Université A.

Mira de Béjaia Béjaia, le 22/06/2015

Faculté des Sciences de la Nature et de la Vie
Département de TCSN (2ème année LMD)

Examen de microbiologie (02 heures)

Nom :.......................................................Prénom :................................................... Groupe:................

Exercice N° 1 (09 pts) :

3.5 pts
1 – Une expérience a été réalisée avec Bacillus megaterium (bacille à Gram positif) et Escherichia coli
(coccobacille à Gram négatif), en fin de phase exponentielle de croissance :
Tube 1: B. megaterium + saccharose à 2 mol/l + lysozyme
Tube 2 : B. megaterium + eau distillée + lysozyme
Tube 3 : E. coli + saccharose à 2 mol/l + lysozyme
Tube 4 : E. coli + eau distillée + lysozyme

 Ces tubes sont mis à incuber : 2min à 37°C.

a- Interpréter les résultats obtenus en justifiant vos réponses.
0.5 pts Tube 1 : Le lysozyme hydrolyse le peptidoglycane. En milieu isotonique, les bactéries Gram + forment des protoplastes
0.5 pts Tube 2 : Le lysozyme hydrolyse le peptidoglycane. Dans un milieu hypotonique les bactéries Gram + lysent.
0.5 pts Tube 3 : Le lysozyme hydrolyse le peptidoglycane. En milieu isotonique, les bactéries Gram - forment des sphérotoplastes
0.5 pts Tube 4 : Le lysozyme hydrolyse le peptidoglycane. Dans un milieu hypotonique les bactéries Gram - lysent.

 Par la suite, ces 4 suspensions ont été transférées sur 4 boites de gélose nutritive puis incubées.
b- Interpréter les résultats obtenus en justifiant vos réponse.
0.25 pts Boite 1 : Pas de croissance. En effet, les protoplastes perdent leur capacité à se diviser .
0.25 pts Boite 2 : Pas de croissance. En effet, les bactéries sont lysées.
0.25 pts Boite 3 : Il ya croissance et développement. En effet, les sphéroplastes sont capable de se diviser.
0.25 pts
Boite 4 : Pas de croissance. En effet, les bactéries sont lysées.
 Quel est l’intérêt de cette expérience ?
0.5 pts Mettre en évidence les rôles de la paroi bactérienne.
5.5 pts 2 - La virulence d’une souche sauvage de Bacillus anthracis est due à la présence d’une capsule et à la
production d’exotoxines.

2-1- La souche sauvage de B. anthracis cultivée sur deux milieux différents donne les résultats suivants :

Milieu de culture Observation microscopique

Milieu minimum Bactérie non capsulée
Gélose au sang Bactérie capsulée

a- L’observation microscopique de B. anthracis prélevées de sang humain montre des bactéries

capsulées. Quelle explication peut-on donner ?
0.5 pts Le sang humain constitue un milieu riche favorisant ainsi la formation de la capsule bactérienne.

b- La capsule augmente le pouvoir pathogène de B. anthracis. Expliquer pourquoi.

0.5 pts  Elle s’oppose à la phagocytose en diminuant l’adhésion des bactéries aux macrophages.
0.5 pts  Virulence (empêche la pénétration des antibiotiques........)
2-2- Le traitement d’une infection due à B. anthracis repose sur une antibiothérapie à base de
pénicilline. Donner la cible bactérienne de la pénicilline. (un seul mot clé souligné = réponse complète)
1.0 pts Les protéines liant la pénicilline impliquées dans la synthèse du peptidoglycane des parois bactérienne

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 2- 3- B. anthracis survit dans l'environnement sous forme de spores.

a- Donner un schéma légendé d'une spore bactérienne.

1.5 pts

b- Citer 3 rôles majeurs d'une spore bactérienne.

Résistance à la température, aux radiations ( UV, rayons X), aux désinfectants, aux antiseptiques, aux
1.5 pts antibiotiques, aux températures basses, déshydratation, pression, Carence en éléments nutritifs,
vieillissement. Maintenir la vie cellulaire. Capacité de reprendre la forme végétative.

Exercice N° 2 ( 11 pts) :
3.5 pts 1- Une souche bactérienne X est ensemencée sur un milieu de culture fermé. La cinétique de croissance
cette bactérie est suivie pendant une durée du temps. Cette bactérie se développe à une température
optimale de 37°C et un pH ≈ 7.0
a- Tracer la courbe de croissance résultante, délimiter et nommer les différentes phases.

2 pts : 0.5
par phase

b- Interpréter les différentes phases da croissance.

1 pts : 0.25 - Phase de latence : Adaptation à un nouveau milieu (nouvelles conditions). Synthèse de nouveaux composants cellulaires.
par phase - Phase exponentielle : Taux de croissance constant et maximal
- Phase stationnaire : Limitation en éléments nutritifs et en oxygène, densité critique, Accumulation de déchets toxiques
- Phase de déclin : Les cellules meurent à un rythme exponentiel, taux de croissance < 0
c- Classer cette bactérie en fonction de sa température et son pH optimaux de croissance.
- Température : Mésophile ; pH : Neutrophile.
0.5 pts : 0.25
par paramètre

2/3
 3 pts 2- L'ajout de la pénicilline à des cultures d’E. coli a donné les valeurs de dénombrement suivantes :

Dilution
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 10-7 10-8
Souche

E. coli (A) Boite 1 ND ND ND ND ND ND 270 31

UFC/ml Boite 2 ND ND ND ND ND ND 256 29
E. coli (B) Boite 1 ND ND 120 15 2 0 0 0
UFC/ml Boite 2 ND ND 98 12 1 0 0 0

ND : bactéries Non Dénombrables

a- Calculer les valeurs de dénombrement pour les deux souches après traitement à la pénicilline
exprimées en UFC/ml.

1 pts : 0. 5 - E. coli (A) : 2.66 x 109 UFC/ml.

par souche
- E. coli (B) : 1.1 x 105 UFC/ml.

b- Calculer le pourcentage de survie (%) des deux souches d'E. coli sachant que la charge bactérienne
de départ pour (A) et (B) sont identiques = 7.3 x 106 UFC/ml = 100% (avant l’ajout de la pénicilline) :

1 pts : 0. 5 - E. coli (A) :36487.67 %.

par souche
- E. coli (B) :1.5 %.

c- Déduire le phénotype des deux souches d'E. coli vis-à-vis de la pénicilline ?

1 pts : 0. 5 - E. coli (A) :Résistante à la pénicilline

par souche
- E. coli (B) : Sensible à la pénicilline

4.5 pts 3- Les deux souches (A et B) sont mélangées et cultivées sur une gélose contenant de la pénicilline.

a- Quel est le moyen possible pour que les deux bactéries puissent se développer en présence de la
pénicilline.
1.5 pts
- Effectuer un transfert de gène de résistance à la pénicilline de la E. coli (A) à E. coli (B) : Conjugaison

b- Citer les différents modes de transfert du matériel génétique chez les bactéries. (3 modes sont
suffisants pour une note complète)

 Conjugaison
3 pts
 Mobilisation
 Transduction
 Transformation. Transposition.............etc.

Bon courage

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