UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA

CARRERA CIRUJANO DENTISTA

MECANISMOS INFECCIOSOS Y RESPUESTA INMUNE DEL

SISTEMA ESTOMATOGNÁTICO

PRÁCTICA No. 2:

IDENTIFICACIÓN DE STAPHYLOCOCCUS

ALUMNO:

LUQUE GONZALEZ JUAN CARLOS

PROFESOR DEL MODULO:

C.D. ALEXIS GUADARRAMA FLORES

GRUPO: 3354

CICLO ESCOLAR: 2021-2022

OBJETIVO
El alumno diferenciará cepas patógenas y no patógenas de estafilococos
mediante características específicas observadas en los medios de cultivo
y pruebas bioquímicas.

MARCO TEORICO
Ω Morfología de Staphylococcus.
o Los Staphylococcus son bacterias con forma esféricas, que
miden entre 0,5 a 1,5 mm de diámetro. Se pueden observar
separadas, en pares, tétradas o en cadenas cortas, que se
dividen en uno o mas planos, formando grupos en forma de
racimos de uva, de donde proviene su nombre
(staphyle=racimo de uvas, kokkos=coco, grano o baya).
o Formado por bacterias grampositivas, caracterizadas por
tener una pared celular que contiene peptidoglicanos
compuestos de L-lisina y ácido teicoico. Se tratan de células
sin movilidad, generalmente encapsuladas o presentan una
formación limitada de cápsulas y no producen esporas.
o Están comúnmente asociadas a la piel, glándulas de la piel y
membranas mucosas de seres humanos y otros animales
homeotermos. Estos organismos también han sido aislados de
una variedad de productos animales (como carne, aves y
lácteos) y fuentes ambientales (como objetos, suelo, arena,
polvo, aire, agua de mar, agua dulce).
o Metabolismo Las bacterias Stafilococcus son anaerobias
facultativas, pero tienen un crecimiento más rápido y
abundante en condiciones aeróbicas, con la excepción
de Staphylococcus
aureus subspecie anaerobio y Stafilococcus saccharolyticus.
o Taxonomía y filogenia pertenece a la clase Bacilli del
filo Firmicutes. Es un género monofilético y está bien
diferenciado de otros géneros relacionados.
Ω Factores de patogenicidad producidos por Staphylococcus
aureus.
o Además, la enterotoxina estafilocócica está involucrada en la
intoxicación alimentaria. Las cepas de S. aureus resistentes a
la meticilina constituyen un importante problema clínico y
epidemiológico en los hospitales.
o El S. aureus también es capaz de producir infecciones en una
variedad de otros mamíferos y aves. Las infecciones
naturales más comunes incluyen mastitis, sinovitis, artritis,
endometritis, furúnculos, dermatitis supurativa y septicemia.

Ω Patologías en que está involucrado este microorganismo.

o S. aureus puede causar una variedad de infecciones en
humanos que incluye forúnculos, impétigo, necrólisis
epidérmica tóxica, neumonía, osteomielitis, endocarditis
aguda, miocarditis, pericarditis, enterocolitis, mastitis,
cistitis, prostatitis, cervicitis, cerebritis, meningitis,
 bacteriemia, síndrome de shock tóxico y abscesos en
músculo, piel, tracto urogenital, sistema nervioso central y
diversos órganos intraabdominales.

