Prompt Inoculation System-D-3251-3000 PDF
Prompt Inoculation System-D-3251-3000 PDF
03/2015
3251-3000A
3251-3000A
PromptTM* Inoculation System-D
For Use with Microdilution
Susceptibility Tests
suspended by shaking the bottle. The bacterial
Intended Use
suspension is stable for four hours. When the
The Prompt Inoculation System-D is used to
Prompt Inoculation System-D is used within four
standardize inocula for microdilution antimicrobial
hours after preparation, 97% of MICs are within ±
susceptibility tests.
one (1) dilution of the MICs determined by the
Summary conventional method.
The microdilution procedure for antimicrobial The Prompt Inoculation System-D facilitates the
susceptibility testing has provided the clinical MIC inoculum preparation by eliminating: 1) the
microbiologist with a reliable method for obtaining incubation period, and 2) the need to adjust the
meaningful quantitative susceptibility test results. inoculum concentration.
This procedure is used to determine the minimum
Suspending Solution
inhibitory concentration (MIC) of antimicrobial agents
Prompt Inoculation System-D catalog number
and has rapidly gained broad acceptance in the
B1026-10D contains 30 ml (± 1.0 ml) of stabilized,
clinical laboratory.1 Accuracy and reproducibility in
aqueous PLURONIC** surfactants.
the MIC procedure depend on use of defined
materials and methods. Warnings and Precautions
One of the important requirements in the MIC 1. For in vitro diagnostic use only.
procedure is control of the bacterial population of the 2. Colonies must be selected from a FRESH culture
inoculum within defined limits. This step may be plate (< 24 hours).
accomplished in two ways: 3. The bacterial suspension should be used within
1) manual adjustment of the inoculum to match a 0.5 four hours of preparation.
McFarland turbidity standard2 followed by 4. DO NOT FLAME the plastic inoculation wand
appropriate dilution or under ANY circumstances.
2) incubation to stationary phase in broth culture3 5. To avoid contamination, keep fingers above the
followed by appropriate dilution. ridge of the stopper and on the outer surface of
The Prompt Inoculation System-D provides the the collar.
microbiologist with a method for obtaining 6. Keep wands covered when not in use.
standardized inocula while eliminating the need for 7. Do not use if colonies are smaller than the wand
incubation and turbidity adjustment.4,5,6,7 tip.
Microdilution susceptibility results obtained using NOTE:
the Prompt Inoculation System-D show a correlation After inoculation, the Prompt inoculation vial,
of 97% or greater with the microdilution wand and collar should be considered potential
susceptibility results obtained with inocula prepared pathogen carriers. Handle and discard the
according to the National Committee on Clinical product accordingly.
Laboratory Standards (NCCLS) procedure.2 Storage
Principles Prompt units should be stored at 2-27°C. Avoid
The Prompt Inoculation System-D consists of an direct light. Do not use units beyond the expiration
inoculation wand and a bottle of diluent. The wand is date shown on the package. Inoculated units may
a polypropylene rod with a breakaway collar that be stored for up to four hours at room temperature.
serves as a wiping mechanism. The rod is attached Product Deterioration
to a stopper. At the tip of the wand is a groove Prompt bottles should not be used if the bottle or
designed to hold a specific number of bacteria. cap is cracked.
Thirty (30) ml of diluent are provided in the plastic
bottle. The wand is touched to several bacterial Specimen Collection and Preparation
colonies on a primary isolation plate, wiped, then Specimens received in the laboratory should be
placed in the plastic bottle. The bacteria are treated in the usual manner for the preparation of a
primary culture plate. Three isolated colonies larger
than the wand tip from an eighteen to twenty-four
*Trademark of 3M Company, St. Paul, MN USA
(18-24) hour culture are needed for use with the
** Registered trademark of BASF Corp., Parsippany, NJ USA
Prompt Inoculation System-D.
3251-3000A 1-1
Procedure
Materials Provided
62 Prompt inoculation wands
60 Prompt inoculation bottles
Prompt Inoculation System-D can be used for
preparation of inocula for microdilution MIC testing
procedures that use the inoculum suspended in a
non-nutritive solution to rehydrate the tray. To use,
follow the instructions below:
A. Preparation of bacterial suspension
1. Remove the required number of Prompt
inoculation bottles from the box.
