Bacilos y cocos gramnegativos anaerobios

Bacilos y cocos gramnegativos

anaerobios

Alicia Ma. Martínez Izquierdo

Olga A. Ginebra González

INTRODUCCIÓN
Las bacterias anaerobias cobran importancia médica por las infecciones que causan, a
menudo estas son polimicrobianas, es decir, la bacteria anaerobia se encuentra en infeccio-
nes mixtas con otros anaerobios, anaerobios facultativos y aerobios. Estas se hallan en el
cuerpo humano formando parte de la flora normal y causan infección cuando llegan a zonas
estériles del cuerpo o cuando existen factores predisponentes que alteran el potencial de
óxido-reducción en los tejidos.
En este capítulo se estudiarán las infecciones por bacilos y cocos gramnegativos, pues
los clostridios, espiroquetas anareobias y Campylobacter sp. anaerobios se explican en
otros capítulos.

BACILOS GRAMNEGATIVOS ANAEROBIOS

Los bacilos gramnegativos anaerobios son parte de la flora normal de la boca, tracto
respiratorio superior, tracto intestinal y urogenital de los humanos y de los animales inferio-
res. Sus miembros incluyen los siguientes géneros: Anaerovibrio, Bacteroides, Biophila,
Butyrivibrio, Centipeda, Desulfomonas, Desulfovibrio, Fibrobacter, Fusobacterium,
Leptotrichia, Megamonas, Mitsuokella, Porphyromonas, Prevotella, Rikenella,
Ruminobacter, Sebaldella, Selenomonas, Succinimonas, Succinivibrio, Tissierella y
Wolinella.
De los géneros anteriores, sólo cuatro necesitan ser considerados por su importancia en
especímenes clínicos, ellos son: Bacteroides, Fusobacterium, Prevotella y Porphyromonas.
Los géneros anteriores son identificados presuntivamente basándose en la morfología
celular y colonial, producción de pigmentos, fluorescencia bajo luz ultravioleta, susceptibi-
lidad a los discos de antibióticos (vancomicina, colistina y kanamicina) y características
bioquímicas; mientras que el diagnóstico confirmativo se realiza mediante cromatografía en
gas-líquido.

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Microbiología y Parasitología Médicas

BACTEROIDES
La taxonomía de los bacilos gramnegativos anaerobios ha tenido grandes cambios en
los últimos años, tendencia que continuará. El nuevo género Bacteroides incluye miembros
del grupo B. fragilis, B. splanchnicus y al grupo B. ureolyticus.
Este género se incluye en la familia Bacteroidaceae. El grupo B. fragilis comprende las
siguientes especies: B. distasonis, B. caccae, B. eggerthii, B. fragilis, B. merdae, B. vulgatus,
B. ovatus, B. stercoris, B. thetaiotaomicron, B. uniformis; mientras en el grupo B. ureolyticus
con taxonomía incierta se incluyen como especies: B. ureolyticus y B. gracilis.
Las especies de Bacteroides sensibles a la bilis y moderadamente sacarolíticas han sido
reclasificadas en el nuevo género Prevotella, y especies de Bacteroides asacarolíticas son
ahora miembros del género Porphyromonas.
Otras especies de Bacteroides han sido reclasificadas en nuevos géneros, y con la
excepción de Tissierella praecuta (antes B. praecutus), no son de importancia clínica.
El grupo B. ureolyticus ha sufrido múltiples cambios en los últimos años; estudios
recientes por Han y colaboradores reportan que B. ureolyticus y B. gracilis, miembros de
dicho grupo, así como Wolinella recta y Wolinella curva son similares a los verdaderos
Campylobacter. Debido a la taxonomía incierta del grupo B. ureolyticus, se sigue conside-
rando como una especie de Bacteroides.
Las especies de Bacteroides son el grupo más importante de anaerobios que causan
infecciones humanas; son habitantes normales del intestino y otros sitios del cuerpo. Las
heces normales contienen 1011 microorganismos de B. fragilis por gramo. B. fragilis es la
especie más importante de todas las bacterias anaerobias, no sólo por su frecuencia en
infecciones clínicas, sino por su resistencia creciente a los agentes antimicrobianos.

MORFOLOGÍA E IDENTIFICACIÓN
Microorganismos típicos. Son bacilos gramnegativos irregularmente teñidos, delga-
dos, pleomórficos; pueden observarse formas cocobacilares; son anaerobios obligados, no
esporulados, inmóviles o móviles mediante flagelos perítricos.
Cultivo. Crecen en anaerobiosis, a temperatura de 35 a 37 °C y a pH 7; crecen en medios
con bilis al 20 % y en agar-sangre con kanamicina (1 mg/mL), vancomicina (5 g/mL) o
colistina (10 g/mL); crecen bien en Brucella base agar con sangre de carnero suplementado
con hemina y vitamina K1 incubados durante 2 ó 3 días.