FUNDAMENTO TEÓRICO
En la gran mayoría de las infecciones supurativas de cavidad oral se
encuentra involucrado el género Staphylococcus. Casi todas las personas
tendrán algún tipo de infección por Staphylococcus aureus durante su
vida, cuya intensidad va desde
envenenamiento por alimentos o infecciones cutáneas menores a
infecciones graves que ponen en peligro la vida.
Los estafilococos son cocos Gram positivos que se pueden encontrar
aislados, en pares y se dividen en más de un plano formando racimos
irregulares, por lo general son acapsulados, aunque se han descrito
formas capsuladas. Son inmóviles, figuran entre los microorganismos no
esporulados más resistentes.
Los estafilococos se encuentran frecuentemente en la cavidad bucal.
Aunque no en gran cantidad las dos especies de particular interés son
Staphylococcus aureus y
Staphylococcus epidermidis. Ambos son aerobios y anaerobios
facultativos relativamente resistentes al calor y hasta cierto grado a
desinfectantes. El Staphylococcus aureus es coagulasa, catalasa y
manitol positivos y transforman los teluritos en teluros. Crecen en
presencia de cloruro de sodio al 10%, son halófilicos. Se considera que
los estafilococos son causa de ciertas infecciones de la cavidad bucal y
de las piezas dentales y compiten con los estreptococos como el agente
más frecuente de las infecciones bacterianas de la cavidad bucal. Los
conductos radiculares infectados y abscesos dentales, frecuentemente
muestran al cultivo la presencia de Staphylococcus aureus.
Staphylococcus aureus causa una gran variedad de enfermedades en el
humano, los tres grupos más importantes son: las infecciones de la piel,
de los órganos y de los tejidos profundos y las toxinosis, la toxinosis es
la formación de toxinas que corresponde al microorganismo Entre las
primeras destacan por su frecuencia la foliculitis, la celulitis, el
impétigo; en el segundo grupo se incluyen enfermedades de mayor
gravedad como las bacteremias, endocarditis, meningitis, osteomielitis,
neumonías, mastitis, abscesos diversos, las infecciones de heridas
postquirúrgicas, artritis séptica, enterocolitis y las infecciones
genitourinarias, adquiridas tanto en ambiente comunitario como
intrahospitalario. En el grupo de intoxicaciones están: la intoxicación
alimentaria, necrosis epidérmica tóxica, síndrome de piel escaldada y el
síndrome de choque tóxico. Se han encontrado en infecciones
endodónticas y en algunos abscesos periapicales. Otra de sus
características es que presentan resistencia a los antibióticos eficaces
para bacterias Gram positivas, incluyendo penicilina y los de amplio
espectro. Pueden producir enfermedad tanto por su capacidad para
multiplicarse y extenderse con amplitud por los tejidos como por su
producción de substancias extracelulares. Algunas de estas sustancias
son enzimas, otras se consideran toxinas, aunque pueden funcionar como
las anteriores.

PRODUCCIÓN DE ENZIMAS:
A) Coagulasa
Staphylococcus aureus produce esta enzima, puede incidir en un
mecanismo alternativo, ya sea como una enzima o un activador de
un compuesto plasmático para convertir el fibrinógeno en fibrina,
lo cual sugiere que la coagulasa es una sustancia similar a la
protrombina.
B) Catalasa
Los Staphylococcus producen catalasa que convierte al peróxido
de hidrógeno en agua y oxígeno. La prueba de la catalasa
 diferencia a lo estafilococos que son positivos, de los
estreptococos, que son negativos.
C) Fosfatasa
Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis producen
esta enzima que rompe la fenolftaleína difosfato produciendo un
cambio de color debido a la fenolftaleína liberada que reacciona
con un álcali para dar un color rosa brillante.
D) Beta -Lactamasas
Staphylococcus aureus produce estas enzimas que hidrolizan al
anillo beta lactámico de la penicilina (penicilinasas) o
cefalosporina (cefalosporinasa) aunque son parcialmente activas
contra ambos grupos.

E) DNAsas
Staphylococcus aureus y Staphylococcus epidermidis las producen,
la actividad de la desoxirribonucleasa se correlaciona bien con la
actividad de coagulasa. Se producen zonas claras alrededor de las
cepas y se coloca azul de toluidina 0.1% se produce un color rosa
alrededor del crecimiento de las cepas.
F) Hemolisinas
Staphylococcus aureus produce hemolisinas alfa, beta, gama y
delta, siendo la hemolisina beta de mayor importancia por su
patogenicidad. La hemolisina beta es una fosfolipasa que presenta
propiedades hemolíticas sobre los eritrocitos, produciendo
hemólisis beta la cual se observa por un halo transparente
alrededor de la colonia.
G) Toxina exfoliativa
Esta toxina de Staphylococcus aureus está constituida por lo menos
por dos proteínas que producen la descamación generalizada del
síndrome estafilocócico de piel escaldada. Hay anticuerpos
específicos que protegen al sujeto contra la acción exfoliativa de la
toxina.
H) Hialuronidasa o factor de difusión:
 Degrada el ácido hialurónico de la matriz del tejido conjuntivo
facilitando la diseminación de la infección.

