Guia N°5. Extraccion de ADN Casero

UNIVERSIDAD PEDAGOGICA Y TECNOLOGICA DE COLOMBIA
FACULTAD DE CIENCIAS - ESCUELA DE BIOLOGIA

LABORATORIO DE BIOLOGÍA GENERAL
GUIA Nº 5. EXTRACCION DE ADN POR METODOS SENCILLOS Y CASEROS
Docente: ELSA HELENA MANJARRES HERNANDEZ
INTRODUCCIÓN
El ADN Acido desoxirribonucleico, es el polímero Biológico encargado de transmitir

la información Genética, está conformado por Nucleótidos, (un grupo fosfato, un
desoxirribosa y una base nitrogenada que puede ser Adenina, Citosina, Timina o
Guanina). Su estructura fue dilucidada en 1953 por los científicos Watson y Crick,
quienes propusieron un modelo de escalera en hélice en donde las bases
nitrogenadas conforman los escalones y el azúcar y el fosfato se ubican hacia la
parte exterior. Todas las células procariotas y Eucariotas contienen material
genético llamado ADN, en las células Eucariotas también existe ADN extra nuclear
en mitocondrias y cloroplastos.
Siendo el ADN la molécula más importante de las células vivas su aislamiento

comprende básicamente 5 pasos: Ruptura de las células eliminación de citoplasma
y membranas, eliminación de ARN, eliminación de proteínas y concentración de
ADN.
Para extraer el ADN primero es necesario romper las células para luego separar el
ADN y ARN del resto de los componentes celulares como proteínas y membranas
lipídicas. Un detergente es una solución capaz de disolver las membranas unidas a
las proteínas que están junto al ADN. La sal de mesa tiene un catión que se une a
la molécula de ADN y hace que cambie sus propiedades químicas, permitiendo que
el ADN precipite en presencia de alcohol. El alcohol además disuelve los azúcares
y proteínas. El ablandador de carne hace que las proteínas remanentes se
disgreguen permitiendo que el ADN adquiera más flexibilidad.
La extracción del ADN, se basa principalmente en la mezcla de métodos, en donde

se separa del resto de la célula, se precipita y se purifica.
OBJETIVOS
 Probar métodos sencillos de extracción de ADN de muestras vegetales.

 Detectar los diferentes procesos Mecánicos o Químicos mediante los que se
aísla al ADN del contenido célula.
MATERIALES
BIOLÓGICOS REACTIVOS VIDRIERIA Y OTROS EQUIPOS
Frutos de Banano, Alcohol antiséptico Palillos de madera o de cámara
fresa, papaya, o muy frio. pincho. fotográfica
Cebolla de bulbo, Agua fría Gaza o una tela en la licuadora
arvejas, durazno o Cloruro de sodio NaCl que se pueda colar, Estufa.
plátano, o (Sal de Cocina) cuchillas y cuchillos,
cualquier fruta que Detergente liquido Recipientes para medir
sea blanda, lava-loza o shampú como vasos
(Use uno anti grasa. desechables, botellas
solamente) Ablanda carnes, o plásticas, jeringas etc.
jugo de papaya o piña Nevera o hielo
Varilla de vidrio o Cucharitas desechables
carnes , jugo de piña o Un plato y un tenedor
solucion limpidora desechables
para lentes
PREGUNTA A RESOLVER: ¿Cuáles son las propiedades físicas y químicas del

ADN y ARN que les permiten ser separados y aislados del contenido de las células?
METODOLOGIA.
El material del que se va a obtener el ADN y el ARN, puede ser un vegetal o fruta
(solo uno) de cualquiera de las siguientes: Un durazno, unas 20 uvas, 10 fresas,
una naranja, una manzana, o una cebolla cabezona (use una sola clase de
vegetal o fruta).
1.Tome el material elegido, que este sano sin hongos manchas o mal olor
producido por descomposición si tiene cascara dura retírela con ayuda de un
cuchillo (por ejemplo, naranja, pera)
2. Haga trozos del material y póngalos en la licuadora, cubra con agua, hasta que
tape el material agregue dos cucharadas de sal y licue a alta velocidad por 3
minutos.
3. Vierta el licuado en un frasco de boca ancha y agregue otras dos cucharadas