ESTRUCTURA ANTIGÉNICA Y ENZIMAS

EXTRACELULARES
Los bacteroides tienen una composición lipídica inusual, alrededor de la mitad de sus
lípidos extraíbles son esfingolípidos y ceramidas. El LPS carece de ácido 3-keto-2-desoxioctónico
y de la heptosa que normalmente se encuentra en el LPS de otras bacterias, y es mucho
menos tóxico.
A diferencia de otras especies de Bacteroides, B. fragilis posee cápsula polisacarídica,
compuesta por L-fucosa, D-galactosa, DL-quinovasamina y D-glucosamina. La misma es un
importante factor de virulencia.
Los bacteroides producen neuroamidasa, hialuronidasa, desoxirribonucleasa, fibrinolisina
y fosfatasa. B. fragilis sintetiza una heparinasa que puede contribuir a la coagulación
intravascular.

PATOGENIA
La infección por anaerobios se produce cuando existe un defecto en las defensas del
hospedero, a causa de una infección previa por destrucción hística o por una restricción del
aporte sanguíneo que conduce a una reducción total en el potencial de óxido-reducción,

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 Bacilos y cocos gramnegativos anaerobios

junto a la inoculación oportunista de la flora normal cercana. Los factores anteriores, unido
a la tolerancia de Bacteroides al oxígeno durante grandes períodos y la presencia de factores
de virulencia como la cápsula polisacarídica con actividad antifagocítica y anticomplementaria,
favorecen el establecimiento y multiplicación de estos microorganismos en los tejidos.
En la infección humana, la fuente de la mayoría de las bacterias anaerobias es la propia
flora normal del paciente, que se disemina después de traspasar la barrera mucocutánea de
su hábitat normal en la orofaringe, el tracto gastrointestinal o la región genital; es por ello que
las infecciones por anaerobios son polimicrobianas y de origen endógeno.
Los bacilos gramnegativos anaerobios residentes en las vías aéreas pueden invadir
estructuras normales estériles y ocasionar infecciones profundas de cabeza y cuello. El 85 %
de los abscesos cerebrales albergan anaerobios, que provienen de una infección previa de
los senos paranasales y el oído medio. Un 90 % se asocia a neumonía por aspiración y
absceso del pulmón.
Las sepsis intraabdominales que ocasionan, tales como peritonitis y abscesos, están
precedidas por una perforación intestinal, encontrándose B. fragilis en un 80 %.
Estos organismos causan infección de la piel y del tejido celular subcutáneo seguido de
traumatismo, cirugía o isquemia. B. fragilis infecta de forma sistemática las úlceras de decú-
bito y las úlceras de los pies de los diabéticos.

DATOS CLÍNICOS
Los signos y síntomas que sugieren posible infección por anaerobios son:

1. Exudado fétido debido a productos de ácidos grasos de cadenas cortas del metabolismo
anaerobio.
2. Infección en las proximidades de una superficie mucosa.
3. Gas en los tejidos por producción de CO2 e H2.
4. Necrosis hística severa con formación de abscesos y gangrena.

Los bacteroides producen lesiones abscedadas a nivel del Sistema Nervioso Central
(SNC), pulmón, cabeza, cuello, abdomen, genitales femeninos, piel y tejido celular subcutá-
neo.
SNC: abscesos cerebrales y empiema subdural.
Pulmón: neumonía por aspiración, neumonía necrosante y abscesos del pulmón.
Cabeza y cuello: sinusitis crónica, otitis media crónica y abscesos periodontales.
Abdomen: abscesos hepáticos, peritonitis y colagenitis.
Genitales femeninos: abscesos tuboováricos, absceso vulvovaginal, salpingitis,
pelviperitonitis, aborto séptico y endometritis.
Piel y tejido celular subcutáneo: infectan úlceras de decúbito y de los pies de los diabé-
ticos.