2. Remove an inoculation wand from the box.
3. Holding the wand tip perpendicular to the agar
surface, touch 3 isolated colonies as large as or
Figure 1-2
larger than the tip. Do not penetrate the agar.
Do not scrape or drag the tip across the
colonies (Figure 1-1). 5. Slide the collar slowly down and off the wand
shaft and discard the collar (Figure 1-3).
6. While holding the inoculation wand with one
hand, pick up a Prompt inoculation bottle.
Figure 1-1
E-0822B
Figure 1-4
1-2 3251-3000A
8. Place the inoculation wand into the bottle and
press down with a twisting motion to assure a
tight seal (Figure 1-5).
Figure 1-7
3251-3000A 1-3
Expected Results References
When used according to directions the Prompt 1. Gerlach, E.H. in Current Techniques for Antibiotic
Inoculation System-D will provide the proper Susceptibility Testing, A. Balows, ed. (Charles C.
inoculum for the microdilution MIC test for most Thomas, Publisher, Springfield, Illinois) 1974. pp.
clinical isolates. MIC results obtained with inocula 63-76.
prepared with the Prompt Inoculation System-D 2. National Committee for Clinical Laboratory
show greater than 97% agreement with MIC results Standards 2000. NCCLS approved Standard
obtained with inocula prepared according to the M7-A5: Methods for Dilution Antimicrobial
NCCLS procedure.2 Susceptibility Tests for Bacteria that Grow
Specific Performance Characteristics Aerobically. National Committee for Clinical
Microdilution susceptibility results obtained with Laboratory Standards, 771 E. Lancaster Ave.,
inocula prepared by the Prompt system were Villanova, PA. 19085.
3. Barry, A.L., F. Garcia, and L.D. Thrupp. 1970. An
compared to the results obtained with inocula improved single-disc method for testing the
prepared according to the NCCLS procedure.2 Nine antibiotic susceptibility of rapidly-growing
hundred sixteen isolates were tested on MicroScan pathogens, Am. J. Clin. Path. 53:49-158.
dried conventional panels. Testing was performed at
4. Wicks, J.H., R.L. Nelson, and G.E. Krejcarek.
two sites, using both MicroScan instrumentation
and manual verification. 1981; A rapid inoculum standardization system:
a novel device for standardization of inocula in
Inocula were prepared according to the Prompt antimicrobial susceptibility testing. J. Clin.
Inoculation System-D and the NCCLS procedure. Microbiol. 17:1114-1119.
The mean inoculum density for 100 organisms
5. Baker, C.N., C. Thornsberry, and R.W. Hawkinson.
counted immediately after inoculum preparation
1983. Inoculum standardization in antimicrobial
was 6.9 x 105 cfu/ml. The overall percent of results
susceptibility testing: evaluation of overnight agar
within +/- 1 dilution was 97%. The MICs for P.
cultures and the rapid inoculum standardization
aeruginosa obtained with aminoglycosides (e.g.
system. J. Clin. Microbiol. 17:450-457.
amikacin, gentamicin, tobramycin) with Prompt are
97.5% essential agreement (MICs within +/- 1 6. Lund, M.E. and R.W. Hawkinson. 1983.
dilution of MICs obtained with the NCCLS method). Evaluation of the Prompt Inoculation System
Additional drug-specific performance data is on file. for preparation of standardized bacterial inocula.
J. Clin. Microbiol. 18:84-91.
The penicillin and ampicillin MICs for some
β-lactamase-producing staphylococci are extremely 7. Barry, A.L., R.E. Badal, and R. W. Hawkinson.
inoculum dependent. S.aureus ATCC 29213 is one of 1983. Influence of inoculum growth phase on
these organisms. Penicillin and ampicillin results microdilution susceptibility tests. J. Clin.
should be considered to be in control if this quality Microbiol. 18:645-651.
control strain shows any penicillin MIC≥0.25 µg/ml 8. Flejzor, B. and V.D. Bokkenheuser. 1985.
and any ampicillin MIC≥ 0.5 µg/ml (i.e., no upper Performance of the Prompt System in
limit should be applied to these control ranges). identification and antimicrobial susceptibility
When discrepancies for penicillin and ampicillin testing of clinical isolates. J. Clin. Microbiol.
were seen between the Prompt system and 21:267-268.
standard-method tests (Table 1-1), the organisms Warranty Statement
involved were β-lactamase producers. All observed These products are warranted to perform as
discrepant MICs would be interpeted as resistant described in their labeling and MicroScan literature
(MIC 0.25 µg/ml for penicillin). The Prompt system when used in accordance with their instructions.