de sal, agite con un palo de pincho por 10 minutos constantemente
4. Agregue, 2 cucharadas de detergente liquido (o champú anti graso) a la mezcla
agite con el palo de pincho constantemente, deje en reposo por 10 minutos.
5. Vierta la mezcla en un recipiente en el que se pueda calentar y caliéntala por

diez minutos sin dejar hervir.
6. Inmediatamente ponga la mezcla en hielo (o llévela al congelador) por 5

minutos, si no puede hacer este proceso déjela reposar en un sitio frio y fresco
por 10 minutos.
7. Luego pase la mezcla por una gasa limpia (filtre) o una tela en la que se pueda
colar
8. Lo que queda en la tela (grueso) deséchelo, lo que recoge se llama filtrado, y

se usa para continuar el proceso.
9. Agregue una solución de ablandador de carne (o jugo de papaya o de piña -

más o menos ¼ del volumen total de la mezcla)
Ejemplo: usted tiene la mezcla en un vaso desechable de los que se sirve
gaseosa, este mide más o menos 300 ml) ¼ de vaso de jugo o 2 cucharaditas de
ablanda carnes, todo esto se tiene que realizar en frío, deje en reposo por 10
minutos.
10. Agregue alcohol frío (¼ de un vaso desechable) suavemente por las paredes
cuidando de no mezclar el filtrado con el alcohol
En el límite del filtrado y el alcohol comenzará a aparecer el ADN. Ascendiendo

como burbujas blancas hacia la superficie del recipiente, deje en reposo, al cabo
de 15 minutos usted observara que sobre la superficie se forma una malla de
material. Si tiene una varilla de vidrio se puede tomar con cuidado y se podrá
extraer de la solución.
Coloque el ADN extraído sobre una servilleta y déjelo secar uno o dos días,
después tendrá una fina malla de ADN.
EXTRACCION DE MATERIAL GENETICO: METODO CASERO
Nombre: Esteban Nicolás Peña Coronado
1. Presente una página de evidencias fotográficas del proceso.

2. Construya un diagrama de flujo para el proceso realizado: indique tiempos.
3. Complete la siguiente tabla de datos para cada uno de los procesos. Incluya
procedimientos físicos o reactivos utilizados en cada caso.
OBJETIVO METODO
Ruptura celular Los métodos físicos más utilizados son el choque

osmótico, los ultrasonidos y la trituración mecánica.
El procedimiento más utilizado consiste en tratar las
células con lisozima.
Eliminación de proteínas El catabolismo proteico es el proceso por el cual

las proteínas son degradadas hasta liberar sus
aminoácidos constituyentes. Este proceso se
denomina también como proteólisis. La proteólisis
puede continuar en la degradación de aminoácidos.
Rompimiento de pared celular Existen varios métodos para romper la membrana
plasmática y su eficacia relativa depende del tipo de
célula que se está investigando. Los métodos físicos
más utilizados son el choque osmótico, los
ultrasonidos y la trituración mecánica.
Desintegración de La lisis celular es el proceso de ruptura de

membranas lipídicas la membrana celular de células o bacterias que
produce la salida del material celular, provocado
por lisinas. Según los métodos usados a la hora de
realizar el proceso de ruptura de la membrana
existen dos tipos de lisis: lisis química o lisis
mecánica.
Purificación del ADN La purificación de DNA es un paso clave en la

experimentación en Biología Molecular. Los métodos
de purificación de DNA se clasifican en dos grandes
categorías, según pretendan purificar DNA
cromosómico o DNA plasmídico. La purificación de
DNA plasmídico es la base de cualquier experimento
de clonación molecular.
4. En la siguiente tabla usted encuentra un listado de reactivos utilizados en los

procesos de extracción de ADN y ARN determine qué tipo de compuesto es, la
formula (si la tiene), y la acción física o química que le permite actuar en el proceso
a nivel celular o tisular.
Sustancia usada Tipo-de Forma en que actúa en el proceso.