PRUEBAS DIAGNÓSTICAS DE LABORATORIO

Muestras. La toma de muestra para cultivo de anaerobios debe tener en cuenta el efecto
letal del oxígeno atmosférico, por lo que a este fin se han ideado contenedores especiales de
transporte con atmósfera prerreducida. Las muestras para cultivo deben ser el pus de absce-
so y lesiones, la sangre y tejidos.
Frotis. Los frotis con tinción de Gram muestran bacilos gramnegativos delgados con
extremos redondeados, pleomórficos y formas cocoides, teñidos de forma irregular. Tenien-
do en cuenta que los organismos anaerobios infectantes tienen su origen en la flora normal
de las superficies mucocutáneas, es imposible distinguir al patógeno del comensal mediante
tinción de Gram. Puede emplearse inmunofluorescencia directa a la muestra para la detección
rápida de los miembros del grupo B. fragilis.
Cultivo. Los cultivos deben incubarse de 35 a 37 0C, a pH 7, y bajo condiciones de
anaerobiosis de 2 a 5 días. Los medios a emplear pueden ser: no selectivos y selectivos.

241
Microbiología y Parasitología Médicas

Medios no selectivos: agar-sangre para anaerobios, agar Brucella, infusión cerebro-cora-

zón suplementada con extracto de levadura, agar Columbia, agar Schaedler y agar-soya
tripticasa; todos los medios suplementados con vitamina K1 y hemina.
Medios selectivos: agar-sangre CDC para anaerobios, agar-sangre con vancomicina y
kanamicina, bacteroides bilis esculina agar (BBE), tioglicolato con vitamina K1 (0,1 g/mL) y
hemina (5 g/mL), agar-sangre feniletil alcohol.
Las muestras transportadas en medios adecuados para anaerobiosis deben ser inocula-
das de forma duplicada en los medios seleccionados e incubadas tanto en anaerobiosis
como en aerobiosis. Las muestras sembradas en anaerobiosis no deben ser examinadas
antes de las 48 horas.
Las colonias son de 2 a 3 mm de diámetro, circulares, de bordes enteros, convexas, lisas,
translúcidas a opacas de forma general; la mayoría de las especies del grupo B. fragilis se
observan ennegrecidas en agar BBE por la hidrólisis de la esculina, excepto B. vulgatus. El
grado de hemólisis varía con la especie:

B. fragilis: algunas cepas son ß-hemolíticas.

B. distasonis: algunas cepas son α-hemolíticas.
B. ovatus, B. thetaiotaomicron, B. vulgatus: son no hemolíticas.

Pruebas fisiológicas. Las especies que integran el género Bacteroides fermentan la

glucosa, sacarosa y maltosa; son resistentes a la bilis al 20 %; son indol negativo en su
mayoría. Las especies del grupo B. ureolyticus son resistentes a la vancomicina y suscepti-
bles a la kanamicina y colistina, mientras que el grupo B. fragilis es resistente a los tres
antibióticos señalados.
Mediante cromatografía en gas-líquido se obtienen los productos finales del metabolis-
mo de la glucosa tales como: el ácido propiónico, ácido succínico y ácido acético.

Sistemas comerciales de identificación bioquímica

1. Minitek System (Becton Dickinson Microbiology Systems).
2. API 20-A (BioMérieux-Vitek).
3. An-Ident System (BioMérieux-Vitex).
4. RapID-ANA II System.
5. MicroScan.
6. Vitek ANI Card.
7. ATB 32-A System.

TRATAMIENTO
El tratamiento de las infecciones por anaerobios requiere el drenaje quirúrgico y el uso
de antibióticos adecuados.
Los bacteroides son resistentes a tetraciclina, penicilina y cefalosporinas; las drogas de
elección son clindamicina y metronidazol, aunque se han reportado algunas cepas resistentes.
Los medicamentos alternativos son: cefoxitina, cefotétano, mezlocilina, piperacilina y moxalactam.

FUSOBACTERIUM
El género se incluye en la familia Bacteroidaceae y comprende las siguientes especies:
F. necrophorum, F. nucleatum, F. mortiferum, F. naviforme, F. pseudonecrophorum, F. russii,
F. ulcerans, F. varium, F. gonidiaformans. De ellos, F. necrophorum y F. nucleatum son los
más frecuentemente recobrados en infecciones clínicas humanas.
Los miembros de este género son parte de la flora normal de la cavidad oral, tracto
gastrointestinal y genital.
En la placa dental pueden representar hasta el 4 % de todos los anaerobios aislados. Son
componentes menores de la flora del colon y, en ocasiones, son una parte importante de la
flora vaginal.

