Microscopio Óptico de Campo Oscuro

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UNIVERSIDAD ARTURO MICHELENA

FACULTAD DE CIENCIAS DE SALUD


ESCUELA DE PATOLOGÍA MÉDICA
CARRERA DE HISTOTECNOLOGÍA

MICROSCOPIO ÓPTICO
DE CAMPO OSCURO
Integrantes:
Colmenares Eyla 30.047.318
Mosquera Margaret 29.912.372
Zambrano Ariadna 30.515.815
¿QUÉ ES?
Es una modificación aplicada al sistema de campo claro. Utiliza un
enfoque de luz en forma de cono que atraviesa la muestra, la cual al
estar colocada sobre un fondo oscuro se hace visible al dispersar la
luz. En este sentido el microscopio de campo oscuro permite la
utilización de rayos de luz para percibir en la muestra analizada las
partes transparentes y las sólidas que son las que interesan estudiar.
HISTORIA
E N 1 9 0 3 E L F Í S IC O R IC H A R D
Z S I G M O N D Y F UE Q UIE N IN V E NTÓ
E L M IC R O S C O P IO D E C A M P O
O S C U R O MI E NT R A S R E A L IZ A B A
E X P E R I ME N T O S E N E L Á R E A D E
Q U Í M IC A D E C O L O ID E S . E S TE
A P A R A T O T A MB IÉ N E S
CONOCIDO COMO
U L T R A MI C R O S C O P IO . E L
IN V E N T O R D E L M IC R O S C O P I O D E
C A M P O O S C U R O L O D IS E ÑÓ
M O D IF IC A N D O E L
C O N D E N S A D O R P A R A D IR I GI R LA
L U Z Y D E T E C TA R S E N C IL L A M E NTE
L A S M U E S T R A S C A S I IN V IS I B LE S .
CARACTERÍSTICAS
EL COMPLEJO FUNCIONAMIENTO DE ESTE TIPO DE MICROSCOPIOS
ES TOTALMENTE DIFERENTE AL DE CAMPO CLARO, LO QUE LE
BRINDA LAS SIGUIENTES CARACTERÍSTICAS:

En los microscopios de campo oscuro, aunque


se utilicen rayos de luz para su funcionamiento,
si observamos por el ocular sin ninguna
muestra solo observaremos un círculo negro.
Esto se debe a que la luz no encontraría nada
que disperse sus haces.
Los condensadores utilizados son especiales
para controlar efectivamente los rayos de luz.
La visualización brillante de los elementos y
partículas en suspensión otorgan un contraste
perfecto para su estudio.
TIPOS
PUEDEN LLEGAR A SER CLASIFICADOS EN
DOS TIPOS, SEGÚN EL CONDENSADOR QUE
IMPLEMENTEN. LOS CUALES SUELEN SER DE
TIPO PARABOLOIDE Y EL CARDIOIDE, AMBOS
LLEGAN A CUMPLIR LA MISMA FUNCIÓN,
PERO EL PRIMERO LOGRA CONSEGUIR UN
CAMPO OSCURO MÁS IDÓNEO Y ES
UTILIZADO EN EL ESTUDIO DE LA SÍFILIS. EL
SEGUNDO POSEE UN DIAFRAGMA IRIS
REGULABLE, ESTE CONDENSADOR POSEE
FORMA DE CORAZÓN POR LO QUE DE ALLÍ
SURGE SU NOMBRE.
PARTES
SISTEMA MECÁNICO
Tornillo micrométrico:El tornillo micrométrico se mueve
Tubo:Es el dispositivo por donde viaja la imagen hacia adelante o hacia atrás para acercar o alejar la
reflejada y aumentada por el objetivo hasta llegar al muestra del objetivo. El tornillo micrométrico se utiliza
ocular u oculares. para movimientos muy finos o delicados, casi
imperceptibles. Es el que logra el enfoque definitivo.
Revólver:Es el soporte donde se ubican los distintos
Platina:Es el soporte donde reposará el espécimen sobre
objetivos. Los objetivos no están fijos, estos pueden
el portaobjetos. Posee una abertura central por donde
removerse. El revólver puede rotar de tal manera que se pasan los haces de luz. Cuando se mueven los tornillos
puede cambiar de objetivo cuando el operador así lo macro y micrométrico la platina sube o baja,
necesite. dependiendo del movimiento del tornillo.

