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Compte Rendu Du TP Numéro 1 D'hematoliogie Biologique
Compte Rendu Du TP Numéro 1 D'hematoliogie Biologique
biologique :
Principe :
Exécution d’un frotti sanguin par dépôt d’une goutte de sang sur une lame porte objet et appliquer
des colorants complémentaires, a caractère acidobasique puis observer cette monocouche
uniforme colorée à un objectif à immersion (G x_______), et repérer sur ce frottis les différentes
cellules sanguines.
Protocole expérimentale :
1. Exécution du frottis : Déposez une petite goutte de sang à l’extrémité d’une des deux lames en
tenant la lame par ses 2 cotés. Placer la lame 2, inclinée à 45°, contre la goutte de sang, jusqu’à
temps que le sang s’étale par capillarité sur l’ensemble de la largeur de la lame 2 puis faire alors
glisser la lame 2, rapidement et sans à-coup sur toute la longueur de la lame 1 de façon à étaler le
sang.
2. Fixation du frottis : Il faut fixer le frottis avant la coloration. A l’aide d’un compte goutte, recouvrir
entièrement la lame par de l’éthanol . Poser sur du papier absorbant et laisser agir 2 minutes.
3. Coloration du frottis : Mettre le portoir dans le bac II (May-Grünwald dilué au 1/2 : libération et
action des colorants acide et basique). Agiter doucement toutes les 30 secondes. Après 3
minutes retirer le portoir du bac II et l’égoutter sur du papier absorbant - Mettre le portoir dans
le bac III (Giemsa dilué au 1/20). Agiter toutes les 2 minutes. Après 20 minutes retirer le portoir du
bac III et l’égoutter sur du papier absorbant - Rincer les lames par agitation douce dans 3 bacs
successifs contenant l’eau tamponné a PH = 7 (2 min / bac) puis Retirer les lames du portoir et
les incliner sur un plan vertical pour les sécher sur du papier absorbant.
Observation microscopique :
Résultats de l’observation :
rouges :
Granulocyte arrondie 3lobes Peu coloré nombreuses
Globules neutrophile : violet (rose/jaune petite taille
blancs : fonce clair) et répartition
homogène
-violet très
clair
Granulocyte arrondie 2 lobes Bleu très clair -nombreuses
éosinophile : violets volumineuses
-rouge
orangé
brillant
Granulocyte arrondie Rond - Rose clair peu
basophile : Violet nombreuses
noir -volumineuse
Occupe s -recouvrant
presque le noyau
tout le -violet foncé
volume
de la
cellule
Lymphocyte : arrondie Rond - Très réduit et aucune
Violet bleu clair
noir
Occupe
presque
tout le
volume
de la
cellule
Monocyte : arrondie Irrégulier Gris clair nombreuses
Forme fines -rouge
de fer à
cheval
Brun-
rouge
clair
discoïdes sans Bleu clair très
Plaquettes : nombreuses
et violet
Conclusion :