UNIVERSIDAD COOPERATIVA DE neutralizar la estreptolisina O, impidiendo

COLOLOMBIA su actividad hemolítica. Esta

determinación se lleva a cabo ensayando
PROGRAMA DE MEDICINA
una suspensión de partículas de látex
CURSO PROCESOS (partícula facilitadora con Ag solubles)
INMUNOLOGICOS recubierto con estreptolisina frente al
suero. La ausencia o la manifestación de
INFORME DE LABORATORIO #1 aglutinación muestran la existencia o no de
GRUPO: 821 (A) ASTO.
SUBGRUPO: 3 MATERIALES NECESARIOS:
INTEGRANTES:
1. Reactivo látex PCR
- ISABELLA ACOSTA 2. Control positivo
- NATALIA JARABA 3. Control negativo
- JUAN DAVID LÓPEZ
4. Láminas de aglutinación (plásticas
fondo negro)
5. Cronómetros
ANTIESTREPTOLISINA O 6. Pipetas serológicas o automatizadas
7. Solución salina (o.9 % de NaCl)
8. Suero del paciente
INTRODUCCIÓN:
9. Rotador automático.
La anti-estreptolisina O es el conjunto de
anticuerpos específicos tipo IgG frente a la RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA:
estreptolisina O, una enzima producida por Suero fresco recolectado por
estreptococos β-hemolítico del grupo A centrifugación de sangre coagulada. Puede
ser refrigerado entre 2°-8°C durante 48
(Streptococcus pyogenes). Esta prueba
horas o conservado de manera indefinida
mide la cantidad de antiestreptolisina O en
congelado a -20°C.
la sangre, se solicita para determinar si una
infección reciente por estreptococos del PROCEDIMIENTO:
grupo A puede ser la causa de una
enfermedad renal conocida como TÉCNICA CUALITATIVA:
glomerulonefritis, endocarditis bacteriana 1. Dejar que el reactivo, los controles y la
y una fiebre reumática en una persona con muestra alcancen la temperatura ambiente
(20-30°C).
signos y síntomas sugestivos. Se debe
2. Agitar suavemente el vial del reactivo
realizar el diagnostico basado en una
para dispensar y re-suspender las
evaluación integral de datos clínicos y de
partículas de látex en la solución tampón.
laboratorio, no solo tomando en cuenta un No agite violentamente.
único resultado. 3. Dosificar 0.050 ml (50μl) del suero en
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA: una de las secciones de la lámina.
4. Dosificar 0.050 ml (50μl) del control
La realización de esta prueba se basa en la positivo y 0.050 ml (50μl) del control
capacidad de estos anticuerpos, para
negativo en secciones diferentes de la 9. Mezclar con palillos diferentes cada
lámina. sección.
5. Añadir una gota del reactivo junto a la 10. Rotar manualmente o en rotador
gota del suero, del control positivo y del automático de la misma manera descrita
control negativo. para la técnica cualitativa.
6. Mezclar las gotas con un palillo de 11. Observar la presencia o ausencia de
manera circular hasta cubrir toda la aglutinación transcurrido el tiempo.
superficie de la sección de la lámina.
7. Agitar la lámina con un suave INTERPRETACIÓN /
movimiento de rotación, ya sea CORRELACIÓN CLÍNICO-
manualmente o en el rotador automático PATOLÓGICA:
(60-80rpm) durante 3 minutos. La antiestreptolisina O puede detectarse
8. Observar la o presencia o ausencia de desde una semana a un mes después de la
aglutinación transcurrido dicho tiempo. infección del estreptococo. Esta bacteria
causa una gran variedad de infecciones en
INTERPRETACIÓN DE LOS las vías respiratorias como lo son la
RESULTADOS: faringitis aguda, u otras como
La presencia de aglutinación indica un glomerulonefritis, fiebre reumática,
contenido de ASTO en el suero igual o escarlata, entre otras.
superior a 200 UI/ml.
La ausencia de aglutinación indica un
contenido de ASTO en el suero inferior a PREGUNTAS
200 UI/ml. COMPLEMENTARIAS:

TÉCNICA SEMI-CUANTITATIVA: 1. ¿Por qué el ASTO no es prueba

1. Preparación de las diluciones del suero diagnóstica en infección estreptocócica?
sobre la misma lámina que tiene las
secciones (descritas en el recuadro El ASTO no es prueba diagnóstica en
adjunto). infección Estreptocócica puesto que, por
2. Dosificar 0.050 ml (50μl) en las no ser una prueba sensible y no detectar los
secciones 1 y 2 de la lámina. niveles de anticuerpos suficientes en
3. Con la misma pipeta aspirar y expulsar sangre, puede dar como resultado un falso
varias veces el suero y la solución salina negativo. Se pueden realizar otros tipos de
contenida en la sección 2 pruebas de diagnóstico de procesos
4. Transferir 0.050 ml (50μl) a la sección microbiológicos como ELISA, técnica por
3. la cual un antígeno se detecta mediante un
5. Realizar la misma operación del paso 3. anticuerpo enlazado a una enzima. Pueden
6. Transferir 0.050 ml (50μl) a la sección 4 presentarse también situaciones en donde
7. Realizar la misma operación hasta llegar los anticuerpos permanecen en la sangre
a la sección 6, en la que después de del paciente durante un largo tiempo, en
realizada la mezcla, se desechan los 0.050 donde se diagnostica la presencia de
ml (50μl). ASTO, lo que nos puede llevar a un falso
8. Agitar suavemente el vial de los positivo.
reactivos y agregar una gota de este a todas
las secciones.
2. ¿Qué otras pruebas podrían ser útiles 4. ¿Cuál es el tratamiento para un
y complementarias al ASTO en la paciente que presenta el ASTO elevado?
dilucidación de infección
estreptocócica? El diagnóstico es realizado por medio de
las manifestaciones clínicas y con la ayuda
- Anti-DNasa B: Es un examen de del laboratorio, cultivo de faringe para la
sangre para buscar anticuerpos determinación de la bacteria y pruebas
contra una sustancia (proteína) anticuerpos estreptocócicos (ASTO).
producida por el estreptococo del Tener los niveles elevados de ASTO no es
grupo A. Esta causa la amigdalitis indicativo de fiebre reumática, pero si
estreptocócica y cuando se utiliza indica que esa persona ha estado en
junto al examen de ASTO se contacto con la bacteria, por lo general se
identifican mayor cantidad de le suministra un tratamiento con
infecciones. penicilina.
- Estreptocócico: Se realiza para
detectar estreptococos del grupo A, 5. ¿Por qué en los niños el ASTO
este tipo de bacteria es la causa más muchas veces no es una prueba útil?
común de la faringitis
Estreptocócica, requiere de una En pacientes infectados por esta bacteria
muestra faríngea que toma se les puede dar un diagnostico entre tres a
alrededor de 7 minutos. seis semanas, o puede permanecer elevado
durante un tiempo indefinido, la
3. Esquematizar la patogenia de la persistencia de este anticuerpo en el
glomerulonefritis post estreptocócica. organismo de los niños causa mucha
confusión, pues se desconoce su
permanencia durante infecciones poco
complicadas. Además los niños por sus
actividades normales diarias, siempre
están expuestos a gérmenes y bacterias,
por esto el ASTO siempre estará elevado.
 PROTEINA C REACTIVA consiste en que un Un médico o
(PCR) profesional de la salud toma una muestra
de sangre de una vena de un brazo usando
INTRODUCCION: una aguja pequeña. Después de insertar la
La prueba de proteína C reactiva mide el aguja, extrae una pequeña cantidad de
nivel de proteína C reactiva (PCR) en la sangre y la coloca en un tubo de ensayo o
sangre. La PCR es una proteína producida frasquito. Tal vez sienta una molestia leve
por el hígado. Se envía al torrente cuando la aguja se introduce o se saca, Este
sanguíneo en respuesta a una inflamación. proceso generalmente dura menos de cinco
La inflamación es la manera en que el minutos. Aunque en este laboratorio se
cuerpo protege los tejidos cuando ocurre
explicó más en el ámbito de pruebas
una lesión o una infección. Normalmente,
cuantitativas o cualitativas y como
usted tiene niveles bajos de proteína C
reactiva en la sangre. Los niveles altos realizarlo en condiciones no de tipo
pueden ser signos de una infección grave o clínicas para ser exactos.
de otro trastorno. Otros nombres: proteína
c-reactiva, PCR de alta sensibilidad; PCR-
OBJETIVOS:
as.