compuesto
Detergente benceno sulfato Cuando el detergente se pone en contacto

/Shampoo de sodio con los lípidos éstos se separan de la
membrana rompiéndola
NaCl compuesto iónico Tiene un catión que se une a la molécula de

positivo ADN y hace que cambie sus propiedades
químicas, permitiendo que el ADN se
precipite en presencia de alcohol
Ablanda carnes cloruro de Ayuda a que el ADN se desempaquete y
potasio, sea más fácil su extracción también hace
maltodextrina, que las proteínas remanentes se
cidrato de sodio, disgreguen permitiendo que el ADN
y glutamato adquiera más flexibilidad.
monosódico
Alcohol frio Etanol El alcohol ayuda a separar las proteínas a

las que se encuentra unido el ADN además
alcohol es menos denso que el agua del
extracto y por eso flota el ADN
Solución salina ( cloruro de sodio al El agua salada ayuda a la precipitación en

agua sal) 0,9% (p/v) en agua el alcohol además La sal ayuda a separar
el ADN de las histonas.
Hielo H2O Ayuda a mantener el DNA intacto durante el

proceso de extracción
5. ¿Porque el ADN fluye hacia la capa de alcoholes?
Rta/La sal y el detergente rompen la pared y membranas celular y nuclear, y el

alcohol ayuda a separar las proteínas a las que se encuentra unido el ADN y este
al estar frio provoca que el ADN se separe del agua y precipite. Cuando el ADN se
separa de la solución acuosa, tiende agruparse, lo que hace que sea visible.
6. ¿Qué pasó con el ARN celular en cada proceso, de la misma forma que pasa
con el ADN Extra nuclear, mitocondrial y cloroplasmico?
Rta/ La extracción de ARN es una modificación de la extracción de ADN. La

principal diferencia es el empleo de inhibidores de ARNsas con la idea de impedir
la degradación del ARN por las endonucleasas intracelulares de la muestra o
presentes en el material, cosa que en esta experiencia no se hizo, a su vez se usó
un alcohol el cual es un material que se usa para eliminar ARN, cosa que pudo
comprometerlo en el proceso y finalmente, aunque este pudo llegar a ser extraído
junto al ADN en muy mal estado pues todo fue hecho para beneficiar a este y no al
ARN , este último seguramente fue eliminado al calentar la solución alrededor de 37
grados centígrados.
RESOLUCION DE LA PREGUNTA DE INVESTIGACION E INTERPRETACION
DE RESULTADOS.
¿Cuáles son las propiedades físicas y químicas del ADN y ARN que les permiten
ser separados y aislados del contenido de las células?
Rta/ La molécula de ADN es físicamente frágil, por ser larga, tortuosa y con un peso
molecular alto, lo que provoca que se someta a fuerzas hidrodinámicas que la
disgregan. El ADN de doble cadena (ADNds) se comporta como una estructura
rígida enrollada de forma aleatoria, regida por las repulsiones electrostáticas de las
pares de bases y el esqueleto de fosfatos cargados negativamente. Al pipetear,
agitar o revolver el ADN se genera un flujo hidrodinámico que puede separar las dos
cadenas de ADN; entre más larga la molécula, más débil la fuerza requerida para
esta rotura. Por ello, obtener fragmentos de ADN genómico es fácil, pero conforme
se requieran tamaños moleculares elevados
BIBLIOGRAFIA (incluya la utilizada para resolver su informe)
http://conogasi.org/articulos/extraccion-de-adn/
https://www.uv.es/tunon/pdf_doc/AcidosNucleicos_veronica.pdf
http://conogasi.org/articulos/extraccion-de-arn-total/
CONSULTA
La siguiente imagen muestra, los procesos que se conocen como dogma central de
la Biología, que es un principio universal que deben cumplir todas las células de los
seres vivos.
1. De acuerdo a esta imagen. Cuál es el papel del ADN, Cual el del ARN y cual el
de los aminoácidos.
Rta/ El ADN tiene la información almacenada en las secuencias de bases. Las