MICs were invariably higher than the standard THERE ARE NO WARRANTIES WHICH EXTEND
MICs, better indicating the resistant nature of the BEYOND THIS EXPRESS WARRANTY AND BECKMAN
bacteria. This phenomenon has also been noted by COULTER DISCLAIMS ANY IMPLIED WARRANTY OF
Flejzor and Bokkenheuser.8 A similar phenomenon MERCHANTABILITY OR WARRANTY OF FITNESS
was also noted with methicillin-resistant FOR PARTICULAR PURPOSE. The sole obligation of
staphylococci and the penicillinase-resistant Beckman Coulter and the purchaser's exclusive
penicillins. remedy for breach of this warranty shall be, at the
Staphylococci colony counts may be elevated with option of Beckman Coulter to repair or replace the
the Prompt method and may be greater than the products. In no event shall Beckman Coulter be liable
NCCLS expected range. Elevated colony counts for any proximate, incidental or consequential
may adversely affect antibiotic results that are damages in connection with the products.
affected by inoculum. Refer to the Limitations
section for antimicrobials which are known to be
inoculum dependent.
1-4 3251-3000A
Système d’inoculation Prompt™* D
Utilisé pour les Tests de
Sensibilité en Microdilution
Utilisation est stable pendant 4 heures. Lorsque le système
Le Système d’inoculation Prompt™ D est utilisé pour Prompt est utilisé dans les 4 heures après la
standardiser l’inoculum pour les tests de sensibilité préparation, 97% des CMI sont conformes à une
aux antibiotiques. dilution près aux résultats obtenus avec la méthode
conventionnelle.
Résumé
La procédure de microdilution pour la détermination de Le système Prompt facilite la préparation de
la sensibilité aux antibiotiques fournit au l’inoculum pour les CMI en éliminant les phases
microbiologiste une méthode sûre pour l’obtention de suivantes : 1) période d’incubation, et 2) ajustement
résultats quantitatifs des tests de sensibilité. de la concentration de l’inoculum.
Cette procédure est utilisée pour déterminer la Solution de Suspension
concentration minimale inhibitrice (CMI) des Le système Prompt (B1026-10D) contient 30 ml ±1
antibiotiques et a rapidement gagné la confiance des ml de solution stabilisée aqueuse avec du
laboratoires de biologie clinique1. La précision et la PLURONIC**.
reproductibilité de la détermination de la CMI sont Précautions
variables en fonction de la méthode et du matériel 1. Usage diagnostic in vitro seulement .
utilisés.
2. Les colonies doivent être prélevées sur une culture
Une des exigences importantes dans la procédure de fraîche (< 24 heures).
détermination de la CMI est le contrôle de la
population bactérienne dans l’inoculum. Celui-ci peut 3. La suspension doit être utilisée dans les 4 heures
être effectué en deux étapes 1) ajustement manuel de suivant la préparation.
la turbidité2 jusqu’à 0,5 McFarland suivi d’une dilution 4. Ne pas enflammer le système d’inoculation du
appropriée 2) Incubation en phase stationnaire dans Prompt.
un milieu de culture3 approprié. 5. Afin d’éviter les contaminations, ne pas mettre les
Le Système d’inoculation Prompt™ D fournit au doigts sur la pointe calibrée, qui sera ensuite en
microbiologiste une méthode pour obtenir un inoculum contact avec la solution. Ne mettre les doigts que
directement standardisé tout en supprimant sur la surface externe du collier.
l’incubation et l’ajustement de la turbidité.4,5,6,7 Les 6. Garder le coffret de pointes calibrées fermé.
résultats des tests de sensibilité obtenus avec le 7. Ne pas utiliser le système Prompt si les colonies
système d’inoculation Prompt montrent une sont plus petites que l’extrémité de la pointe
corrélation de 97% ou plus par rapport aux résultats calibrée.
obtenus avec une préparation qui suit les procédures
NCCLS2. Remarque : après ensemencement, le flacon
d’inoculation Prompt, la pointe calibrée ainsi que
Principes le collier doivent être considérés comme
Le système d’inoculation Prompt est composé d’une potentiellement pathogènes. Manipuler et éliminer
pointe calibrée et d’un flacon de diluant. La pointe ces produits de la manière appropriée.