A nivel mundial se han demostrado  Se busca comprender y aplicar esta

muchos usos para este tipo de pruebas de prueba más que todo en el ámbito
carácter fundamental en el estudio de clínico que es hacia dónde va
distintas enfermedades ya sea para su dirigido el trabajo en cuestión
prevención o control como por ejemplo La
hacia el área de la salud ya que
prueba de PCR se puede utilizar encontrar
o seguir enfermedades que causan dicha compresión nos ayudara a la
inflamación, por ejemplo: detección temprana de factores de
enfermedades de carácter
 Infecciones bacterianas, como la sepsis, infecciosa en mayor proporción.
un problema grave que a veces pone en
peligro la vida  También enfatizar en los
 Una infección por hongos parámetros para interpretación
 Enfermedad intestinal inflamatoria, que correcta sobre los resultados de
causa hinchazón y sangrado en los dicha prueba y que factores pueden
intestinos influir en que la prueba arroje un
 Una trastorno autoinmune, resultado errónea
como lupus o artritis reumatoide MATERIALES
 Una infección del hueso llamada
osteomielitis  Reactivo látex PCR
 Control positivo
 Control negativo
En este trabajo se buscó enfatizar en los
puntos clave de cómo realizar dicha  Láminas de aglutinación(
prueba y su importancia clínica el cual plásticas fondo negro)
  Cronómetros secciones (descritas en el recuadro
 Pipetas serológicas o adjunto).
automatizadas 2. Dosificar 0.050 ml (50μl) en las
 Solución salina (o.9 % de NaCl) secciones 1 y 2 de la lámina.
 Suero del paciente
3. Con la misma pipeta aspirar y expulsar
 Rotador automático.
varias veces el suero y la solución salina
PROCEDIMIENTO: contenida en la sección 2
TÉCNICA CUALITATIVA: 4. Transferir 0.050 ml (50μl) a la sección
3.
1. Dejar que el reactivo, los controles y la
muestra alcancen la temperatura ambiente 5. Realizar la misma operación del paso 3.
(20-30°C).
6. Transferir 0.050 ml (50μl) a la sección
2. Agitar suavemente el vial del reactivo 4
para dispensar y re-suspender las
7. Realizar la misma operación hasta llegar
partículas de látex en la solución tampón.
a la sección 6, en la que después de
No agite violentamente.
realizada la mezcla, se desechan los 0.050
3. Dosificar 0.050 ml (50μl) del suero en ml (50μl).
una de las secciones de la lámina.
8. Agitar suavemente el vial de los
4. Dosificar 0.050 ml (50μl) del control reactivos y agregar una gota de este a todas
positivo y 0.050 ml (50μl) del control las secciones.
negativo en secciones diferentes de la
9. Mezclar con palillos diferentes cada
lámina.
sección.
5. Añadir una gota del reactivo junto a la
10. Rotar manualmente o en rotador
gota del suero, del control positivo y del
automático de la misma manera descrita
control negativo. 6. Mezclar las gotas con
para la técnica cualitativa.
un palillo de manera circular hasta cubrir
