CLASE 3 Toxicologia
CLASE 3 Toxicologia
PROCESO DE
BIOTRANSFORMACIN.
Universidad Nacional del Callao
Facultad de Ingeniera Pesquera y de Alimentos
Blgo.- Ing. Arturo Garca Merino
Indices toxicolgicos
La toxicologa cuantitativa ha tenido incidencia en los
aspectos de evaluacin de los txicos presentes en
los alimentos.
Con lo anterior se ha puesto en evidencia el
aforismo de Paracelso: o el efecto daino de un
agente xenobitico depende de la dosis ingerida.
El riesgo es la posibilidad de que un agente
xenobitico pueda producir daos bajo condiciones
especficas. Como ejemplo, una sustancia altamente
txica, cuando se maneja en forma controlada
previniendo su absorcin ms all de su margen de
seguridad, se dice que se esta manejando con
seguridad.
Factor de seguridad.
Para establecer los niveles de seguridad o tolerancia
de un agente xenobitico al cual el humano estar
expuesto, y contemplando la variabilidad de la
respuesta biolgica, es necesario que el ndice
toxicolgico sea con base al factor de seguridad .
Algunos investigadores prefieren definirlo como un
factor de incertidumbre, que toma en cuenta la
variacin inter e intraespecie.
Con base a lo anterior un factor de 10 es
frecuentemente usado como vlido, cuando se
cuenta con datos de exposicin crnica en los
propios humanos; lo anterior tiene como fin el
considerar la variabilidad de respuesta entre los
diferentes individuos (variacin intraespecie) y
proteger aquellos ms susceptibles o hipersensibles.
CUADRO 7.1
Obtencin de la DDA a partir de DSEO
Dosis diaria admisible o ingesta diaria admisible
DDA = DSEO / FS
DSEO = dosis sin efecto observable (mg/Kg p.c.- da)
FS = Factor de seguridad (10 cuando la DSEO es de
la misma especie; 100 cuando es de otra especie;
mayor de 100 cuando la DSEO es en otra especie y la
informacin disponible no es concluyente).
Esta medida es adimensional.
p.c. = peso corporal
DDA DSEO (mg Kg dia)
CUADRO 7.2
Valores de DDA a partir de DSEO en la especie ms
sensible (adaptado de Vettorazzi, 1981)
ADITIVO
ESPECIE
ANIMAL
TIEMPO DE
ESTUDIO
DSEO
FS
DDA
Amaranto
Rata
64 semanas
150
200
0.75
Caramela
Rata
90 das
10,000
100
100
Clorofilina
Rata
2 aos
1,500
100
15
Curcumina
Rata
420 das
250
2,500 0.1
Eritosina
Rata
2 aos
250
100
2.5
Quinolina
Rata
2 aos
50
100
0.5
Amarillo
sunset
Perro
27aos
500
100
5.0
Riboflavina
Rata
3
generaciones
50
100
0.5
(mg/kg-da)
(mg/kg-da)
CUADRO 8.1
Clculo del MLR a partir del DDA
LMR = (1000 W / a ) x DDA
Donde W = peso del individuo (Kg)
a = consumo promedio diario de los alimentos
DDA = Dosis diaria admisible (mg xenobitico /Kg p.c.
da)
Unidades del LMR:
LMR = (Kg p.c./ g alimento da) X (mg xenobitico/ Kg
p.c. da) X (1000g alimento / Kg alimento) = mg
xenobitico / Kg de alimento = ppm
CUADRO 8.2
Estimacin de la ingesta diaria promedio de los
alimentos ms comunes en Europa
de Derache,
1990) DIARIA
ALIMENTO (adaptado
O GRUPO DE
INGESTA
ALIMENTOS
PROMEDIO
Carne de res (magra)
Vsceras (hgado)
Grasa animal (manteca)
Huevo
Leche
Papa
Verduras
Ctricos
Otras frutas
300 g
100 g
50 g
100 g
0.5 l
250 g
325 g
50 g
150 g
CUADRO 8.3
Obtencin del factor de multiplicacin (K)
para calcular LMR
LMR = (1000 W /a) x DDA
Donde:
W = 60 Kg de peso corporal
a = ingesta promedio de los alimentos
1000 W / a = K (factor de multiplicacin)
LMR = K x DDA
CUADRO 8.4
Limites mximos residuales del plaguicida miclobutanil
en alimentos (adaptado de FAO/OMS, 1993)
PLAGUICIDA DDA IDA
TIPO DE
LMR
(mg/Kg p.c.-da) CULTIVO
(mg/Kg)
0.03
Durazno
0.5
Chabacano
0.2
MICLOBITANIL (Estudios de
toxicidad crnica
en las siguientes
No. De Codex especies:
Cereza
Uva
(181)