Staphylococcus en agar sangre produce beta hemolisis alrededor de la

colonia. Staphylococcus epidermidis en agar sangre no produce
hemolisis.

En agar Vogel Johnson, el crecimiento de los gérmenes es inhibido casi

totalmente por el telurito. El manitol sirve como sustancia reaccionante
para la diferenciación, pues es degradada a ácido por la mayoría de los
Staphylococcus patógenos. Los Staphylococcus patógenos reducen
además el telurito de potasio a teluro metálico y en consecuencia
producen colonias de color negro.

La formación de ácido se comprueba por el viraje a amarillo que sufre el

manitol con rojo de fenol.

MATERIAL Y REACTIVOS

CEPAS:
Staphylococcus aureus
Staphylococcus epidermidis
MEDIOS:
1 caja agar sal y manitol
1 caja agar S-110
1 caja agar sangre de carnero
1 caja Vogel Johnson
TUBOS:
2 Caldo: Glucosa con rojo fenol
2 Caldo: Manitol con rojo fenol
2 Plasma citratado
- Hisopo
- Portaobjetos
 - Mechero
- Incubadora
REACTIVOS:
Peróxido de Hidrógeno
SERVICIOS:
Agua, luz, gas.

PROCEDIMIENTO
A)FERMENTACIÓN DE MANITOL
Sembrar una caja de agar sal y manitol la mitad con Staphylococcus
aureus y la otra mitad con Staphylococcus epidermidis por estría
cruzada. Incubar a 37°C de 24 a 48 horas.
B) PRODUCCIÓN DE HEMOLISINAS
Sembrar en agar sangre la mitad con Staphylococcus aureus y la otra
mitad con Staphylococcus epidermidis por estría cruzada. Incubar a
37°C de 24 a 48 horas.

C)PRODUCCIÓN DE COAGULASA
En un tubo con plasma citratado, inocular una asada por suspensión
de una cepa de Staphylococcus aureus y en otro tubo con
Staphylococcus epidermidis. Incubar durante 1 a 3 horas a 37° C.
D)PRODUCCIÓN DE CATALASA
Tornar una asada de la cepa de Staphylococcus aureus y suspender
sobre un portaobjeto, adicionarle 1 o 2 gotas de peróxido de
hidrógeno. Realizar lo mismo con Staphylococcus epidermidis.
E) MEDIOS DE CULTIVO DIFERENCIAL Y SELECTIVO
Agar: Vogel Johnson
Sembrar una caja con agar Vogel Jonhson la mitad con
Staphylococcus aureus y la otra mitad con Staphylococcus
epidermidis por estría cruzada. Incubar a 37°C de 24 a 48 horas
Agar: S-110
 Sembrar una caja con agar S-110 la mitad con Staphylococcus
aureus y la otra mitad con Staphylococcus epidermidis por estría
cruzada. Incubar a 37°C de 24 a 48 horas.
F) PRUEBAS BIOQUÍMICAS
-En un tubo de glucosa con rojo de fenol inocular una asada por
agitación de una cepa de Staphylococcus aureus y en otro tubo con
Staphylococcus epidermidis.
-En un tubo de manitol con rojo de fenol inocular una asada por
agitación de una cepa de Staphylococcus aureus y en otro tubo con
Staphylococcus epidermidis

RESULTADOS
 En la caja de agar sal y manitol observar cambio de coloración
del medio por efecto de la fermentación del manitol.
 £ Staphyloco
ccus
Aureus
Se

observa el cambio de coloración del medio

por efecto de la fermentación
£ Staphylococcus Epidermidis
No se observa cambio de coloración porque
no fermenta manitol

 Caja agar Vogel Johnson Staphylococcus aureus producen

colonias pequeñas negras, con halo amarillo Staphylococcus
epidermidis colonias pequeñas, negro-
grisáceas, sin halo.
£ Staphylococcus Aureus
Producen colonias
pequeñas grandes negras,
con halo amarillo

£ Staphylococcus Epidermidis
Sus colonias son
pequeñas, negro-
grisáceas, sin halo
 Caja de agar S 110 Staphylococcus aureus; Las colonias son
lisas, redondas de bordes enteros, cremosas de color blanco
porcelana o amarillo. Staphylococcus epidermidis; las colonias
son lisas, de forma circular con bordes enteros ligeramente
irregulares de color blanco.
£ Staphylococcus Aureus
Las colonias son lisas, redondas de bordes
enteros, cremosas de color blanco porcelana
o amarilla
£ Staphylococcus Epidermidis
Las colonias son lisas, de forma circular con
bordes enteros ligeramente irregulares de
color blanco

 Caja de agar sangre; Observar los tipos de Hemolisis.