cuatro bases (C, A, T/U y G de la figura) son los bloques que componen el ADN y
el ARN. Durante la transcripción, una porción de ADN que codifica un gen específico
se copia en un ARN mensajero (ARNm) en el núcleo de la célula. Luego, el ARNm
lleva la información genética del ADN al citoplasma, en donde ocurre la traducción.
Durante la traducción, se elaboran las proteínas usando la información almacenada
en la secuencia de ARNm. El ARNm se une a una estructura llamada ribosoma que
puede leer la información genética. A medida que el ARNm pasa a través del
ribosoma, otro tipo de ARN llamado ARN de transferencia (ARNt) lleva hacia el
ribosoma los bloques que forman las proteínas, llamado aminoácidos. El ARNt que
lleva el aminoácido se une a una secuencia de ARNm compatible. A medida que
cada ARNt se une con la cadena de ARNm, el aminoácido que lleva se enlaza con
los otros aminoácidos para formar una cadena de aminoácidos. Cuando todos los
aminoácidos codificados en una porción de ARNm se han unido, la proteína
completa se desprende del ribosoma.
2. Como afecta a las formas de vida los cambios en la secuencia de bases del ADN.
Rta/ Cualquier cambio en la secuencia del ADN, puede alterar el código genético y,
por tanto, puede que altere la síntesis de la proteína para la que codifica.
Esta adaptación es común a todos los seres vivos en presencia de un medio
cambiante. La capacidad de autorreplicación del ADN les permite así repararse y/o
mutar pudiendo modificar los genes necesarios para dar lugar a especies
progresivamente más adaptadas, desapareciendo las que no se adaptan.

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FACULTAD DE CIENCIAS - ESCUELA DE BIOLOGIA

GUIA Nº 5. EXTRACCION DE ADN POR METODOS SENCILLOS Y CASEROS

Docente: ELSA HELENA MANJARRES HERNANDEZ

El ADN Acido desoxirribonucleico, es el polímero Biológico encargado de transmitir

Siendo el ADN la molécula más importante de las células vivas su aislamiento

La extracción del ADN, se basa principalmente en la mezcla de métodos, en donde

 Probar métodos sencillos de extracción de ADN de muestras vegetales.

PREGUNTA A RESOLVER: ¿Cuáles son las propiedades físicas y químicas del

3. Vierta el licuado en un frasco de boca ancha y agregue otras dos cucharadas

5. Vierta la mezcla en un recipiente en el que se pueda calentar y caliéntala por

6. Inmediatamente ponga la mezcla en hielo (o llévela al congelador) por 5

8. Lo que queda en la tela (grueso) deséchelo, lo que recoge se llama filtrado, y

9. Agregue una solución de ablandador de carne (o jugo de papaya o de piña -

En el límite del filtrado y el alcohol comenzará a aparecer el ADN. Ascendiendo

Nombre: Esteban Nicolás Peña Coronado

1. Presente una página de evidencias fotográficas del proceso.

Ruptura celular Los métodos físicos más utilizados son el choque

Eliminación de proteínas El catabolismo proteico es el proceso por el cual

Desintegración de La lisis celular es el proceso de ruptura de

Purificación del ADN La purificación de DNA es un paso clave en la

4. En la siguiente tabla usted encuentra un listado de reactivos utilizados en los

Sustancia usada Tipo-de Forma en que actúa en el proceso.

Detergente benceno sulfato Cuando el detergente se pone en contacto

NaCl compuesto iónico Tiene un catión que se une a la molécula de

Alcohol frio Etanol El alcohol ayuda a separar las proteínas a

Solución salina ( cloruro de sodio al El agua salada ayuda a la precipitación en

Hielo H2O Ayuda a mantener el DNA intacto durante el

5. ¿Porque el ADN fluye hacia la capa de alcoholes?

Rta/La sal y el detergente rompen la pared y membranas celular y nuclear, y el

Rta/ La extracción de ARN es una modificación de la extracción de ADN. La

BIBLIOGRAFIA (incluya la utilizada para resolver su informe)

Rta/ El ADN tiene la información almacenada en las secuencias de bases. Las

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