El carro: permite que se pueda recorrer con el objetivo toda


Brazo o asa:El brazo une el tubo con la base. Es el
la muestra. Los movimientos permitidos son adelante y
lugar por donde debe agarrarse el microscopio
atrás y viceversa, y de izquierda a derecha y viceversa.
cuando se va a trasladar de un lado a otro. Con una
Pinzas sujetadoras:Estas se encuentran sobre la platina,
mano se toma el brazo y con la otra mano se sujeta la
están constituidas de metal y tienen como función sujetar
base.
el portaobjeto para evitar que esta se ruede durante su
Base o pie:Como su nombre lo indica es la base o
observación. Es importante que la muestra se mantenga
soporte del microscopio. Gracias a la base el
fija mientras se observa. Los sujetadores tienen la medida
microscopio es capaz de mantenerse fijo y estable
exacta para recibir al portaobjeto.
sobre una superficie plana.
PARTES
SISTEMA ÓPTICO
Oculares:Los oculares tienen forma cilíndrica y hueca.
Objetivos:Tienen forma cilíndrica. Poseen una lente en la Estos poseen en su interior lentes convergentes que
parte inferior que aumenta la imagen que proviene de la amplían la imagen virtual creada por el objetivo.
muestra. Los objetivos pueden ser de diversos El ocular se une con el tubo. Este último permite que la
aumentos. Ejemplo: 4,5X (lupa), 10X, 40X y 100X (objetivo imagen transmitida por el objetivo llegue al ocular, que
de inmersión). la aumentará nuevamente.
El objetivo de inmersión se denomina así porque El ocular en su parte superior contiene un lente
necesita de la colocación de unas gotas de aceite entre denominado ocular y en su parte inferior alberga un
el objetivo y la muestra. Los demás son llamados lente llamado colector.
objetivos secos.

También posee un diafragma y dependiendo de El aumento del ocular oscila entre 5X, 10X, 15X o
donde se ubique tendrá un nombre. Los que se 20X, dependiendo del microscopio.
ubican entre ambas lentes se denomina ocular de
Huygens y si se ubica después de las 2 lentes se
llama ocular de Ramsden. Aunque existen muchos
otros
PARTES
SISTEMA DE ILUMINACIÓN
Lámpara:Es la fuente de iluminación y se ubica en la parte Oculares:Los oculares tienen forma cilíndrica y hueca.
inferior del microscopio. La luz es halógena y es emitida de Estos poseen en su interior lentes convergentes que
abajo hacia arriba. Por lo general la lámpara que poseen amplían la imagen virtual creada por el objetivo.
los microscopios es de 12 V. El ocular se une con el tubo. Este último permite que la
Diafragma:El diafragma de los microscopios de campo imagen transmitida por el objetivo llegue al ocular, que
oscuro carecen de iris; en este caso este impide que los la aumentará nuevamente.
rayos que provienen de la lámpara lleguen de forma
El ocular en su parte superior contiene un lente
directa a la muestra, solo los haces oblicuos tocaran el
denominado
Condensadores ocular
deyreflexión:
en su parte
Soninferior alberga
los que un
utilizan
espécimen. Aquellos haces que sean dispersados por las
estructuras presentes en la muestra son los que pasarán al lente llamado colector.
los microscopios estereoscopios. Los hay de dos
objetivo. tipos: paraboloides y cardioides.
Paraboloides: poseen un tipo de curvatura
Condensador: El condensador de un microscopio de denominada paraboloides por su similitud a una
campo oscuro difiere de campo claro parábola. Este tipo de condensador es
Existen dos tipos: los condensadores de refracción y ampliamente usado en el estudio de sífilis, ya
los condensadores de reflexión. Este último a su vez se
que permite observar a los Treponemas.
divide en dos categorías: los paraboloides y los
Cardioides: la curvatura del condensador es de
cardioides.
Condensadores de refracción:Este tipo de forma similar a un corazón, de allí el nombre que
condensador posee un disco que se interpone para recibe “cardioide”, llevando el condensador el
refractar los rayos de luz, puede ubicarse encima del mismo nombre. Posee un diafragma que es
lente frontal o en el lado posterior. regulable.
USOS Y APLICACIONES
Ha generado increíbles avances científicos y a que se
desarrollen nuevas técnicas de microscopia
innovadoras. Es importante tener en cuenta el ámbito
donde se le vaya a dar uso a esta indispensable
herramienta de la ciencia. Siendo muy distintos sus
usos según el campo científico en el cual se está
trabajando.
Permitiendo identificar las características exactas
de ellas y su comportamiento. Gracias a esto es
Es implementado en muestras clínicas para indagar
posible implementarlo en gran numero de
sobre la presencia de Treponema Pallidum y para ciencias de la investigación.
observar las reconocidas Borrelias y Leptospiras. Este tipo de microscopio permite observar el
comportamiento de células y microorganismos
vivos. Facilitando incluso la identificación de las
capsulas o pared de los mismos. Esto hace que el
microscopio de campo oscuro sea de utilidad en
la medicina gracias a que permite estudiar la
sangre humana para comprender la salud de
cada paciente sin añadir sustancias externas.
¿CÓMO SE
UTILIZA?
-
Para utilizar microscopios como éstos, lo
más importante es colocar un fondo
totalmente negro, una excelente opción
es colocar una cartelera negra. Lo más
recomendable es colocar el aumento
entre 10X o 40X para apreciar
correctamente la muestra. Con estas
variables de observación podemos
colocar la muestra como objetivo en la
platina y visualizarla. De esta manera
lograremos apreciar muestras casi
invisibles sin afectarlas negativamente.
VENTAJAS DESVENTAJAS

