidos nucleicos.
1. Introducción: Los ácidos de esta forma debido al tratamiento

nucleicos hacen parte de las realizado para su obtención.
instrucciones necesarias para
dirigir la célula, estos se 2. Materiales y métodos:
encuentran compactados en
cromosomas, es por esto que ● 8 gr de higado de pollo
muchos investigadores se dan a la ● Gasa
tarea de conocer y estudiar el ● Agua destilada
ADN, ya sea para predecir ● 2 Beakers
● Solución salina
diferentes expresiones de genes o
● Tubos
para conocer más a fondo su ● Gotero
estructura. ● Probeta
existen diferentes métodos para ● Jabon liquido
extraer el ADN; se le llama ● Etanol
extracción al método por el cual se ● Cuchillas
obtiene ADN a partir de material ● Mortero
biológico, en este caso el material
biológico a utilizar fue un trozo de
hígado de pollo, y el método de Se tomó una porción de hígado de
extracción fue a partir de la aproximadamente 8 gr de peso al que,
utilización de técnicas físicas, posteriormente, se le retiró la película que
como la maceración mecánica,con le cubría para proceder a realizar
el objetivo de poder observar la maceración mecánica usando un mortero,
formación de fibrillas compactas agregando poco a poco 20 ml de agua
de ADN. las cuales se encuentran destilada. Se dejó reposar el macerado
durante cinco (5) minutos para luego también contribuye a la liberación del
llevarlo a filtración la primera vez con el material genético.
fin de desechar los restos de tejido (Figura La filtraciones sucesivas ayudan a separar
1) y la segunda para obtener el los componentes no solubles como
sobrenadante (Figura 2). material fibroso entre otros, permitiendo
Una vez obtenido el sobrenadante, se separar el ADN. Una vez filtrado,se tiene
midió el volumen del mismo con ayuda de que los grupos fosfato del ADN son
una probeta para luego transferirlo a un polares y se encuentran cargados de forma
beaker, donde se agregó un volumen negativa, lo que conlleva a que el ADN sea
semejante de NaCl 2M. Se le agregó jabón insoluble en alcoholes. Lo que se buscaba
líquido (Figura 3), se dejó reposar por al agregar el etanol era reducir las fuerzas
espacio de diez (10) minutos para luego repulsivas entre las cadenas, provocando
separar la solución en dos tubos de ensayo un plegamiento de ADN que le hace
que se sometieron a centrifugación a 1200 insoluble y fácilmente distinguible. En la
r.p.m por cinco (5) minutos (Figura 4). práctica de laboratorio no fue necesario
Posteriormente, se tomó el sobrenadante usar la barra de vidrio para intentar sacar
de los tubos y se transfirió a un beaker los filamentos de ADN, pues, al someter
limpio donde se añadieron 20 ml de etanol las muestras a más de una centrifugación,
absoluto frío por las paredes hasta la se obtuvo poca cantidad de sobrenadante,
formación de dos capas (Figura 5). pero alta pureza, por lo que los filamentos
Finalmente, se observó la formación de de ADN obtenidos se organizaron en una
filamentos de DNA en la interfase de la masa compacta fácilmente observable,
solución. como se evidencia en la figura 6.
3. Resultados: 5. Conclusiones:
Para estudios genéticos
Mediante la realización de este profesionales se requieren diversos
experimento se obtuvieron filamentos de protocolos y materiales
ADN completamente distinguibles y con contaminantes. Gracias a la
apariencia compacta (Figura 6). realización de este ensayo se
conocieron y practicaron algunos
4. Discusión: metodos de extraccion de ADN,
Para realizar este experimento se usó además de identificar las
hígado de pollo por ser este un buen propiedades del mismo.
material para realizar la extracción.
Mediante las fricciones en el mortero, se
buscaba romper la pared celular y uniones 6. Bibliografía:
intercelulares, facilitando el efecto de lisis ● Toda Materia, Blog de
para la liberación del material genético. contenidos escolares. Zita,
Por otro lado, el detergente ayuda a A. (2019). Extraído de:
romper las membranas celulares https://www.todamateria.co
compuestas de lípidos (Es bien sabido que m/extraccion-adn-
la célula posee una bicapa lipídica), lo que experimento/.
● (martinez Laura) Extraído contacto con los lípidos éstos se
de:.http://genetica.uab.cat/b separan de la membrana
ase/documents/genetica_ge rompiéndola. La estructura de los
n/Laura%20Mart lípidos es similar a la del
%C3%ADnez%20Mart detergente y eso hace que se
%C3%ADn2015_4_19P21 combinen, formando una burbuja
_19.pdf de detergente y lípidos.(martinez
Laura).
7. Cuestionario: ● ¿A que se le denomina

● Mencione cómo se da el proceso desproteinización, en el proceso de
bioquímico para liberar el ADN purificación del ADN?
contenido en el núcleo, que función R/:El proceso de extracción del
cumple en este proceso el ADN genómico sigue ciertas
detergente. pautas para su correcta purificación
R/: El DNA se encuentra en el que son muy diferentes a los
interior del núcleo de las células empleados en la purificación de
eucariotas rodeado de proteínas proteínas, lo que refleja las
(histonas) que lo mantienen unido diferencias básicas en la estructura
y compactado. Para poder aislarlo de estos dos tipos de
y observarlo se deben deshacer la macromoléculas. El primer paso en
membrana plasmática y la la purificación del ADN por lo
envoltura nuclear y también se general consiste en homogeneizar
precisa la desnaturalización de las las células y aísla los núcleos de los
proteínas. cuales se extrae el ADN. El medio
- Detergente: Las membranas de de extracción ordinario contiene un
las células están formadas por dos detergente (SDS); a continuaciones
capas de lípidos con proteínas le agrega solución de te para
transmembrana a través de estas. El resuspender el ADN, luego los
detergente ayuda a romper la ácidos nucleicos se precipitan
bicapa de fosfolípidos de las añadiendo etanol .Para concluir el
membranas plasmáticas y la análisis de la extracción del ADN
envoltura nuclear (Imagen 1). Los hay que resaltar que en este
lípidos de la membrana se proceso ocurre una lisis celular lo
descomponen debido al detergente cual significa que el ADN queda
que deshace las uniones que libre por consiguiente hay que
mantienen la membrana junta. protegerlo de las enzimas porque
Cuando el detergente se pone en estas podrían degradarlo.
8. Apéndices:
Figura 1. Primer filtrado del hígado.
Figura 2. Adición de solución salina.
Figura 3.
Adición de jabón líquido. Figura 4. Tubos con sobrenadante.
Figura 5. Evidencia de dos fases.
Figura 6. Filamentos de ADN.

Practica 2 - Extracción Casera de Ácidos Nucleicos de Células Animales

Cargado por

Información del documento

Descripción original:

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Practica 2 - Extracción Casera de Ácidos Nucleicos de Células Animales

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

EXTRACCIÓN CASERA DE ÁCIDOS NUCLEICOS DE CÉLULAS ANIMALES

Resumen: Para la elaboración de este ensayo, se pretendía observar, a través de la extracción

Palabras claves: Extracción, ácidos nucleicos.

1. Introducción: Los ácidos de esta forma debido al tratamiento

7. Cuestionario: ● ¿A que se le denomina

También podría gustarte