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 Bacilos y cocos gramnegativos anaerobios

MORFOLOGÍA E IDENTIFICACIÓN
Microorganismos típicos. Son bacilos gramnegativos pleomórficos, que se tiñen de
forma irregular; pueden encontrarse formas cocoides y filamentosas. Son anaerobios obliga-
dos, no esporulados; algunas cepas son móviles por la presencia de flagelos perítricos,
aunque la mayoría son inmóviles y no capsulados.
Cultivo. Crecen en anaerobiosis a 35 y 36 0C, a pH 7, en medio de agar-sangre con
vancomicina (5 g/mL). Son catalasa negativa; no reducen NO3 a NO2; no producen ureasas.
Pared celular. Poseen LPS, con algunos de los componentes típicos presentes en las
bacterias entéricas. No tienen cápsula.

DATOS CLÍNICOS
Los microorganismos del género Fusobacterium producen infecciones polimicrobianas
de origen endógeno que aparecen cuando en el hospedero existen factores predisponentes
como: traumas, instrumentación, manipulación, infecciones orales, disminución del poten-
cial de O2 y necrosis del tejido.
Las fusobacterias pueden originar amigdalitis crónica; estos microorganismos, conjun-
tamente con Porphyromonas asaccharolytica y cocos grampositivos anaerobios, pueden
ocasionar la angina de Vincent’s y faringitis, cuadro que se caracteriza por la presencia de
membranas grisáceas que producen aliento con olor fétido.
Fusobacterium necrophorum puede conducir a la enfermedad de Lemierre’s o septice-
mia posanginal, caracterizada por sepsis y extensión metastásica de la infección a la mayoría
de los órganos. La enfermedad de Lemierre’s era muy frecuente antes de la era de los
antibióticos; en la actualidad es poco común.
Fusobacterium nucleatum está asociado a infecciones pleuropulmonares como la neu-
monía aspirativa, el absceso del pulmón y el empiema. Este microorganismo, conjuntamente
con Bacteroides ureolyticus, son los agentes anaerobios más frecuentes en mujeres con
infección del líquido amniótico y membranas intactas.
Las fusobacterias asociadas a espiroquetas anaerobias producen una gingivitis ulcerativa
necrosante aguda (GUNA), un tipo de gingivitis poco común que se observa en adultos
jóvenes sometidos al estrés. Las especies de Fusobacterium pueden causar sinusitis aguda
precedida de una infección dental, así como sinusitis crónica. La infección a nivel de piel y
tejidos blandos se desarrolla cuando el tejido está traumatizado o desvitalizado por heridas
traumáticas, o por isquemia de las extremidades asociadas con arterioesclerosis o diabetes
mellitus.
Las fusobacterias pueden ocasionar infecciones polimicrobianas intraabdominales ta-
les como abscesos de hígado y bazo. Estos microorganismos a veces producen abscesos
cerebrales y meningitis; en estudios recientes se ha reportado un incremento de su inciden-
cia en endocarditis.
En ocasiones, las especies de Fusobacterium pueden causar infecciones como
osteomielitis; se han hallado en cultivos puros y de forma unimicrobiana.

PRUEBAS DIAGNÓSTICAS DE LABORATORIO

Muestras. Pus de heridas, lesiones y abscesos, así como muestras de tejidos y sangre,
tomados bajo condiciones de anaerobiosis en contenedores adecuados para su recolección
y transporte.
Frotis. Los frotis coloreados con tinción de Gram muestran bacilos pleomórficos, for-
mas filamentosas y cuerpos redondos coloreados de forma irregular, gramnegativos.
Cultivo. Los cultivos deben incubarse de 35 a 36 0 C, a pH 7, bajo condiciones de
anaerobiosis durante 2 a 5 días en agar-sangre para anaerobios con vancomicina; pueden
emplearse la infusión cerebro-corazón suplementada con extracto de levadura, agar Brucella
y agar Columbia, suplementados con vitamina K1 y hemina.
Las colonias se describen circulares con bordes enteros, difusos o altamente
festoneados, convexas, translúcidas, lisas y no hemolíticas.

243
Microbiología y Parasitología Médicas

Pruebas fisiológicas. Son en su mayoría indol positivo con excepción de F. mortiferum,

F. russii y F. ulcerans; no crecen en bilis al 20 % excepto F. mortiferum, F. ulcerans y F.
varium; no hidrolizan la esculina salvo F. mortiferum que también fermenta la lactosa y la
fructuosa; el resto de las especies resultan negativas. Son resistentes a la vancomicina (5 g/
mL) y susceptibles a la kanamicina y colistina.
Mediante cromatografía en gas-líquido se pueden obtener los ácidos grasos produci-
dos durante el metabolismo, detectándose gran cantidad de ácido butírico.

