TP 1: Presentation Du Laboratoire de Microbiologie .: (Tapez Le Sous-Titre Du Document)
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Tp 1 : presentation du
laboratoire de
microbiologie .
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Préparer par :
Rachid Imen
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1. Introduction :
Microbiologie domaine d’etudes s’interessant aux organismes de taille microscopique , en
particulier aux bacteries , aux protozoaire ,aux virus ainsi qu’ a certains champignons
(levures) et algues unicellulaires de petite taille .
2. L’objectif :
Se familiariser avec un laboratoire de microbiologie , son équipement et son fonctionnement
3.1.Le laboratoire :
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3.2. Présentation d'un poste de travail :
- Matériels (bec bunsen, pipettes, verres, béchers anse, pinces lame,...),
- Produits (eau, alcool, colorants divers,….)
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3.2.1.Le gros matériel : (principe et mise en marche).
Autoclave, (Stérilisation à chaleur humide).
Etuve, (Incubation).
Hotte bactériologique, (Stérilisation à UV et manipulation).
Microscope, (Observation).
Four Pasteur, (Stérilisation à chaleur sèche).
Bain-marie, (Maintien en surfusion les milieux et incubation).
Réfrigérateur, (Conservation).
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Figure : materiels de laboratoire
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5.La stérilisation :
La stérilisation est l'opération qui consiste à éliminer les micro-organismes d'un objet, et ce de
manière durable. En microbiologie, le but de la stérilisation est d'une part de maîtriser les
micro-organismes introduits dans le milieu d'étude, et d'autre part d'éviter la contamination du
milieu extérieur et des personnes. Il existe deux grands moyens de Stérilisation :
1. La chaleur
2. La filtration
b. Four pasteur : C'est un four-étuve à air chaud et sec. Il est utilisé à 180°C pendant 90
minutes. Cet appareil n'est utilisé que pour la stérilisation de la verrerie préalablement
nettoyée et séchée ou de matériels métalliques (instruments de dissection) pouvant tolérer de
très hautes températures.
Le matériel ainsi stérilisé sera laissé dans l’étuve jusqu’à son refroidissement complet, puis
stocké à l’abri des poussières.
5.1.2. Chaleur humide : La stérilisation par la chaleur humide, reconnaît trois modalités - la
stérilisation à l’autoclave :
- La Pasteurisation,
- La Tyndallisation
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b. Pasteurisation : la pasteurisation est un traitement à chaud de liquides, tuant des
pathogènes mais pas forcément toutes les bactéries. Les températures de la pasteurisation se
situent entre 75 à 80°C. c. Tyndallisation : La tyndallisation est une série de 3 chauffages
brefs à des températures de 70°C à intervalles réguliers, ceci afin de laisser aux formes
résistantes la possibilité de germer pour les tuer au chauffage suivant. Par exemple la
destruction des pathogènes du lait se fait par un cycle de 63°C pendant 30 minutes suivie de
73°C pendant 15 minutes.
6. La filtration :
La filtration est une technique qui consiste à faire passer un liquide à travers un filtre dont les
pores ont un diamètre de 0,2 μm. Les micro-organismes sont trop gros et sont donc retenus
par le filtre. Cette technique est intéressante lors d'utilisation de produits thermolabiles
comme certains acides aminés aromatiques, vitamines, hormones de croissance, acides
nucléiques et une bonne partie des antibiotiques.
7.1. Radiations : La stérilisation par les U.V. est utilisée au laboratoire pour la
décontamination de l’air et des paillasses situées sous la hotte de protection. Le rayonnement
n’agit que de façon directe et sa pénétration est faible. D’autres radiations (rayons X), peuvent
servir pour la stérilisation industrielle des boites de Pétri en matière plastique et de produit
pharmaceutiques.
7. 2. Agents chimiques : Ils sont utilisés en général pour la désinfection des salles de
travail et pour la destruction des germes portés par des instruments souillés. Ce mode de
stérilisation doit être systématiquement pratiqué dans le laboratoire pour les lames et pour la
verrerie qui ne passe pas en autoclave
8.Conclusion :
Le laboratoire microbiologie c’est un lieux de recherche scientifique autant devoir
conditionnement labo par toute les matériels essentiel de la recherche du microbiologiste afin
simplification leur travail.
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Sommaire
1. Introduction : ..................................................................................................................................2
2. L’objectif : ......................................................................................................................................2
3.Visite des locaux ..............................................................................................................................2
3.1.Le laboratoire : ..........................................................................................................................2
3.2. Présentation d'un poste de travail : ..........................................................................................3
3.2.1.Le gros matériel :....................................................................................................................4
3.2.2. Poste de travail :....................................................................................................................4
4. Les consignes de sécurité : ..............................................................................................................5
5.La stérilisation : ................................................................................................................................6
5.1. La stérilisation par la chaleur : ..................................................................................................6
5.1.1. Chaleur sèche : ......................................................................................................................6
5.1.2. Chaleur humide : ...............................................................................................................6
6. La filtration : ...................................................................................................................................7
7. Autres procédés de stérilisation : ....................................................................................................7
7.1. Radiations : ..............................................................................................................................7
7. 2. Agents chimiques : ..................................................................................................................7
8.Conclusion : .....................................................................................................................................7