Ciruela
Frutas pomceas
Carne de res
Despojos de res
0.2
0.5
0.01
0.01
1. Panorama general.
De acuerdo a la estructura de la membrana celular, esta
le confiere una selectividad en la absorcin tanto de las
sustancias endgenas como xenobiticas. Esta
selectividad permite que existan vas de absorcin
especfica para los nutrimentos hidrosolubles con un
gasto energtico (transporte activo), pero por otra parte
aunque la mayora de los organismos vivos son casi
impermeables a la gran mayora de las sustancias
hidrosolubles no deseables, no pueden prevenir la
absorcin de la mayora de las sustancias liposolubles.
En la Figura 1.1. tenemos resumido en un esquema
ilustrativo, las principales vas de absorcin y eliminacin
tanto de compuestos endgenos como exgenos
(Anders, 1985; Manahan, 1990; Shibamoto y Bjeldanes,
1996).
FIGURA 1.1
Principales vas de excrecin y absorcin de xenobiticos
FIGURA 1.2
Integracin del proceso de Biotransformacin de
xenobiticos (adaptada de Klaasen et al, 1986)
XENOBIOTICO
A
P
R
O
B
A
D
O
REACCIONES
DE FASE I
REACCIONES
DE FASE II
OXIDACION
REDUCCION
HIDROLISIS
CONJUGACION
Exposicion o
adiccion de
grupos funcionales
PRODUCTO
SECUNDARIO
PRODUCTO
PRIMARIO
Biosintesis
por adicion
De grupos
endogenos
EXCRECION
CARCTER
LIPOLITICO O NO
POLAR
CARCTER
HIDROFILICO
O POLAR
La
funcin
principal
del
proceso
de
Biotransformacin es la transformacin de los
agentes xenobiticos para facilitar su remocin a
travs del rin y la bilis principalmente.
Sin embargo, cuando se modifica la estructura
qumica del agente xenobitico, se puede
presentar en algunos casos, que se modifique la
actividad farmacolgica y en ocasiones hasta un
aumento de la toxicidad, lo que se conoce como
bioactivacin, como es el caso de las sustancias
denominadas procarcinognicas, las cuales
requieren del proceso de biotranformacin para
manifestar
el efecto carcinognico (Loomis,
1978; Anders, 1985).
Reacciones fase I.
La funcin de este tipo de reacciones, es
modificar la estructura qumica de la
molcula, por introduccin de grupos
funcionales como son hidroxilo, amino,
carboxilo entre otros. Tambin, se puede
obtener una mayor polaridad del agente
xenobitico por exposicin de grupos
funcionales como es el proceso de hidrlisis.
2.3 N-Dealquilacin.
La N-dealquilacin es la remocin de grupos
alquilo del tomo de nitrgeno y en realidad,
se podra considerar como un proceso donde
se exponen los grupos funcionales como es el
grupo amino. Los grupos N-alquil son
removidos oxidativamente por conversin al
correspondiente aldehdo .
2.4. N-Hidroxilacin.
La N-hidroxilacin de arilaminas primarias,
arilamidas e hidrazinas, es catalizada por el
sistema
de
oxidacin
microsomal
involucrando la participacin del citocromo P450 y requiriendo NADPH y oxgeno
molecular. As, el ejemplo ms simple es el de
la N-hidroxilacin de la anilina para producir
fenilhidroxilamina. Hay que mencionar que los
metabolitos formados por este proceso
oxidativo, pueden ser molculas muy
reactivas.