TRATAMIENTO
Las fusobacterias son sensibles a la penicilina G, que se utilizan como droga de elección,
y como drogas alternativas secundarias se emplean la clindamicina y el cloranfenicol.

PREVOTELLA
El género Prevotella incluye especies con nombres nuevos y otras que se clasificaron
previamente como especies de Bacteroides (por ejemplo, P. melaninogenica, la cual se
llamaba con anterioridad B. melaninogenicus).
El género Prevotella agrupa las especies en dependencia de la producción de pigmentos
o no y sensibilidad a la bilis.
Las prevotellas pigmentadas y sensibles a la bilis incluyen a: P. intermedia, P. corporis,
P. melaninogenica, P. denticola y P. loescheii.
Las prevotellas no pigmentadas y sensibles a la bilis comprenden a las siguientes
especies: P. oralis, P. buccae, P. heparinolytica, P. zoogleoformans, P. veroralis, P. oris, P.
oulora, P. bivia, P. disiens, P. buccalis y P. oulorum.
De las especies anteriores, las aisladas con mayor frecuencia son: P. melaninogenica, P.
bivia y P. disiens; la primera se halla asociada a infecciones de las vías respiratorias superio-
res y las otras dos, en las vías genitales femeninas.

MORFOLOGÍA E IDENTIFICACIÓN
Microorganismos típicos. Son bacilos gramnegativos delgados, en pares y ocasional-
mente aparecen cadenas cortas y formas cocobacilares, son no esporulados y no móviles.
Cultivo. Crecen de 35 a 36 0 C, a pH 7, en condiciones de anaerobiosis en agar-sangre con
vancomicina y kanamicina. Crecen en bilis al 20 %.

DATOS CLÍNICOS
Las infecciones por Prevotella son también de tipo polimicrobiano, asociándose con
anaerobios que forman parte de la flora normal, en particular Peptoestreptococcus, bacilos
anaerobios grampositivos, y especies de Fusobacterium; así como anaerobios facultativos
grampositivos y gramnegativos que son parte de la flora normal.
Pueden ocasionar amigdalitis aguda y crónica, sinusitis crónica y abscesos encefálicos.
P. melaninogenica se asocia con infecciones de las vías respiratorias inferiores como: el
absceso del pulmón, el empiema y la neumonía aspirativa.
Prevotella bivia y P. disiens se presentan en las vías genitales femeninas ocasionando
enfermedad inflamatoria pélvica, abscesos tuboováricos, endometritis y vaginosis.
En la piel infecta tejidos traumatizados y desvitalizados por heridas o isquemia de las
extremidades, sobre todo en pacientes diabéticos.

PRUEBAS DIAGNÓSTICAS DE LABORATORIO

Muestras. Pus de abscesos y lesiones tomados para cultivo en anaerobiosis en conte-
nedores adecuados y con las medidas necesarias.

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 Bacilos y cocos gramnegativos anaerobios

Frotis. Teñidos con tinción de Gram se observan como bacilos y cocobacilos colorea-
dos de forma irregular. P. disiens pueden mostrar bacilos en pares y cadenas cortas.
Cultivo. Crecen de 35 a 36 0 C, a pH 7, en condiciones de anaerobiosis y aerobiosis en
agar-sangre con vancomicina y kanamicina; se observan colonias circulares de bordes ente-
ros, convexas, no hemolíticas, con un centro oscuro y bordes de color gris a carmelita claro;
con la incubación prolongada de 1 a 2 días se intensifica la producción de pigmentos. Esta
producción de pigmentos en agar-sangre depende del tipo de sangre que se utilice, recomen-
dándose para estos fines la sangre de conejo. Las colonias fluorescen bajo luz ultravioleta
rosado, naranja o amarillo-verdoso. La fluorescencia puede no ser detectada después de la
producción de pigmentos. Las especies no pigmentadas son resistentes a la vancomicina.
Pruebas fisiológicas. Las especies de Prevotella pigmentadas (P. intermedia, P. corporis,
P. melaninogenica, P. denticola, P. loescheii) son catalasa negativa, todas fermentan la
glucosa y la maltosa; la lactosa no es fermentada por P. intermedia y P. corporis, y la
celobiosa sólo es fermentada por P. loescheii. Son, en su mayoría, indol negativo, con
excepción de P. intermedia. Las especies pigmentadas son resistentes a la vancomicina y
kanamicina, y variables a la colistina.
Las especies de Prevotella no pigmentadas y sensibles a la bilis se agrupan realizando
determinadas pruebas fisiológicas (ver Cuadro 25.1). Mediante cromatografía en gas-líquido
se obtienen los productos del metabolismo de la glucosa como: el ácido succínico, isovalínico,
isobutírico y fórmico.