calibrée est en polypropylène surmontée d’un collier, Conservation
mécanisme qui permet l’élimination du surplus. A Le Prompt doit être conservé à la température
l’extrémité de la pointe calibrée il y a une rainure qui ambiante (2-27°C). Eviter la lumière directe. Ne plus
permet de prélever un nombre précis de bactéries. Le utiliser après la date d’expiration notée sur
flacon en plastique contient 30 ml de diluant. Pour l’emballage. Les unités inoculées peuvent être
prélever les colonies, piquer plusieurs colonies isolées conservées pendant quatre heures à la température
sur la boîte, enlever le collier, puis placer la pointe ambiante.
calibrée dans le flacon de diluant. Mettre les bactéries
en suspension en mélangeant le flacon. La suspension Détérioration du Produit
Le Prompt ne doit pas être utilisé si le flacon ou le
bouchon sont abîmés.
3251-3000A 2-1
Préparation de l’Echantillon
Les échantillons reçus au laboratoire doivent être
préparés pour obtenir un premier isolement, incuber
ensuite pendant 18-24 heures. Il est nécessaire d’avoir
3 colonies bien isolées, plus larges que l’extrémité de la
pointe calibrée pour pouvoir utiliser le système
d’inoculation du Prompt.
Procédure
Matériel fourni
62 pointes calibrées Prompt
60 Flacons d’inoculation Prompt
Le Système d’inoculation Prompt™ D est utilisé pour la
préparation des inoculums en solution non nutritive
Ces inoculums seront utilisés pour la réhydratation des
puits et pour la recherche de CMI en microméthode.
Suivre les instructions ci-dessous:
Figure 3-2
A. Préparation de la suspension bactérienne
1. Retirer le nombre nécessaire de flacons Prompt 5. Faire glisser le collier doucement afin de
du coffret l’enlever de la pointe calibrée et jeter le collier
2. Retirer une pointe calibrée de la boîte (Figure 3-3).
3. Tenir la pointe calibrée perpendiculaire à la
surface de la gélose. Piquer 3 colonies aussi
larges ou plus larges que l’extrémité de la pointe
calibrée. Ne pas pénétrer dans la gélose. Ne pas
racler les colonies. (Figure 3-1)
Figure 3-3
6. Prendre une bouteille d’inoculation Prompt.
7. Tordre le haut de la bouteille jusqu’à la rupture
(Figure 3-4).
Figure 3-1
Remarques : Pour les petites colonies,
poursuivre l’incubation jusqu’à l’obtention du
diamètre requis par la pointe calibrée. Si la
colonie n’atteint pas cette taille (exemple pour
certains Streptocoques), utiliser alors une autre
méthode pour l’ensemencement.
4. Tenir la pointe calibrée d’une main et détacher
le collier à l’aide de l’autre main en tirant
fermement pour casser la connexion entre le
collier et la pointe calibrée. Ne pas tordre ou
courber la pointe. Garder la pointe en direction
du sol et à distance. (Figure 3-2)
E-0822B
Figure 3-4
2-2 3251-3000A
8. Placer la pointe calibrée dans la bouteille et bien
l’enfoncer (Figure 3-5).
Figure 3-7
3251-3000A 2-3
3. Des CMI élevées ont été obtenues avec le système S. aureus ATCC 29213 fait partie de ces souches.
Prompt pour les fluoroquinolones Les résultats de la pénicilline et de l’ampicilline
(ex. : gatifloxacine), les lincosamides doivent être considérés comme corrects si la souche
(ex. : clindamycine) et les macrolides de Contrôle de Qualité montre une
(ex. : érythromycine) vis-à-vis des staphylocoques CMI > 0.25µg/ml pour la pénicilline avec et une CMI
comparativement aux valeurs données par la > 0,5µg/ml pour l’ampicilline. Lorsqu’une différence
méthode de référence. La concentration de est observée entre le système Prompt et la méthode
l’inoculum est déterminante dans ces combinaisons standard pour la pénicilline et l’ampicilline (tableau
microorganisme/antibiotique. En cas de résultat 1), les bactéries impliquées sont productrices de
intermédiaire ou de diagnostic de résistance avec le béta-lactamase. En fait toute discordance sur la
système Prompt, utiliser une autre méthode de test valeur de la CMI doit faire considérer le germe
de sensibilité (ex. : turbidité avec des concentrations comme résistant (CMI à 0,25µg/ml pour la
différentes des points critiques) avant de rapporter pénicilline). Le système d’inoculation Prompt donne
les résultats. des CMI plus élevées que les CMI obtenues avec une
méthode standard et procure un bon indicateur de la
Résultats Attendus
résistance de la souche. Ce phénomène a également
L’utilisation du système d’inoculation Prompt™ D
été noté avec la résistance à la méthicilline des
fournira une méthode correcte de détermination de la
staphylocoques et avec la résistance à la pénicilline.