En
2.5. Desulfuracin.
La sustitucin del tomo de azufre por un tomo de
oxgeno en una molcula orgnica por oxidacin
microsomal, se conoce como desulfuracin y es un
proceso comn para la
Biotransformacin
de
los
insecticidas
organofosforados, los cuales se usan ampliamente
en las actividades agrcolas. Se tiene un ejemplo
ilustrativo como es la desulfuracin del paratin, con
lo cual se obtiene el metabolito oxidado que tiene
mayor efecto inhibidor sobre la acetilcolinestarasa.
(Timbrell, 1985; Miyamoto et al, 1988).
2.6.
Reacciones
de
oxidacin
no
microsomal.
Aunque el sistema de oxidacin microsomal
con la participacin del citocromo P-450, es el
proceso enzimtico ms comn en la
oxidacin de un compuesto extrao, hay otras
vas metablicas que pueden llevar a cabo la
oxidacin de algunas molculas orgnicas
como son: la oxidacin de aminas, alcoholes,
aldehidos y purinas entre otras (Timbrell,
1985; Miyamoto et al, 1988).
En
2.7. Reduccin.
Aunque el sistema de oxidacin microsomal que
contiene citocromo P-450 normalmente lleva a cabo
la oxidacin xenobitica; este sistema puede
funcionar como un proceso de biotranformacin
reductivo. El proceso reductivo se presenta cuando
hay una baja tensin de oxgeno molecular (baja
concentracin) y por consiguiente ciertos substratos
xenobiticos pueden aceptar uno o dos electrones
que son proporcionados por el sistema microsomal
con participacin del Citocromo P-450, en lugar del
oxgeno.
2.8. Hidrlisis.
En las reacciones de fase I del proceso de
biotransformacin de xenobiticos, lo que se
pretende es darle un mayor carcter polar a las
molculas, lo cual implica adicionarle grupos
funcionales polares tales como hidroxilo o aminas;
sin embargo, otro camino para llegar al mismo
propsito implica realizar un proceso hidroltico en
cierto tipo de compuestos, para que se puedan
exponer estos grupos polares funcionales (Timbrell,
1985; Gilman et al, 1990).
3.1. Glucuronidacin.
La principal reaccin de conjugacin que se
presenta en la mayora de las especies animales es
la incorporacin de cido glucurnico a travs del
cido uridn difosfo glucurnico (UDPGA). La
obtencin del anterior complejo donador proviene de
precursores disponibles del metabolismo normal; o
sea, que el UDPGA es formado en la fraccin
soluble de las clulas hepticas a partir de la
glucosa-1-fosfato.
3.2.- Sulfatacin.
En los mamferos, una importante conjugacin para
varios tipos de grupos hidroxilo es la formacin de
steres de sulfato.
Esta misma reaccin tambin se puede presentar
con grupos amino; as, pueden ser substratos de
esta conjugacin: alcoholes alifticos, aminas
aromticas, fenoles y compuestos endgenos tales
como esteroides y carbohidratos.
En este proceso de conjugacin el donador del
compuesto
endgeno
(sulfato)
es
el
3fosfoadenosin-5-fosfosulfato (PAPS), el cual a su
vez requiere ATP para su formacin.
El sulfato inorgnico precursor del PAPS puede ser
agotado cuando concentraciones significativas son
requeridas para este proceso de conjugacin.
CUADRO 4.2.
Capacidad relativa de las reacciones de conjugacin
(Adaptado de Klaassen et al, 1986).
REACCIN DE
CONJUGACIN
CAPACIDAD
Glucuronidacin
Alta
Con aminocidos
Media
Sulfonacin
Baja
Baja
Acetilacin
Variable
CUADRO 4.3.
Rutas preferidas de excrecin de conjugados de
xenobiticos
(Adaptado de Klaassen et al, 1986).
METABOLITOS FORMADOS
VA DE
ELIMINACIN
Rin
Bilis
Sulfatos
Rin
Rin
Bilis
Rin
GRACIAS POR SU
ATENCION