Cuadro 25.1. Características de las especies de Prevotella no pigmentadas y sensibles a la bilis

Hidrólisis de
Subgrupo y especies Glucosa Sacarosa Lactosa Arabinosa Xilosa Salicina Celobiosa la esculina Indol

Especies sacarolíticas
que fermentan pentosa
P. oris + + + + + + + + -
P. buccae + + + + + + + + -
P. heparinolytica + + + + + + + + +
P. zoogleoformans + + + V V V + + -
Especies sacarolíticas
que no fermentan pentosa
P. oralis. + + + - - + + + -
P. buccalis + + + - - - + + -
P. veroralis + + + - - - + + -
P. oulora + - + - - - - - -
Especies sacarolíticas y
proteolíticas
P. bivia + - + - - - - - -
P. disiens + - - - - - - - -

Tomado de: Jousimies-Somer HR, Finegolid SM. In: Balows A et al. (eds.). Manual of Clinical Microbiology. 5th ed. 1991:548.

TRATAMIENTO
El tratamiento de las infecciones mixtas por anaerobios es por drenaje quirúrgico más
terapéutica antimicrobiana. Muchas cepas de Prevotella producen ß-lactamasa (P. bivia y P.
disiens). Los agentes más efectivos en el tratamiento de estas infecciones son la clindamicina
y el metronidazol, empleándose medicamentos alternativos como cefoxitina, mezlocilina y
piperacilina.

PORPHYROMONAS
Este género incluye especies con nombres nuevos y especies que se incluyeron en el
género Bacteroides. Los miembros de este género son parte de la flora normal de la cavidad
oral y de otros sitios anatómicos. Producen colonias pigmentadas y son asacarolíticas. Este
grupo comprende las siguientes especies: P. asaccharolytica, P. endodontalis y P. gingivalis.

245
Microbiología y Parasitología Médicas

MORFOLOGÍA E IDENTIFICACIÓN
Microorganismos típicos. Son cocobacilos gramnegativos pleomórficos, teñidos de
forma irregular, anaerobios, no esporulados y no móviles.
Cultivo. Se cultivan de 35 a 37 °C, a pH 7, bajo condiciones de anaerobiosis en agar-
sangre para anaerobios preferiblemente con sangre de conejo para favorecer la producción
de pigmentos. Las colonias son similares al género Prevotella.

DATOS CLÍNICOS
Pueden causar infecciones gingivales y periapicales de los dientes, y más comúnmente
infecciones mamarias, axilares, perianales, así como en genitales masculinos.

PRUEBAS DIAGNÓSTICAS DE LABORATORIO

Muestras. Pus de abscesos y lesiones tomadas con medidas adecuadas para el cultivo
de anaerobios, envasadas en contenedores propios para estos fines.
Frotis. Las muestras coloreadas con tinción de Gram muestran cocobacilos gramnegativos
pleomórficos, irregularmente teñidos.
Cultivo. Las muestras deben ser cultivadas en anaerobiosis y aerobiosis con medios
adecuados a pH 7 y temperatura entre 35 y 37 0C, preferiblemente en agar con sangre de
conejo, kanamicina y colistina, y en agar Brucella suplementado con vitamina K1 y hemina.
Las colonias son circulares, de bordes enteros, convexas, no hemolíticas, con pigmentos
que van del gris al carmelita oscuro con la incubación prolongada de 2 a 21 días y fluorescen
de color rojo ladrillo bajo luz ultravioleta.
Pruebas fisiológicas. Las especies de Porphyromonas son indol negativo, lipasa nega-
tiva, catalasa negativa; no fermentan los carbohidratos como la lactosa, glucosa, maltosa y
celobiosa, por lo que se conocen como especies asacarolíticas. Son resistentes a la kanamicina
y colistina, y susceptibles a la vancomicina.
Mediante cromatografía en gas-líquido se obtienen los ácidos grasos producidos du-
rante el metabolismo de la glucosa, como son: el ácido acético, propiónico, isobutírico,
isovalínico, succínico y fenilacético.

TRATAMIENTO
Se emplea tratamiento quirúrgico y medicamentoso, utilizándose penicilina G,
metronidazol y clindamicina.