CMI pour la plupart des bactéries. Les résultats de
CMI obtenus avec l’inoculum préparé à l’aide du La numération des colonies de staphylocoques avec
système d’inoculation D Renok montrent 97% de la méthode Prompt peut aboutir à des valeurs
concordance par rapport aux résultats obtenus supérieures aux limites prévues par la NCCLS. Des
suivant la procédure NCCLS2. numérations de colonies élevées ont une incidence
contraire sur les antibiogrammes sensibles à la
Performances Spécifiques concentration de l’inoculum. Consulter la section
Les résultats des tests de sensibilité obtenus avec le «Limites» pour plus d’informations sur les
système Prompt ont été comparés à la procédure antibiotiques connus pour être sensibles à la
recommandée par la NCCLS.2 916 colonies ont été concentration de l’inoculum.
testées sur les plaques conventionnelles déshydratées.
Conditions de Garantie
Les tests ont été effectués sur 2 sites utilisant la
Ces produits sont garantis pour se comporter
méthode MicroScan et la méthode manuelle comme
comme décrit dans leur notice et la documentation
méthode de vérification.
MicroScan lorsqu'ils sont utilisés selon les
Lorsqu’il est préparé avec la méthode Prompt,
instructions fournies avec chaque produit. IL
l’inoculum contient 6,9 x105 CFU/ml. Le pourcentage
N'EXISTE AUCUNE GARANTIE PROLONGEANT LA
total de concordance est de 97% (à plus ou moins une
PRESENTE GARANTIE EXPLICITE ET BECKMAN
dilution). Les CMI des aminosides (c-à-d. amikacine,
COULTER REJETTE TOUTE GARANTIE IMPLICITE
gentamicine et tobramycine) pour le P. aeruginosa
D'ADAPTATION OU D'ADEQUATION A UN BUT
obtenues par inoculation avec le système Prompt
PARTICULIER. La seule obligation de Beckman
étaient concordantes à 97,5% (CMI à plus ou moins
Coulter et le seul recours de l'acquéreur pour
une dilution). D’autres caractéristiques de
violation de cette garantie consisteront, à la seule
performances spécifiques des antibiotiques sont
discrétion de Beckman Coulter, à réparer ou à
disponibles.
remplacer les produits. Beckman Coulter ne sera en
Les résultats obtenus avec la pénicilline et l’ampicilline aucun cas tenu responsable de tout dommage
en ce qui concerne les Staphylocoques producteurs de immédiat, fortuit ou indirect relativement aux
béta-lactamase sont dépendants de l’inoculum. produits.
2-4 3251-3000A
Sistema di inoculo Prompt™* D da
utilizzare per i test di sensibilità in
microdiluizione
flacone in plastica sono presenti trenta (30) ml di
Uso previsto
diluente. Il puntale viene messo a contatto con alcune
Il sistema Prompt D è utilizzato per standardizzare
colonie batteriche su una piastra di isolamento
gli inoculi nei test di sensibilità agli antimicrobici in
primario, si rimuove il collare e si inserisce nel
microdiluizione.
flacone tappandolo.
Riassunto I batteri vengono sospesi agitando il flacone. La
La procedura in microdiluizione per i test di sensibilità sospensione batterica rimane stabile per quattro
agli antimicrobici fornisce ai microbiologi un metodo ore. Se il sistema di inoculo Prompt D viene
affidabile per ottenere risultati quantitativi significativi. utilizzato entro quattro ore dalla preparazione, il
Questa procedura viene utilizzata per determinare la 97% delle MIC sono entro ± uno (1) fattore di
minima concentrazione inibente (MIC) degli diluizione delle MIC determinate con il metodo
antimicrobici ed è stata rapidamente accettata nei convenzionale.