£ Staphylococcus Aureus
Hemolisis (+)
£ Staphylococcus Epidermidis
Hemolisis (-)

 En la prueba de coagulasa; observar la formación del coagulo.

£ Staphylococcus Aureus
(+)
Presenta formación de coágulo
£ Staphylococcus
Epidermis (-)
No presentan formación de coágulo
  En la prueba de catalasa; esperar ver la formación inmediata
de burbujas y reportar la prueba como (+), si no hay burbujeo
se reporta (-).

£ Staphylococcus Aureus
(+)
Presenta burbujeo
£ Staphylococcus
Epidermis (-)
No presenta burbujeo

 En las Pruebas Bioquímicas reportar cambio de coloración de

rojo a amarillo como (+).
£ Staphylococcus Aureus (+)
Fermenta glucosa
Fermenta manitol
£ Staphylococcus Epidermis (-)
No fermenta glucosa
No fermenta manitol

CUESTIONARIO
1.- Mencione la etiopatogenia de la celulitis y de la osteomielitis
Celulitis:
Es un proceso inflamatorio séptico cuya etiopatogenia
fundamental se encuentra en un absceso dentoalveolar mal
tratado, pericoronaritis u otros, por lo que supera la capacidad
de defensa del organismo. Se manifiesta de formas muy
diferentes, con una escala variable del cuadro clínico que va
 desde los procesos inocuos poco delimitados, hasta los
progresivos y difusos que pueden desarrollar complicaciones
que lleven al paciente a un estado crítico con peligro incluso
para la vida.  La etiopatología no está identificada, sin
embargo algunos autores ven su origen en la
hiperpolimeración de los mucopolisacáridos del tejido
conjuntivo de la dermis e hipodermis.
Osteomielitis:
Es la inflamación del hueso causada por una infección
bacteriana o fúngica, y en menor frecuencia por parásitos y
microbacterias.1Puede tener diversas fuentes para la
infección. Hay multiplicidad de clasificaciones. El
diagnostico requiere siempre sospecha y la toma de diversos
exámenes paraclínicos que nos permiten saber si estamos
enfrentándonos a una osteomielitis.
El Staphyloccocus Aureus es el principal patógeno en todas
las edades y ocasiona el 90% de las osteomielitis. Se da
principalmente por fuente hematógena o por focos contiguos.
Esta disminuye los mecanismos de defensa del huésped. Se
adhiere principalmente a la matriz ósea y puede sobrevivir en
osteoblastos.
2- Mencione la importancia que tiene la contaminación de alimentos por
Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus produce 5 toxinas, que pueden provocar
severas intoxicaciones en el hombre.
Los alimentos contaminados con esta cantidad de bacterias, no
presentan ninguna diferencia perceptible en cuanto a su apariencia,
sabor y olor, por lo que no se distinguen de los alimentos que no
están contaminados con este microorganismo, por esta razón el
peligro de ingerir alimentos contaminados con Staphylococcus
aureus sin darse cuenta es alto. Los alimentos sometidos a intensa
manipulación durante su preparación y que se mantienen a
temperaturas de riesgo (por encima de 7.2° C y por debajo de 60°
C) después de su preparación, son los alimentos más involucrados
en la intoxicación estafilocóccica.
3.- Explique cómo actúa la coagulasa producida por Staphylococcus
aureus y su importancia en la patogenia.
Esta tiene la capacidad de transformar el fibrinógeno en fibrina,
creando un coágulo evidente cuando se halla en el plasma, es decir,
esta enzima simula la actividad de la trombina de la cascada de la
coagulación.
De hecho, una de las teorías más aceptadas es que la coagulasa
unida reacciona con la coagulasa libre para activar a los factores de
la coagulación. Esta activación genera una sustancia que actúa de
forma similar a como lo hace la protrombina, creando un
compuesto con la función de la trombina.
La diferencia con la cascada de la coagulación normal radica en
que esta reacción no necesita la presencia de calcio y no es
afectada por la heparina.
4.- Mencione los factores de patogenicidad que produce el
Staphylococcus aureus en el abceso periapical
Los factores de la virulencia de estafilococo áureo incluyen los
antígenos, las enzimas y las toxinas como:
 Antígenos:
 Cápsula Adhesinas
 Enzimas:
 Coagulasis, Lipasa, Hialuronidasa, Estafiloquinasa, Nucleasa
 Toxinas:
 α - toxina
 β - toxina
 Δ-Toxina
 Picovoltio Leucocidina
 Enterotoxina
 Toxina exfoliativa
 Toxina tóxica del síndrome de la descarga eléctrica
5.-Describa la conducta a seguir en un paciente que presente un absceso
periapical
Después de un examen clínico minucioso, se estudian los síntomas y se
realiza un diagnóstico diferencial, para eliminar diagnósticos falsos. Las
observaciones adicionales, las radiografías y las pruebas clínicas
orientarán las probabilidades a un sólo diagnóstico. La familiarización
con todos los aspectos del absceso periodontal capacita al odontólogo a
realizar un diagnóstico más rápido. Debe notarse que en la mayor parte
de las clínicas odontológicas que tratan a una gran cantidad de pacientes,
el 85 % del dolor dental es de origen pulpar, y alrededor de un 15% es
debido a abscesos periodontales. Sin embargo, este porcentaje variará
marcadamente de acuerdo a la naturaleza de la población atendida