toda la superficie de la sección de la 11. Observar la presencia o ausencia de
lámina. aglutinación transcurrido el tiempo
7. Agitar la lámina con un suave RESULTADOS OBTENIDOS:
movimiento de rotación, ya sea
FACTOR DE DILUSION DEL ULTIMO
manualmente o en el rotador automático
CIRCULO X 6 = mg/l
(60-80rpm) durante 3 minutos.
8. Observar la o presencia o ausencia de
aglutinación transcurrido dicho tiempo. 8 x 6= 48 mg/l PCR
TÉCNICA SEMI-CUANTITATIVA: INTERPRETACION DE LOS
RESULTADOS:
1. Preparación de las diluciones del suero
sobre la misma lámina que tiene las Basándonos en los resultados Podemos
observar que si hay una respectiva
aglutinación ya que el valor se encuentra el perfil lipídico y se realiza una
por encima de 6.0 mg/l. correlación apropiada
PREGUNTAS 3. Cuáles son las funciones
COMPLEMENTARIAS: biológicas de la Proteína C
Reactiva.
1. Esquematizar la estructura
molecular de la Proteína C La proteína C-reactiva (PCR) es un
Reactiva. marcador sensible de inflamación, así
como un predictor independiente de
enfermedad cardiovascular futura, la
cual es una de las principales causas de
muerte en todo el mundo. El papel de
la inflamación en esta entidad ha sido
bien documentado en la última década,
y se ha demostrado inflamación en
todas las fases de la aterosclerosis,
abarcando desde los momentos del
inicio y el crecimiento, hasta la ruptura
de la placa, La proteína C reactiva
2. Caracterice la Proteína C (PCR) es producida por el hígado. El
Reactiva de alta sensibilidad nivel de PCR se eleva cuando hay
(PCRHs) y su importancia en inflamación en todo el cuerpo. Esta es
Infarto agudo del Miocardio una de un grupo de proteínas llamadas
(IAM). "reaccionantes de fase aguda" que
aumentan en respuesta a la
La evidencia disponible sugiere que un inflamación. Los niveles de
aumento moderado de la reaccionantes de la fase aguda
concentración de proteína C reactiva responden a las proteínas inflamatorias
de alta sensibilidad (PCR hs) denominadas citosinas. Estas son
incrementa el riesgo de infarto del producidas por los glóbulos blancos
miocardio y enfermedad durante una inflamación.
cerebrovascular. Se ha demostrado que
la PCR-us brinda información en cada
uno de los niveles de riesgo 4. ¿Cuáles medicamentos pueden
cardiovascular de acuerdo a la escala
interferir en la prueba?
de Framingham; niveles de PCR-us
menores a 1 mg/L, entre 1 y 3 mg/L, y Aumentados: principalmente estrógenos y
mayores a 3 mg/L, corresponden al anticonceptivos orales
riesgo cardiovascular bajo, medio y
Disminuidos: anticonceptivos orales
alto, respectivamente. El valor
(progesterona) antibióticos, terapia
predictor de la PCR-us se incrementa
antimicrobiana, sulfazona, penicilamina
cuando es evaluado en asociación con
etc.
 5. Qué relación hay entre la una enfermedad en el paciente para así
Proteína C Reactiva y la VSG? saber si se ha logrado una mejoría o no.