COCOS GRAMNEGATIVOS ANAEROBIOS

Los cocos gramnegativos anaerobios se incluyen en la familia Veillonellaceae, la cual
está conformada por tres géneros: Veillonella, Megasphaera y Acidaminococcus. Estos
microorganismos se han reportado muy raramente como patógenos humanos significativos.
Son parte de la flora humana normal, especialmente en la boca, aparato respiratorio e intesti-
no grueso.
Los miembros de la familia Veillonellaceae se asocian con infecciones de la cavidad oral,
la cabeza, el cuello, las heridas por picaduras, así como con infecciones de tejidos blandos.
El género Veillonella incluye varias especies: V. parvula, V. atypica, V. dispar, V. caviae,
V. rodentium, V. ratti y V. cricetti.
Veillonella parvula es la más frecuente en muestras clínicas, el resto de las especies
fueron designadas a partir de 1982.
El género Megasphaera incluye una sola especie: M. elsdenii, y el género
Acidaminococcus también está constituido por una sola especie: A. fermentans.

246
 Bacilos y cocos gramnegativos anaerobios

CARACTERÍSTICAS GENERALES
Son cocos gramnegativos anaerobios, de crecimiento lento, que a veces requieren pro-
longar la incubación de sus exámenes bioquímicos; las reacciones bioquímicas no deben ser
leídas hasta que no se observe un crecimiento suficiente.
Existen tests bioquímicos para la identificación presuntiva de los cocos anaerobios
basados en su morfología colonial y celular, fluorescencia bajo luz ultravioleta, susceptibili-
dad a los discos de antibióticos y la determinación de las características bioquímicas; pero la
identificación confirmativa o definitiva requiere de la fermentación de carbohidratos y de la
cromatografía en gas-líquido (GLC), puesto que durante el metabolismo de células anaerobias
se producen: alcoholes, ácidos grasos y ácidos orgánicos no volátiles que son detectados
por GLC y que permiten la identificación presuntiva y definitiva de estos microorganismos.
El uso de GLC es esencial para diferenciar entre los tres géneros de cocos gramnegativos,
observándose la típica producción de ácidos grasos; también se puede diferenciar sobre la
base de su talla, y aunque esto no es totalmente fiel, puede ayudar.
Las colonias de Veillonella son muy pequeñas, blanco-grisáceas, translúcidas y redu-
cen nitratos a nitritos (NO3 – NO2). Las de Acidaminococcus son de moderada talla; y las de
Megasphaera son muy grandes (las células son mayores que 1,5 µm). Son gramnegativas de
acuerdo con la composición de la pared celular, aunque pueden verse grampositivas.
Las colonias de Veillonella semejan a los pigmentos de Porphyromonas y Prevotella
sp., y pueden fluorescer rojo bajo los rayos ultravioletas.
Veillonella sp. son no fermentativos y producen ácido propiónico.
Acidaminococcus fermentans no fermentan los carbohidratos y producen ácido acítico
y ácido butírico.
Megasphaera elsdenii fermentan algunos carbohidratos (glucosa y maltosa) y produ-
cen ácido caprónico.

VEILLONELLA

MORFOLOGÍA E IDENTIFICACIÓN
Microorganismos típicos. Son cocos gramnegativos agrupados en pares, en masas o
cadenas, aunque pueden observarse células simples, no móviles, no esporulados, no
capsulados y no flagelados, con un diámetro de 0,3 a 0,5 µm y un largo de 2,5 µm.
Cultivo. Se cultivan en agar-sangre con vancomicina en condiciones de anaerobiosis,
con un pH de 6,5 a 8, a temperatura entre 30 y 37 0C; crecen pobremente a 40 0C y de forma
lenta a 24 0C. Las colonias tienen un diámetro de 1 a 3 mm, son lisas, cristalinas, opacas y de
color blanco-grisáceo.
Pruebas fisiológicas. No fermentan los carbohidratos (glucosa, lactosa, maltosa, saca-
rosa) y producen ácido propiónico.
Pruebas serológicas. Están basadas en la endotoxina que permiten especificidad
serológica.

TRATAMIENTO
Son sensibles al cloranfenicol, imipenem, metronidazol, clindamicina, cefoxitina, ticarcilina,
penicilina G, kanamicina y colistina.

ACIDAMINOCOCCUS

MORFOLOGÍA E IDENTIFICACIÓN
Microorganismos típicos. Son cocos gramnegativos, de forma oval o de riñón, agrupa-
dos en parejas, no móviles, no flagelados, no esporulados; poseen un lipopolisacárido a
nivel de la pared celular que constituye su endotoxina.

