FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA DE ENFERMERÍA

FACULTAD DE CIENCIAS DE
LA SALUD ESCUELA
PROFESIONAL DE
ENFERMERÍA

ASIGNATURA:
MICROBIOLOGÍA Y
PARASITOLOGÍA
TEMA:
GUÍA PRACTICA 07

Integrantes:
- Alvarado Palomino
Marcos Smith
- Acosta Vázquez Isabel
Nicoll
- Bruno Ramos Amy
Pierina
- Becerra Arévalo Lorena
Stephanie
- Carnero Huertas Silvia
- Castro Regalado Crisly
Paoli
- Changanaque Zapata
Janet
- Chulle calle Eliana
Milagros
DOCENTE:
Cruz Ojeda de Chavez
Rosa Elena

PIURA – PERÚ
2022
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA
PRÁCTICA Nro. 07

Laboratorio de: Fecha :

Microbiología y Parasitología

Temática :
Bacilos Gramnegativos:
Escherichia coli, Klebsiella spp, Salmonella spp, Shigella spp, Proteus spp, Yersinia pestis, Pseudomonas
aeruginosa, Vibrio cholerae, Helicobacter pylori, Brucella spp, Bordetella pertussis, Chlamydia trachomatis,
Gardnerella vaginalis Espiroquetas: Treponema pallidum, Leptospira interrogans.
Sesión:7 Resultado de aprendizaje:
Aplica el conocimiento de la interacción
entre las bacterias y virus con el ser
humano, considerando su relación con el
medio ambiente.

Estudiante: Tiempo desarrollo de la guía:

IV Ciclo de la Escuela Profesional de Enfermería 150 minutos

I. INTRODUCCIÓN
“La familia de las enterobacterias (Enterobacteriaceae) incluye múltiples géneros y
especies de bacilos gramnegativos, algunos de los cuales son patógenos para el ser
humano. Tienen una amplia distribución: en el agua, el suelo, las plantas y la flora
intestinal de muchos animales y del hombre. Algunas especies (Shigella spp., varias
serovaresde Salmonella, Yersinia pestis) se han adaptado al ser humano y se consideran
patógenos primarios, mientras que otras (Escherichia coli, Klebsiella spp., Citrobacter spp.,
Enterobacter spp., Morganella morganii, Proteus spp., Providencia spp., Serratia spp., etc.)
forman parte de la microbiota normal, pero pueden comportarse como patógenos
oportunistas. El principal mecanismo de transmisión de estos microorganismos se produce
a través de las manos del personal sanitario, que se coloniza cuando entra en contacto con
pacientes que a su vez están colonizados”.
“El género Pseudomonas incluye múltiples especies con amplia distribución en diversos
ambientes, en especial los húmedos. La especie más importante en patología humana es
P. aeruginosa, que causa infecciones graves, con elevada morbimortalidad, en pacientes
inmunosuprimidos, principalmente en el ámbito hospitalario, en UCI y en unidades de
críticos oncohematológicos; además, es la causa más frecuente de infección respiratoria
crónica en pacientes con fibrosis quística. Las infecciones nosocomiales generalmente
incluyen neumonías, bacteriemias, infección de herida quirúrgica e infecciones de vías
urinarias. P. aeruginosa logra sobrevivir en ambientes y temperaturas propias del entorno
clínico y crece fácilmente en medios de cultivo habituales, pues sus requerimientos
nutritivos son escasos. Su identificación en el laboratorio y la determinación de su
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA

sensibilidad a los antimicrobianos no suelen plantear dificultades, con la excepción de los

fenotipos mucosos que suelen identificarse en pacientes con fibrosis quística”.
“Vibrio cholerae 01 es un anaerobio facultativo. En presencia de oxígeno respira, y en su
ausencia es capaz de fermentar. Puede crecer en medios que contienen carbohidratos,
particularmente glucosa, así como nitrógeno, azufre, fósforo y sodio y se adhiere a
sedimentos para obtener estos nutrientes. Tiene un requerimiento absoluto de Na+ para el
crecimiento. Dos estudios de laboratorio han revelado que las cepas toxígenas de V.
cholerae 01 biotipo El Tor requieren Na+ para sobrevivir en ausencia de otros nutrientes y
para crecer más rápido en presencia de ellos. Se encontró que el requerimiento de Na+ no
se podía satisfacer mediante la sustitución con los metales alcalinos Li+ o K+ . Sin embargo,
la adición de los metales alcalinotérreos Ca2+ y Mg2+ en presencia de Na+ contribuyó a
prolongar su supervivencia”
II. CONOCIMIENTOS PREVIOS: Evaluación Inicial
¿Qué bacilos Gramnegativos conocen?

• Escherichia coli

• Klebsiella spp.

• Salmonella spp.

• Shigella spp.

• Proteus spp.

