Informe de Practica N°2

UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ
GALLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGIA
INFORME DE PRACTICA N°2
ASIGNATURA: BACTERIOLOGIA
GRUPO N°: 10
ESTUDIANTES:
Bances Vergara Luis Manuel
Mio Espino Marlo Alexis
Quintero Caicedo Gian Pierre
DOCENTE:
Olga Francia Arana
2021-I
Práctica N° 2: Obtención de un cultivo Puro
I.-Introducción
En la naturaleza, la mayoría de los microbios no están aislados, pero se incorporan a
poblaciones mixtas. Para estudiar las propiedades de estos microorganismos y sus
organismos, es necesario separarlos de otros microorganismos y tratar las especies
aisladas para obtener cultivos estériles o puros de los axones o medios puros son medios
que contienen un solo microorganismo y generalmente derivan de una sola celda. Su
crecimiento comienza en medio sólido, presentando una gran masa de células llamadas
colonias. El estudio de microorganismos en el campo clínico es muy importante. Porque
este nos permite descubrir las causas de ciertas afecciones en el cuerpo y crear formas
de prevenirlas con vacunas y antibióticos. Por lo tanto, medios de cultivo microbianos
son extremadamente poderosos para encontrar soluciones efectivas.
II.-Objetivos
 Conoce las técnicas de aislamiento in vitro del hábitat de las diferentes especies
bacterianas
 Aplica correctamente las técnicas de aislamiento secundario para obtener un
cultivo puro.
III.-Materiales y Métodos
Muestra tierra, agua, alimentos,

secreción nasofaríngea
(SNF), heces, sangre
Placas con agar Medio de cultivo usado
nutritivo (AN) normalmente como
rutina
para todo tipo de
bacteria.
Tubo con medio SIM Para determinación de

formación de sulfuro,
formación de indol y
movilidad de
organismos entéricos
Tubo con caldo utilizado en muchos
nutritivo procedimientos de
laboratorio solo o con
indicadores añadidos,
carbohidratos, líquidos
orgánicos, sales, etc. Es
el medio ideal para el
subcultivo de bacterias,
con miras a realizar
pruebas bioquímicas
Asa bacteriológica Sirve para la siembra
por
estrías e inoculaciones
Lamina excavada se emplea igualmente

como soporte para
realización de pruebas
serológicas de
aglutinación y pruebas
de motilidad
Laminilla Lamina de vidrio

rectangular
transparente utilizada
para
realizar observaciones
en el
microscopio.
Metodología
Seleccionar la muestra
Realizar el aislamiento primario, mediante la siembra por estría en la superficie del
medio sólido, Agar Tripticasa Soya (ATS)
Incubar las placas a 37C durante 24 horas en ambiente aeróbico
Describir las colonias (Considerar aspectos de: forma, tamaño, color, superficie,
consistencia, bordes, elevación)
Hacer la Tinción de las colonias empleando la técnica de Gram y proceder al estudio
microscópico de las células bacterianas.
Realizar el aislamiento secundario en tubo o vial con medio sólido inclinado. La
siembra se realiza por puntura con aguja bacteriológica y hacer el estriado en la
superficie inclinada
Incubar el tubo o vial a 37°C durante 24 horas

 Evaluar el crecimiento y confirmar la morfología bacteriana con tinción de Gram
 Se obtiene el Cultivo puro o cepa, el mismo que es etiquetado y rotulado
 Determinar la movilidad de las bacterias. Se utiliza dos técnicas:
1. Técnica de movilidad en medio
semisólido. Consiste en Sembrar por
puntura la cepa con aguja bacteriológica en
medio SIM. Incubar a 37°C durante 24
horas. Observar la movilidad de las
bacterias por desplazamiento perpendicular
a la estría vertical de siembra
2. Movilidad en lámina excavada. Consiste en

colocar un borde de vaselina en el perímetro de la
excavación. Sobre la laminilla colocar una gota del cultivo líquido de 24 horas.
Cuidadosamente hacer coincidir la excavación con la gota. Observar con objetivo de
menor y mayor aumento. Si el movimiento es localizado, se presume que la bacteria
tiene flagelos periticos, pero si el movimiento es rápido que se desplaza en el campo
microscópico, se presume que las bacterias tienen flagelos polares.
Determinar las características de crecimiento en medio líquido. Se utiliza un tubo con
caldo trípticasa soya. La siembra de hace con ansa bacteriológica (anillo); se toma una
pequeña porción de la cepa y se lava el ansa en el medio líquido. Se incuba a 37°C
durante 24 horas y se hace luego la lectura. Se puede observar: turbidez, sedimento,
película, flóculos, etc.
IV, -Resultados
Crecimiento bacteriano en medio solido

Borde
Forma
Tamaño
Elevación
Color
Figura n°1 Cepa de agar nutritivo
V.-Interpretación
En la figura N° 1se evidencia que se trabajó con agar nutritivo, se pudo evidenciar
crecimiento de colonias bacterianas a partir de las 48 hrs de incubación, hubo
crecimiento lento debido a que la muestra es de índole ambiental.
VI.-Conclusión
Se logró conocer las técnicas de aislamiento, lo que nos permite identificar y multiplicar
una cepa. Al aplicar las técnicas se pudo obtener un cultivo puro a partir de una muestra
ambiental que contiene una población mixta
BIBLIOGRAFÍA
Castaño Orozco, M. E. (2017). Guía de laboratorio: Microbiología
básica. Microbiología básica.(Documento de docencia N 26). Bogotá: Ediciones
Universidad Cooperativa de Colombia.
https://scienti.minciencias.gov.co/cvlac/visualizador/generarCurriculoCv.do?
cod_rh=0000089362
Sánchez-Romero, M. I., Moya, J. M. G. L., López, J. J. G., & Mira, N. O. (2019).
Recogida, transporte y procesamiento general de las muestras en el laboratorio de
Microbiología. Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica, 37(2), 127-134.
https://doi.org/10.1016/j.eimc.2017.12.002
Peris, V. (1997). Microbiología. bacteriología, medios de cultivo y pruebas
bioquímicas, micología general, parasitología general. Raquel Granados Pérez, Ma.
Carmen Villaverde Peris.
Prescott et al. (2004) “Microbiología”. 5ª Edición. Editorial Mc. Graw Hill
Interamericana.
Rojas Triviño, A. (2011). Conceptos y práctica de microbiología general. Facultad de
Ciencias Agropecuarias. https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/8391
Vázquez, C., Martín, A., de Silóniz, M. I., & Serrano, S. (2011). Técnicas básicas de
Microbiología. Observación de bacterias. Reduca (Biología), 3(5).
http://revistareduca.es/index.php/biologia/article/view/819

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Muestra tierra, agua, alimentos,

Tubo con medio SIM Para determinación de

Lamina excavada se emplea igualmente

Laminilla Lamina de vidrio

Incubar las placas a 37C durante 24 horas en ambiente aeróbico

Incubar el tubo o vial a 37°C durante 24 horas

2. Movilidad en lámina excavada. Consiste en

Crecimiento bacteriano en medio solido

Figura n°1 Cepa de agar nutritivo

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