247
Microbiología y Parasitología Médicas

Cultivo. Necesitan requerimientos nutricionales múltiples, entre los que se encuentran:

triptona, ácido glutámico, valina, arginina, cisteína, tirosina e histidina. Crecen en condicio-
nes de anaerobiosis, en agar- sangre con vancomicina (7,5 µm/mL), con un pH entre 6,2 y 7,5,
y un rango de temperatura entre 30 y 37 0C.
Pruebas fisiológicas. No fermentan los carbohidratos y producen ácido acético y ácido
butírico. No licuan la gelatina, no producen ácido sulfhídrico, ni indol; son catalasa y oxidasa
negativas, y no reducen los nitratos a nitritos.

TRATAMIENTO
Son sensible a la colistina y a la kanamicina.

MEGASPHAERA

MORFOLOGÍA E IDENTIFICACIÓN
Microorganismos típicos. Son cocos gramnegativos relativamente grandes, con un
diámetro de 2 µm o más, agrupados en pares, rara vez agrupados en cadena; son no móviles,
no esporulados y anaerobios obligados.
Cultivo. Crecen en agar-sangre con vancomicina, en condiciones de anaerobiosis, a pH
6,2 y 7,5, y temperatura entre 30 y 37 0C.
Pruebas fisiológicas. Fermentan la glucosa y la maltosa, y producen múltiples ácidos
grasos, incluyendo el ácido caproico.

TRATAMIENTO
Son sensibles a la colistina y a la kanamicina.
Las características generales y la identificación de los cocos gramnegativos anaerobios
se resumen en el Cuadro 25.2

Cuadro 25.2 . Identificación de cocos gramnegativos anaerobios

Fluorescencia luz

Coloración Gram

Fermentación
ultravioleta
Utilización
de piruvato

Catalasa

Gelatina

Sacarosa
Esculina

Glucosa

Ácidos grasos en
Maltosa
Lactosa
Nitrato

caldo glucosa-pep-
Indol

tona, extracto de
levadura Colonias

Veillonella parvula + Roja - V - + - - - - - - A, P, S* Muy pequeñas

Acidaminococcus fermentans - (-) - - - - - - - - - - A, B, P*, L* Moderada talla
Megasphaera elsdenii + (-) - - - - - - + - + - A, IB, B, IV, Muy grandes
V, C, L, F*

+: 90 % otras de positividad. *= No produce ácido uniformemente. IB: ácido isobutírico.

-: 90 % otras de negatividad. A= ácido acético. IV: ácido isovalérico.
V : variables. P= ácido propiónico. V: ácido valérico.
S= ácido succínico. C: ácido caproico.
B= ácido butírico. F: ácido fórmico.
L= ácido acético.

Tomado de: Howard BJ, Keisser JF. Anaerobic Bacteria. Clinical and Pathogenic Microbiology. 2nd ed. 1994:411.

248
 Bacilos y cocos gramnegativos anaerobios

RESUMEN
Los bacilos gramnegativos anaerobios incluyen 22 géneros, de ellos cuatro son impor-
tantes en la práctica médica; estos son: Bacteroides, Fusobacterium, Prevotella y
Porphyromonas. Los mismos forman parte de la flora normal de la mucosa oral, tracto respi-
ratorio superior, tracto intestinal y urogenital del hombre y animales superiores, por lo que
causan infecciones polimicrobianas de origen endógeno.
Los cocos gramnegativos anaerobios se incluyen en la familia Veillonellaceae, que
consta de tres géneros: Veillonella, Megasphaera y Acidaminococcus. Estos microorga-
nismos forman parte de la microflora de las cavidades del cuerpo de los animales y el hombre,
especialmente a nivel de la boca, el aparato respiratorio superior y el intestino grueso. Se
reportan muy raramente como patógenos humanos significativos. V. parvula es la especie
aislada con más frecuencia en este grupo de microorganismos, los cuales son resistentes a
la vancomicina y sensibles a la kanamicina y colistina.
El diagnóstico presuntivo de estos microorganismos se basa en la morfología colonial y
celular, producción de pigmentos, fluorescencia bajo luz ultravioleta, susceptibilidad a los
discos de antibióticos (vancomicina, kanamicina y colistina) y características bioquímicas;
mientras que el diagnóstico de laboratorio se realiza mediante cromatografía en gas-líquido.
El tratamiento de estas infecciones por bacilos gramnegativos es quirúrgico, a través del
drenaje de los abscesos y con drogas antimicrobianas; se emplea la penicilina G en aquellas
infecciones en las que no participen especies de Bacteroides, Prevotella y Porphyromonas
productoras de β-lactamasa. Las drogas de elección son la clindamicina y el metronidazol.

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