• Yersinia pestis Pseudomonas

• aeruginosa Vibrio cholerae

• Helicobacter pylori

• Brucella spp.

• Bordetella pertussis Chlamydia trachomatis Gardnerella vaginalis

¿Qué bacilos Gramnegativos producen enfermedades en el hombre?

• Salmonella: Produce tifoidea .

• Shigella: Produce la disentería bacilar.

• Pseudomonas aeruginosa : Infecciones en los quemados y también en inmunodeprimidos

• Yersinia pestis: Produce la peste.

• Klebsiella: Produce neumonías.

• Brucella: Produce la fiebre de malta.

• Escherichia Coli: Produce infecciones al tracto urinario y procesos diarreicos depende el serotipo
. Helicobacter pylori: Relacionado con úlceras al nivel del estómago.

• Bordetella pertussis Produce la tos ferina o coqueluche.

• Chlamydia trachomatis: Produce el linfogranuloma venéreo, y en los recién nacidos tracoma.

• Gardnerella vaginalis : Produce la vaginosis.
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA
• Vibrio cholerae -> Produce el colera, caracterizado por diarrea masiva.

III. MATERIAL
1. Material de Laboratorio (por mesa de práctica).
• 02 Microscopios
• Láminas montadas de Escherichia coli, Salmonella. Shigella, Vibrio cholerae,
Pseudomonas aeruginosa.
• Placas con Agar Mc Conkey sembradas con Escherichia coli, Salmonella. Shigella,
Pseudomonas aeruginosa.
• Placas con Agar SS sembradas con Salmonella. Shigella
• Placas con Agar TCBS sembradas con Vibrio cholerae
• Set de lectura de pruebas bioquímicas de Escherichia coli, Salmonella. Shigella, Vibrio
cholerae
2. Material individual
• Guía de prácticas
• Guantes descartables, mascarilla descartable y gorro
• 01 Marcador indeleble

IV. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

Actividad 1. Reconocimiento de Escherichia coli, Salmonella, Shigella, Vibrio cholerae,
Pseudomonas aeruginosa.
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA

• Características culturales
- Reconocer características de las colonias: aspecto, color.

Pseudomonas aeruginosa
en Mc Conkey
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA

• Características microscópicas
- Reconocer características microscópicas
Enterobacteriaceae

Vibrio cholerae

• Identificación bioquímica
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA

0.5 PUNTO Observación:

Escherichia coli

Muestra:
Orina

Coloración:
Gram

Aumento:
1000

0.5 PUNTO

Observación:
Escherichia coli

Características culturales:

Agua macconkey onkei Da

colonias rosadas

0.5 PUNTO
Escherichia coli

TSI A/A+-(G+;
SH2-)

K/K
LIA

UREASA -Negativo

-Negativo
CITRATO

TSI LIA UREASA CITRATO INDOL +Positivo

INDOL
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA

0.5 PUNTO Observación:

Salmonella sp.

Muestra:
Heces

Coloración:
Gram

Aumento:
1000

0.5 PUNTO

Observación:
Salmonella sp.

Características culturales:

En Agar Salmonella Shigella

da colonias translucidas e
incoloras con SH2 en el centro

0.5 PUNTO
Salmonella sp.
K/A-+++
TSI

K/K-+
LIA

-Negativo
UREASA

+Positivo
CITRATO

-Negativo
TSI LIA UREASA CITRATO INDOL
INDOL
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA

0.5 PUNTO Observación:

Shigella sp.

Muestra:
Heces

Coloración:
Gram

Aumento:
1000

0.5 PUNTO

Observación:
Shigella sp.

Características culturales:

En Agar SS, da colonias

translucidas e incoloras

0.5 PUNTO
Shigella sp.

TSI K/A--

k/A
LIA

-Negativo
UREASA

+Negativo
CITRATO

TSI LIA UREASA CITRATO INDOL +Negativo

INDOL
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA

0.5 PUNTO Observación:

Vibrio cholerae

Muestra:
Cultivo en heces

Coloración:
Gram

Aumento:
1000
0.5 PUNTO

Observación:
Vibrio cholerae

Características culturales:

En Agar TCBS forma

colonias Amarillentas
cremosas

0.5 PUNTO
Vibrio cholerae
A/A
TSI

k/k
LIA

Negativo
UREASA

Positivo
CITRATO

TSI LIA UREASA CITRATO INDOL Positivo

INDOL
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA

Observación:
Pseudomonas aeruginosa
0.5 PUNTO Muestra:
Orina

Coloración:
Gram

Aumento:
1000

0.5 PUNTO

Observación:
Pseudomonas aeruginosa

En Agar
Características Cetrimide, forman
culturales:
pigmentos verdes azulados
(pioverdina y piocianina)