Todo radica en que el proceso inflamatorio ANEXOS:

en fase de actividad determina un
incremento de la concentración en el
plasma de diversas proteínas que, en
conjunto, se conocen como proteínas
reactivas o reactantes de fase aguda. Estas
proteínas proceden básicamente de un
aumento de su síntesis hepática mediada
por citocinas en respuesta a un estímulo
apropiado. Las dos pruebas más utilizadas
en la actualidad para la valoración de esta
respuesta de fase aguda son la velocidad de
sedimentación globular (VSG) y la
proteína C reactiva (PCR). La presencia de
diferentes proteínas en el plasma durante
los episodios de inflamación provoca un
cambio en la carga de la superficie de los
hematíes que tienden a sedimentar con
mayor rapidez. La VSG constituye la
prueba inespecífica más utilizada en la
práctica clínica para valorar la existencia
de inflamación.

CONCLUSION:
La evidencia demuestra que los factores
que se relacionan con esta prueba en su
composición fueron de gran importancia
ya que nos permitieron saber los
parámetros tanto correctos como
incorrectos que nos podría arrojar esta
prueba de importancia clínica.
Cabe resaltar que según las evidencias del
laboratorio se logran observar en casi
todas una aglutinación y esto nos conlleva
a comprobar la veracidad de dicha prueba
en pocas palabras que se realizó de forma
correcta ya que arrojo los resultados
deseados. También hay que aplicar esta
prueba con el fin de prevenir las distintas FACTOR REUMATOIDE
patologías o controlar el seguimiento de
 inmunológicamente distintos, es siempre
recomendable realizar en el paralelo la
INTRODUCCION
prueba de látex y la prueba de WaaleRose
El factor reumatoide es un análisis que modificada (celarkit AR, hematíes
mide los niveles de la sustancia “Factor sensibilizados con IgG animal). Las
Reumatoide” en la sangre y este ayuda a inmunoglobulinas dirigidas contra el
diagnosticar si el paciente tiene artritis fragmento Fc de la Ig antóloga han
reumatoide. recibido el nombre de Factores
Este factor es una especie de anticuerpo Reumatoides por aparecer en un alto
que actúa de forma autónoma y responde a porcentaje en pacientes con artritis
una inflamación que es causada por la
reumatoide. Sin embargo, el Fr aparece en
artritis. Los anticuerpos se elevan en la
niveles bajos comúnmente en pacientes
sangre al detectar sustancias
extrañas como por ejemplo, las bacterias, sanos de edad avanzada, así como también
por el contrario, el auto anticuerpos, atacan en pacientes afectados por otras entidades
las proteínas del propio cuerpo. clínicas caracterizadas por inflamación
Si cumples con un perfil reumático, es crónica o hipergammaglobulinemia o por
decir, que hay sospecha de padecer artritis ambas.
o artritis idiopática juvenil, lo más
probable es que le sea practicado este PROCEDIMIENTO
examen para confirmar o descartar él El reactivo de RF es una suspensión de
padecimiento. Los síntomas son los partículas de látex de poliestireno de
siguientes: tamaño uniforme sensibilizadas con
 Sentir un cansancio extremo
inmunoglobulina humana. Las partículas
 Pérdida de peso repentina
 Dolores musculares
de látex ponen de manifiesto la reacción
 Hormigueo o entumecimiento en Antígeno- Anticuerpo. Si debido a la
las manos presencia del FR en el suero del paciente
 Por la mañana se sienten rígidas las tiene lugar dicha reacción, la suspensión
articulaciones de látex pierde su aspecto uniforme,
 Fiebres leves haciéndose evidente una clara
aglutinación. Esto se debe a que el FR
presente en el suero, reacciona con la IgG
El factor reumatoide (FR) es una
unida a las partículas de látex, iniciando la
inmunoglobulina (Ig), mayoritariamente
formación de una malla entre las mismas.
IgM, que tiene la propiedad de reaccionar
Si el suero tiene 10 o más UI/ml de FR, se
contra la Fc de la IgG, no solo humano,
produce una clara aglutinación. Estas
sino también de otras especies. Esta
unidades se establecieron de acuerdo con
reacción de tipo Ag-Ac, actuando el FR, en
la Preparación Internacional de Referencia
la misma, como un anticuerpo. El factor
de Suero de Artritis Reumatoide
reumatoide lo podemos encontrar en la
(PIRSAR) de la OMS.
mayoría de sueros adultos con artritis
reumatoides (AR) y otras enfermedades REACTIVOS Y CONTROLES
autoinmunes. Teniendo en cuenta que el
Reactivo látex RF: Suspensión de
factor reumatoide es probablemente un
partículas de látex de poliestireno
conjunto de varios factores
sensibilizadas con IgG humana, suero sobre la misma lámina que
suspendida en un tampón. Contiene tiene las secciones (descritas en el
azida sódica al 0.1%. recuadro adjunto).