laboratori clinici.1 La precisione e la riproducibilità della Il sistema di Inoculo Prompt D semplifica la
procedura MIC dipendono dall'uso di materiali e di preparazione degli inoculi MIC poiché elimina: 1) il
metodi ben definiti. periodo di incubazione e 2) la necessità di dover
Uno dei requisiti fondamentali della procedura MIC è aggiustare la concentrazione degli inoculi.
il contenimento entro limiti stabiliti della popolazione
Sospensione della soluzione
batterica dell'inoculo. Questa fase può essere
Il sistema di Inoculo Prompt D, numero di catalogo
realizzata in due modi:
B1026-10D contiene 30 ml (± 1,0 ml) di soluzione
1) modifica manuale dell'inoculo fino a che non acquosa stabilizzata di tensioattivo PLURONIC**.
corrisponda allo standard 0,5 di torbidità
McFarland2 seguito da una corretta diluizione, Avvertenze e precauzioni d'uso
oppure 1. Solo per uso diagnostico in vitro
2) incubazione fino alla fase stazionaria in coltura di 2. Le colonie devono essere selezionate da una
brodo3 seguita da corretta diluizione. piastra di coltura FRESCA (< 24 ore).
Il sistema di inoculo Prompt D offre al 3. La sospensione batterica deve essere utilizzata
microbiologo un metodo per ottenere inoculi entro quattro ore dalla preparazione.
standardizzati eliminando la necessità di effettuare 4. NON PASSARE MAI SU FIAMMA PER ALCUN
modifiche basate su incubazione e torbidità.4,5,6,7 I MOTIVO il puntale di inoculo in plastica .
risultati delle sensibilità in microdiluizione ottenuti 5. Per evitare contaminazioni, tenere le dita al di
con il sistema Prompt D correlano almeno al 97% sopra del bordo di chiusura e sulla superficie
con i risultati di test di sensibilità in microdiluizione esterna del collare.
ottenuti con inoculi preparati secondo le procedure 6. Tenere i tamponi coperti quando non si stanno
del NCCLS (National Committee on Clinical usando.
Laboratory Standards - Comitato Nazionale degli 7. Non usare se le colonie sono più piccole della
Standard clinici di laboratorio).2 punta dell'asticella.
Principi Nota:
Il sistema di inoculo Prompt D è composto da un Dopo l'uso, il flacone Prompt, il puntale e il collare
puntale per l'inoculo e da un flacone di diluente. Il sono da considerarsi potenziali portatori di patogeni.
puntale è un'asticella in polipropilene dotata di un Maneggiare e smaltire il prodotto con le opportune
collare rimovibile che permette di eliminare I batteri precauzioni.
adesi ai fianchi dell'asticella. L'impugnatura Conservazione
dell'asticella funge da tappo del flacone di diluente. Le unità del sistema Prompt devono essere
Sulla punta dell'asticella è presente una scanalatura conservate ad una temperatura compresa tra 2 e
necessaria a trattenere un numero specifico di batteri. 27°C. Evitare il contatto con la luce diretta. Non
Nel usare le unità oltre la data di scadenza indicata sulla
confezione. Le unità inoculate possono essere
* Marchio di 3M Company, St. Paul, MN USA conservate fino a quattro ore a temperatura
** Marchio registrato di BASF Corp., Parsippany, NJ USA ambiente.
3251-3000A 3-1
dimensione (come nel caso di alcuni
Deterioramento del prodotto
streptococchi), si deve utilizzare un altro
Il sistema Prompt non deve essere utilizzato se il
metodo per la preparazione dell'inoculo.
flacone o il tampone risultano danneggiati.
Raccolta e preparazione dei campioni 4. Tenendo il puntale per l'impugnatura con una
I campioni che giungono in laboratorio devono essere mano, afferrare il collare con l'altra e tirare
trattati nello stesso modo con cui si procede per la con decisione fino a rompere il collegamento
preparazione di una piastra di coltura primaria. Per tra il collare e lo stelo del puntale. Non torcere
utilizzare il sistema di Inoculo Prompt D sono né piegare il collare. Tenere la punta rivolta
necessarie tre colonie isolate provenienti da una verso il basso, lontano da voi e dalla portata
coltura di diciotto-ventiquattro (18-24) ore; tali colonie di altre persone (figura 1-2).
devono essere più grandi della punta dell'asticella.