V. PRECAUCIONES Y BIOSEGURIDAD
Aprender el manejo cuidadoso de muestras que pueden contener organismos vivos
peligrosos.
Portar la bata y equipo de protección (guantes)
Trabajar siguiendo cuidadosamente el protocolo de la práctica.
Cumplir con las normas establecidas en el reglamento del laboratorio.
Avisar al responsable de la práctica de cualquier accidente por insignificante que parezca.
No usar equipo que desconozcas su manejo o del cual se tengan dudas.
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA

VI. CONCLUSIONES (1 PUNTO)

• Los Enterobacteriaceae incluye múltiples géneros y especies de bacilos gramnegativos, algunos de los cuales son
patógenos para los humanos. Están ampliamente distribuidos: en el agua, el suelo, las plantas y la flora intestinal de
muchos animales y humanos. Algunas especies como: Lactosa negativos Yersinia pestis(Shigella, varios Los serotipos
de Salmonella, Yersinia pestis) se han adaptado al ser humano y se consideran patógenos importantes, mientras que
otros de la Lactosa positivos como: (Escherichia coli, Klebsiella, Citrobacter, Enterobacter, Morganella, Proteus)
Providencia spp., Serratia spp., etc.) forman parte del microbiotanormal ,pero pueden comportarse como patógenos
oportunistas.

• Los bacilos Gramnegativos producen enfermedades, Escherichia Coli: Produce infecciones al tracto urinario y procesos
diarreicos depende el serotipo, Salmonella: Produce tifoidea, Shigella: Produce la disentería bacilar , Pseudomonas
aeruginosa: Infecciones en los quemados y también en inmunodeprimidos, Yersinia pestis: Produce la peste,
Helicobacter pylori : Relacionado con úlceras al nivel del estómago, Klebsiella: Produce neumonías, Brucella: Produce
la fiebre de malta, Bordetella pertussis: Produce la tos ferina o coqueluche, Chlamydia trachomatis: Produce el
linfogranuloma venéreo, y en los recién nacidos tracoma, Gardnerella vaginalis: Produce la vaginosis, Vibrio cholerae:
Produce el colera, caracterizado por diarrea masiva.
 FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE ENFERMERÍA

VII. evaluación
1. COMPLETE EL SIGUIENTE CUADRO EN RELACIÓN AL ASPECTO DE LAS HECES DE LOS
PACIENTES CON INFECCIÓN POR: (4 PUNTOS)
bacteria aspecto de las heces
escherichia coli Diarreas acuosas con presencia de sangre
salmonella sp. Diarreas espesas, hediondas (huevo podrido), rara vez sangre.
Shigella sp. Heces acuosas, con presencia de moco, pus y sangre
Vibrio cholerae Heces líquidas con aspecto de agua de arroz con poco material fecal
2. EXPLIQUE A QUE SE DEBE LA RESISTENCIA A MULTIPLES ANTIBIÓTICOS POR
Pseudomonas aeruginosa: (4 PUNTOS)
Se debe a la falta de dianas susceptibles o por existencia de genes que codifican para sustancias o
estructuras que las protegen de moléculas tóxicas o antimicrobianos. P. aeruginosa posee un genoma
grande y complejo (5-7 Mb) con una gran cantidad de maquinaria relacionada con la resistencia a
antibióticos, gracias a la amplia gama de mecanismos de resistencia, pueden ocasionar cepas
multirresistentes o incluso panresistentes. Esta resistencia puede ser intrínseca o adquirida, en función
de si la resistencia es propia de la especie o si en cambio se ha adquirido mediante mutación o
transferencia de material genético.

VIII. OBSERVACIONES Y RECOMENDACIONES

Trabajar en grupos de mesa siguiendo cuidadosamente el protocolo de la práctica.
Preguntar cualquier duda al docente de mesa
Cumplir con las normas establecidas en el reglamento del laboratorio.
No correr, saltar, gritar
No cambiarse de mesa salvo autorización del docente
IX. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS (4 PUNTOS)
Código de LIBROS/REVISTAS/ARTÍCULOS/TESIS/PÁGINAS WEB.TEXTO
biblioteca
616.01 / M95c Murray P, Rosenthal K, Pfaller M. Microbiología Médica. 6ta. ed. Madrid: Elsevier España; 2009.

616.01 / B84E Brooks G, Morse S, Batel J. Microbiología Médica de Jawetz, Melnick y Adelberg. 19na ed.
Mexico: El Manual Moderno: 2008.

Fariñas MC, Martínez-Martínez L. Infecciones causadas por bacterias gramnegativas

multirresistentes: enterobacterias, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii y otros
bacilos gramnegativos no fermentadores. Enferm Infecc Microbiol Clin. 2013;31(6):402-9.
Borroto RJ. Ecology of Vibrio cholerae serogroup 01 in aquatic environments. Rev Panam Salud
Pública. 2007;1(1):3-8.