Control positivo: Suero humano 2. Dosificar 0.020 ml (20μl) en las

diluido que contiene más de 20 UI/ml secciones 1 y 2 de la lámina.
de FR (listo para su uso). Contiene 3. Con la misma pipeta aspirar y
azida sódica al 0.1%. expulsar varias veces el suero y la
Control negativo: Suero humano solución salina contenida en la
diluido que contiene menos de 1 sección 2
UI/ml de FR (listo para su uso). 4.Transferir 0.020 ml (20μl) a la sección 3
Contiene azida sódica al 0.1%.
5. Realizar la misma operación del paso 3.
MATERIALES NECESARIOS
6. Transferir 0.020 ml (20μl) a la sección4
-Reactivo látex FR
7. Realizar la misma operación hasta
-Control positivo llegar a la sección 6, en la que
después de realizada la mezcla, se
-Control negativo desechan los 0.050 ml (50μl).
-Láminas de aglutinación (plásticas fondo 8. Agitar suavemente el vial de los
negro) reactivos y agregar una gota de este a
-Cronómetros todas las secciones.
9. Mezclar con palillos diferentes cada
-Pipetas serológicas o automatizadas
sección.
-Solución salina (o.9 % de NaCl) 10. Rotar manualmente o en rotador
-Suero del paciente automático de la misma manera
descrita para la técnica cualitativa.
-Rotador automático.
11. Observar la presencia o ausencia de
RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA aglutinación transcurrido el tiempo.
Usar suero fresco recolectado por INTERPRETACION DE
centrifugación de sangre coagulada. RESULTADOS
El suero puede ser refrigerado entre
2°-8°C durante 48 horas o conservado Luego de realizar el último paso en el
de manera indefinida congelado a - rotador automático encontramos
20°C. No es necesario inactivar el aglutinaciones en las primeras 4 marcas
suero. circulares.
No deben usarse sueros hemolizados
o contaminados. No usar plasma. 8x10= 80 UI/ml FR
El factor reumático fue mayor a 40 UI/ml
PROCEDIMIENTO DE por consiguiente es positivo.
REALIZACION DE LA
PRÁCTICA: PREGUNTAS
1. Preparación de las diluciones del COMPLEMENTARIAS.
1. ¿Por qué los resultados del FR en hematíes de oveja, son aglutinados por FR
niños no son confiables, aun presentes en la muestra del paciente.
presentando enfermedad autoinmune?
R// Los resultados del FR como tal, no son ANEXOS FOTOGRAFICOS
confiables. Debido a que por ser una
prueba no da unos resultados concretos,
pero es recomendable realizar otras
prácticas para confirmar dichos exámenes.
Existen otras enfermedades que
presentación una inflamación y por ende
unos resultados altos de FR.
2. ¿Qué otras pruebas complementarias
se le realizan al paciente para el
diagnóstico de Artritis Reumatoide?
R// Debido que aún no se cuenta con un
examen específico para diagnosticar
Artritis Reumatoide aparte del
interrogatorio y el examen físico se lleva a
cabo una serie de pruebas como lo son: la
VSG, la PCR, Los anti-CCP, tomografías
complementarias (TC) y una resonancia
magnética (RM) o un análisis de líquido
articular.
3. ¿Por qué no se debe usar plasma
como muestra para realizar la técnica
de FR?
R// Porque para realizar esta prueba, se
necesitan únicamente los componentes
que conforman el suero sanguíneo.
4. Además de IgM, ¿qué otras moléculas
pueden considerarse como factor
reumatoide?
R// IgG e IgA.

5. ¿Qué es la prueba de WaaleRose

modificada y cuál es su importancia?
R// es una técnica de hemoaglutinación en
porta para la detección cualitativa y
semicuantitativa de FR en suero humano.
Los hematíes estabilizados de oveja y
sensibilizados con IgG de conejo anti