Procedura
Materiali forniti
Tamponi per inoculo Prompt
Flaconi per diluizione Prompt
Il sistema di Inoculo Prompt D può essere utilizzato
per la preparazione degli inoculi per i test in
microdiluizione MIC che utilizzano una sospensione
batterica in soluzione non nutritiva per reidratare il
pannello. Seguire le istruzioni per l'uso:
A. Preparazione della sospensione batterica
1. Prelevare dalla confezione la quantità necessaria
di flaconi Prompt.
2. Prelevare dalla confezione un puntale per
l'inoculo.
3. Tenendo il puntale perpendicolare alla superficie
dell'agar, toccare 3 colonie isolate grandi come la
Figura 1-2
punta o più grandi. Non penetrare nell'agar. Non
graffiare né trascinare la punta nelle colonie
(figura 1-1). 5. Far scivolare lentamente il collare verso il
basso, sfilarlo dallo stelo e rimuovere il
collare (figura 1-3).
6. Con il puntale in una mano, con l'altra
prendere un flacone di diluizione.
Figura 1-1
Nota:
Per colonie di dimensioni ridottissime, far Figura 1-3
proseguire l'incubazione della piastra primaria
fino a che le colonie non raggiungono il diametro 7. Piegare il tappo del flacone lateralmente fino a
della punta dell'asticella. Se è improbabile che il che non si spezza (figura 1-4).
diametro della colonia raggiunga questa
3-2 3251-3000A
B. Aggiunta della sospensione nella vaschetta
per la reidratazione
1. Togliere il puntale dal flacone e gettarlo.
2. Versare la sospensione nella vaschetta
premendo con delicatezza il flacone
(figura 1-7).
E-0822B
Figura 1-4
8. Posizionare il puntale di inoculo nel flacone e
premere ruotando per chiuderlo
correttamente (figura 1-5).
Figura 1-7
3251-3000A 3-3
3. Il sistema Prompt ha evidenziato MIC elevate per la penicillina e l'ampicillina che sono state
con i fluorochinoloni (gatifloxacina), osservate tra il sistema Prompt e altri metodi
lincosamidi (clindamicina) e macrolidi standard (tabella 1-1), gli organismi erano produttori
(eritromicina) sugli stafilococchi quando di β-lattamasi. Tutte le MIC discrepanti osservate
comparati con il metodo di referimento. La erano da interpretare come resistenti (MIC 0,25
concentrazione dell'inoculo è critica con questa µg/ml per la penicillina). Le MIC del sistema Prompt
combinazione organismo/antimicrobico. Se erano costantemente superiori alle MIC ottenute con i
utilizzando il sistema Prompt con questi metodi standard, indicando in modo più chiaro la
organisimi/antimicrobici si ottengono natura resistente dei batteri. Questo fenomeno è stato
interpretazioni di intermedio o resistente, si notato anche da Flejzor e Bokkenheuser.8 Un
deve utilizzare un metodo alternativo. fenomeno simile è stato anche rilevato con gli
stafilococchi resistenti alla meticillina e con le
Risultati previsti
penicilline resistenti alla penicillinasi.
Se il sistema Prompt D viene usato seguendo le
Con gli stafilococchi la carica batterica ottenuta con il
istruzioni, esso fornirà l'inoculo appropriato per il
sistema Prompt, può essere più elevata rispetto
test in microdiluizione MIC per la maggior parte
all’intervallo NCCLS atteso.
degli isolati clinici. I risultati MIC ottenuti con inoculi
preparati con il sistema Prompt D presentano una Bibliografia
corrispondenza del 97% con i risultati di MIC 1. Gerlach, E.H. in Current Techniques for Antibiotic
ottenuti con inoculi preparati secondo la procedura Susceptibility Testing, A. Balows, ed. (Charles C.
NCCLS.2 Thomas, Publisher, Springfield, Illinois) 1974. pp.
63-76.
Caratteristiche particolari di prestazione
2. National Committee for Clinical Laboratory
I risultati delle sensibilità in microdiluizione ottenuti
Standards 2000. NCCLS approved Standard M7-
con inoculi preparati con il sistema Prompt sono
A5: Methods for Dilution Antimicrobial
stati confrontati con i risultati ottenuti con inoculi
Susceptibility Tests for Bacteria that Grow
preparati secondo la procedura NCCLS.2
Aerobically. National Committee for Clinical
Novecentosedici isolati sono stati esaminati su
Laboratory Standards, 771 E. Lancaster Ave.,
pannelli convenzionali essiccati MicroScan.
Villanova, PA. 19085.