-Los microscopios de campo oscuro con -Se debe tener especial cuidado al montar las
condensador de refracción son más económicos. preparaciones, ya que si quedan muy gruesas
no se observará bien.
-Su uso es muy útil en aumentos de 40X.
-La resolución de las imágenes es baja.
-Son ideales para observar muestras que posean un
índice de refracción similar al medio donde se -Los microscopios de campo oscuro que
encuentran. Por ejemplo, células en cultivo, levaduras utilizan condensadores de refracción presentan
o bacterias móviles como las espiroquetas un porcentaje de luminosidad muy bajo.
(Borrelias, Leptospiras y Treponemas).
-Para mejorar la calidad de la imagen con
-Se puede observar la célula in vivo, lo que permite objetivo de inmersión (100X) es necesario que
evaluar su comportamiento. Por ejemplo, se reduzca la apertura numérica de los
movimiento browniano, movimiento por flagelos, objetivos y así aumentar la del cono iluminador.
movimiento por emisión de pseudópodos, proceso Para ello es indispensable la incorporación de
de división mitótica, eclosión de larvas, gemaciones un diafragma adicional que pueda regular la
de levaduras, fagocitosis, entre otros. apertura numérica del objetivo.

-Permite resaltar los bordes de las estructuras, por -No se pueden visualizar preparaciones al seco,
ejemplo la cápsula y la pared celular. ni preparaciones coloreadas, a menos que
sean colorantes vitales.
-Es posible analizar partículas disgregadas.
-No permite la visualización de ciertas
-No es necesario el uso de colorantes. estructuras, especialmente las internas.
INSTALACIÓN Y
MANTENIMIENTO
1. Asegurarse que el ambiente o área en que se instale el microscopio esté protegido o protegida del polvo y la
humedad. El ambiente ideal debe disponer de un sistema de aire acondicionado que garantice aire libre de
polvo o partículas, control de humedad y control de temperatura de manera permanente.

2. Verificar que el ambiente o área en que se instale el microscopio disponga de seguridad: puerta con
cerradura para evitar su sustracción no autorizada.

3. Confirmar que el lugar seleccionado para ubicar el microscopio esté alejado de lugares como pocetas de
agua o donde se trabajen sustancias químicas, para evitar que el equipo resulte afectado por un derrame o
salpicadura. También deben evitarse sitios que tengan luz solar directa.

4. Verificar que el lugar seleccionado cuente con una toma eléctrica en buen estado, cuyo voltaje esté ajustado
en magnitud y frecuencia con los códigos y normas eléctricas, y que resulte compatible con el del sistema de
iluminación del microscopio. En caso de que el microscopio utilice espejo, debe estar ubicado cerca de una
ventana que permita una buena iluminación, pero sin estar directamente expuesto a la luz solar.

5. Instalar el microscopio sobre una superficie nivelada de estructura rígida, bajo la cual exista espacio suficiente
para que el usuario –microscopista– coloque sus piernas y como consecuencia pueda acercar el cuerpo hacia
el microscopio y la cabeza hacia los oculares, sin forzar la columna vertebral: cuello y espalda.
INSTALACIÓN Y
MANTENIMIENTO
6. Para facilitar la colocación del microscopista, proporcionar una silla de altura variable, que le brinde un buen
soporte lumbar; si es del caso, también proveer un apoyo para los pies, situado al frente del sitio de trabajo, no
en la silla. El propósito es lograr que la columna vertebral esté lo más recta posible y se reduzca la flexión de los
hombros y el cuello.

7. Evitar que en sitios cercanos al lugar de instalación del microcopio haya equipos que produzcan vibraciones
como centrífugas o refrigeradores.

8. Procurar no mover el microscopio de su sitio de instalación y con mayor razón si el mismo se utiliza
intensamente cada día.

9. Cubrir el microscopio con un protector de polvo si no se usa por períodos de tiempo largos; tomar
precauciones para que no lo afecten excesos de humedad. Mientras más seco el ambiente, menos probabilidad
de que se presente crecimiento de hongos. El protector puede ser de plástico o de tela similar en calidad a la
utilizada en la fabricación de pañuelos, que no suelte pelusa.

10. En zonas de humedad alta, guardar el microscopio durante la noche, en una cabina provista de un bombillo
de máximo 40 W.
Esto ayuda a mantener seco el entorno y reduce la probabilidad de que se presente formación de hongos. Si se
utiliza esta alternativa, verificar que disponga de orificios que permitan la ventilación del interior.
REFERENCIAS
BIBLIOGRÁFICAS
https://microscopiooptico.org/tipos-de-microscopios/campo-
oscuro/#Historia_del_microscopio_de_campo_oscuro

"MANTENIMIENTO GENERAL Y LIMPIEZA DEL MICROSCOPIO"


https://www.equiposylaboratorio.com/portal/articulo-
ampliado/mantenimiento-general-y-limpieza-del-microscopio

"Microscopio de campo oscuro: características, partes, funciones"


https://www.lifeder.com/microscopio-campo-oscuro/
¡GRACIAS POR
SU ATENCIÓN!

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