Phase Pré-Analytique en Hématologie - RAHALI FZ
Phase Pré-Analytique en Hématologie - RAHALI FZ
hématologie
- pH du plasma anticoagulé :
o 7,3 < pH < 7,45
Ordre des tubes :
Tubes d’hémostase : 2ième position
Homogénéisation :
- Immédiate par retournements lents (3 à 4 fois)
III- Identification
- Au moment du prélèvement + Préciser l’identité et l’heure du prélèvement
Place du tube 2ème après tube de purge 1er tube Après tube sec avec
ou après hémoculture activateur ou autre
anticoagulant
Conservation des -70°C tube non - 20°C , < 15 jours > - 20°C
échantillons congelés mouillable ; bouchon à
vis
Âge :
- Modification physiologique de nombreux paramètres entre
l’enfance et l’adolescence
- Nouveau-né :
o Hg : jusqu’à 20 g/dl
o VGM : jusqu’à 120 fl
o GB : 30 G/L
- Lymphocytose physiologique :
o Nourrisson : jusqu’à 16,5 G/L
o Entre 2 et 4 ans : 9,5 G/L
- Prématuré :
o Érythroblastes circulants associés à une myélémie équilibrée
- Nouveau-né :
o Érythroblastes circulants
o Nombre modéré d’anomalies morphologiques des GR : schizocytes,
corps de Jolly
- Nourrisson :
o Variations morphologiques des lymphocytes normaux circulants en
dehors de toute infection virale : hématogones
Facteurs pouvant modifier la NFS :
- En post prandial, effort physique, situation de stress, grossesse
Polynucléose neutrophile physiologique
- Séjour prolongé en altitude : Polyglobulie secondaire
- Origine ethnique : race noire (neutropénie ethnique)
ATCDs personnels :
- Hémopathie connue, Maladie de système, IR, IHC, atteinte thyroïdienne
- Habitudes toxiques : tabagisme , alcoolisme
- Prise médicamenteuse : chimiothérapie anticancéreuse …
- ATCDs chirurgicaux : splénectomie
Degrés d’urgence
II- Prélèvement
Patient à jeûn depuis plus de 8h, sauf si urgence
Choix du tube :
- Anticoagulant de référence pour l’hémogramme :
o EDTA (acide éthylène diamine tétra-acétique)
o Adapté à l’hématologie cellulaire
o Inconvénient : agrégation plaquettaire liée à l’EDTA
o Sous forme de sel di ou tri-potassique (K₂ ou K₃ EDTA)
o Le conseil international pour la standardisation en hématologie
recommande le K₂ EDTA
- De préférence : tube en verre siliconé ou en plastique
- Sous vide
- Attention à la date de péremption
- Respect des conditions de stockage (T° ambiante autour de 20°C,
absence d’exposition à la lumière)
Site de ponction :
- Ponction veineuse franche au pli du coude
- Prélever du côté opposé d’une perfusion (dilution du prélèvement)
Garrot :
- Peu serré
- Durée de pose < 1 min
- Desserrer dès que le sang commence à arriver dans le tube
Remplissage des tubes :
- Jusqu’au niveau du remplissage
- Le tube EDTA ne doit pas être trop rempli : volume d’air doit
représenter au moins 20% du volume du tube
Ordre des tubes :
- Tube EDTA : parmi les derniers tubes après les tubes citratés, secs et
héparinés.
Homogénéisation :
- Immédiate par retournements successifs lents (10 fois)
III- Identification
- Au moment du prélèvement
- Préciser l’identité et l’heure du prélèvement
Délai avant l’analyse NFS : <12h NFS : 12-24h NFS : > 24h
Frottis : < 6h Frottis : 6-12h Frottis : > 12h
Réticulocytes : < 24h Réticulocytes > 24 h
Frottis sanguin Identification des lames Coloration non Étalement > 12h
Étalement dans les 6 h standardisée Séchage accéléré
Séchage : air libre Colorant périmé
Coloration MGG
Phase pré-analytique en
cytologie médullaire
I- Renseignements
Identité
Âge : Variation de la formule médullaire avec l’âge
ATCDs : Pathologie chronique, hémopathie connue
Prise médicamenteuse
Examens complémentaires réalisés
Indication du myélogramme
Symptomatologie : Sd d’insuffisance médullaire, Sd tumoral, Sd
infiltratif …
Un prélèvement sur tube EDTA doit systématiquement être associé à
la demande du myélogramme (NFS, Réticulocytes, Frottis sanguin)
Prescripteur et ses coordonnés
II- Réalisation du myélogramme
Patient rassuré, installé confortablement
Préleveur : médecin formé et habile
En lieu médicalisé
Éliminer une contre-indication :
o ATCD de sternotomie (ponction sternale)
o Radiothérapie localisée en regard du site de ponction médullaire
o Lésion cutanée majeure
o Situation à risque : thrombopénie ou TTT anticoagulant précaution :
compression prolongée après le geste
1) Ponction médullaire et étalement :
Matériel :
o Trocart de type Mallarmé auquel est adapté une
seringue de diamètre et longueur variables (âge,
site de ponction)
o Seringue : de 10 à 20 ml, non anticoagulée
o Champ et compresses stériles
o Lames : en verre, dégraissées, à bords rodés à 45°
Site de ponction :
o Sternale (adulte)
o épine iliaque postérieure (enfant ou CI à la
ponction sternale)
Geste :
o Asepsie et analgésie
o Ponction médullaire : prélever un faible volume du suc
médullaire (ne pas provoquer de dilution)
o Réaliser rapidement les étalements de moelle sur lames
(éviter la coagulation du suc médullaire) : 5 à 10 frottis
o Identifier les lames, laisser sécher à l’air libre
o Prélèvement sur EDTA (immunophénotypage, caryotype)
o Surveiller le patient après le geste
Étalement de bonne qualité du myélogramme :
- Frottis médullaire régulier avec des franges
- Non coagulé , Non dilué
- Présence de grumeaux
- Non réalisé sur la partie dépolie de la lame
• Étalements de moelle défectueux :
Transport:
- Après séchage complet à l’air libre
- Boîtes porte lames étiquetées
2) Coloration :
Coloration par MGG classique (idem coloration frottis sanguin)
Choisir 2 à 3 frottis médullaires pour coloration (étalement
homogène + présence de grumeaux)
Conservation des lames non colorées pour coloration cytochimique
éventuelle ou nouvelle coloration MGG (jusqu’à 10 ans de
conservation).
Phase pré-analytique en
immunohématologie
I- Renseignements
Identité
Âge, sexe
ATCDs transfusionnels, incidents transfusionnels
Grossesse en cours, accouchement
Injection récente d’immunoglobuline anti-D
Symptomatologie : syndrome hémorragique, syndrome anémique
Degrés d’urgence
II- Prélèvement