A veces se puede sobreañadir a este proceso periodontal un proceso

pulpar, y en éste, la sintomatología se superpone, con lo cual es difícil
diagnosticar si el proceso es pulpar o periodontal propiamente dicho, o a
veces, lo que es muy frecuente, de tipo mixto pulpo-periodontal. 

Los abscesos periodontales requieren tratamiento de urgencia, en el cual

se debe drenar el contenido purulento para liberar la presión que éste
ejerce sobre los tejidos adyacentes. Por ello, la penetración con una
sonda periodontal para intentar volver a recanalizar el orificio de salida
del saco periodontal, es una de las técnicas a seguir.

Al establecer el drenaje, de este modo se alivia el dolor, la inflamación

disminuye y el diente que está móvil vuelve a mantenerse en su posición
original. Otra técnica para facilitar el drenaje es la incisión del absceso.
A veces es necesario, para abrir más extensamente el orificio de salida,
introducir una cureta ultrafina periodontal plana, con lo cual se realiza
un desbridamiento radicular. Algunos clínicos sitúan un fragmento de
goma dique para mantener abierta la incisión y facilitar el drenaje
consiguiente.

Al tratamiento de tipo quirúrgico se le puede añadir un tratamiento

farmacológico a base de antimicrobianos. Algunos odontólogos
excluyen del tratamiento los antimicrobianos sistémicos, a menos que se
presente una manifestación clara de afectación general. Otros, sí lo
recomiendan como complemento al drenaje. Así pues, el tratamiento
sería una combinación de incisión, drenaje, desbridamiento y
antimicrobianos. (76) La penicilina es el antimicrobiano de elección.
Para Báscones (20), el protocolo clínico incluye la amoxicilina (875 mg)
clavulánico (125 mg) a dosis de 875/125 mg 3 veces al día, durante una
semana. Se han visto mayores posibilidades de regeneración tisular en
los pacientes que siguen un tratamiento apropiado. (77,78) Cuando la
fase aguda ha finalizado, es necesario proceder al tratamiento de base.
En casos muy rebeldes es posible asociar a la amoxicilina clavulánico y
el metronidazol en dosis de 1 gr. diario, aunque este protocolo es
necesario reservarlo para casos muy especiales y no utilizarlo en forma
sistemática

La azitromicina puede ser una buena alternativa a la amoxicilina

clavulánico, en especial por su única dosis diaria durante 3 días, lo que
hace más fácil el cumplimiento por parte del paciente frente a las tres
dosis durante una semana del antimicrobiano.

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%80%80Morfolog%C3%ADa%EE%80%81%20Los%20%EE
%80%80Staphylococcus%EE%80%81%20son%20bacterias
%20con%20forma%20esf%C3%A9ricas%2C,%3Dracimo%20de
%20uvas%2C%20kokkos%20%3Dcoco%2C%20grano%20o
%20baya%29.