L'esame è stato svolto in due laboratori, usando
3. Barry, A.L., F. Garcia, and L.D. Thrupp. 1970. An
sia la strumentazione MicroScan che la verifica
improved single-disc method for testing the
manuale.
antibiotic susceptibility of rapidly-growing
Gli inoculi sono stati preparati con il sistema
pathogens, Am. J. Clin. Path. 53:49-158.
Prompt D e secondo la procedura NCCLS. La
4. Wicks, J.H., R.L. Nelson, and G.E. Krejcarek.
densità media degli inoculi per 100 organismi
1981; A rapid inoculum standardization system:
contati subito dopo la preparazione degli inoculi è
a novel device for standardization of inocula in
stata di 6,9 x 105 cfu/ml. La percentuale
antimicrobial susceptibility testing. J. Clin.
complessiva dei risultati entro +/-1 diluizione è
Microbiol. 17:1114-1119.
stata del 97%. Le MIC per P. aeruginosa ottenute
5. Baker, C.N., C. Thornsberry, and R.W.
con aminoglicosidi (ad esempio amikacina,
Hawkinson. 1983. Inoculum standardization in
gentamicina, tobramicina) utilizzando il sistema il
antimicrobial susceptibility testing: evaluation of
Prompt concordano al 97,5% (MIC entro +/-1
overnight agar cultures and the rapid inoculum
diluizione rispetto al metodo NCCLS). Sono
standardization system. J. Clin. Microbiol.
disponibili ulteriori informazioni relative a specifici
17:450-457.
antibiotici
6. Lund, M.E. and R.W. Hawkinson. 1983.
Le MIC per la penicillina e l'ampicillina di alcuni
Evaluation of the Prompt Inoculation System for
stafilococchi produttori di β-lattamasi sono
preparation of standardized bacterial inocula. J.
estremamente dipendenti dall'inoculo. Lo S. aureus
Clin. Microbiol. 18:84-91.
ATCC 29213 è uno di questi organismi. I risultati per
7. Barry, A.L., R.E. Badal, and R. W. Hawkinson.
la penicillina e l'ampicillina vanno considerati sotto
1983. Influence of inoculum growth phase on
controllo se questo ceppo nel controllo di qualità
microdilution susceptibility tests. J. Clin.
mostra un valore della MIC ≥0,25 µg/ml per
Microbiol. 18:645-651.
penicillina e ≥ 0.5 µg/ml per l'ampicillina (ovvero
8. Flejzor, B. and V.D. Bokkenheuser. 1985.
non vi sono limiti superiori da applicare a questi
Performance of the Prompt System in
intervalli di controllo). Nelle discrepanze
identification and antimicrobial susceptibility
testing of clinical isolates. J. Clin. Microbiol.
21:267-268.
3-4 3251-3000A
UTILIZZO PER UNO SCOPO PARTICOLARE.
Garanzia
L'unico obbligo di Beckman Coulter e il solo
Il funzionamento di questi prodotti è garantito nel
rimedio dell'acquirente per violazione della
modo descritto sulla loro etichetta e nella
presente garanzia consiste, a discrezione di
documentazione MicroScan, purché utilizzati
Beckman Coulter, nella riparazione o nella
seguendo le istruzioni. NESSUNA GARANZIA SI
sostituzione dei prodotti. Beckman Coulter non si
ESTENDE OLTRE ALLA PRESENTE GARANZIA
riterrà in alcun caso responsabile di danni
ESPLICITA E BECKMAN COULTER DECLINA OGNI
prossimi, accidentali o consequenziali in relazione
GARANZIA IMPLICITA DI COMMERCIABILITÀ E
ai prodotti.
OGNI GARANZIA DI
3251-3000A 3-5
3-6 3251-3000A
Prompt™* Inokulationssystem-D zum
Gebrauch bei Empfindlichkeitstests
im Mikrodilutionsverfahren
Verwendungszweck befestigt. An der Spitze des Beimpfungsstäbchens
Das Prompt-Inokulationssystem-D wird verwendet zur befindet sich eine Vertiefung, die eine spezifische
Standardisierung von Impflösungen für Antibiotika- Menge an Bakterien aufnehmen kann. In der
Empfindlichkeitstests im Mikrodilutionsverfahren. Plastikflasche sind 30 ml Lösung enthalten. Mit dem
Beimpfungsstäbchen werden mehrere
Zusammenfassung Bakterienkolonien von einer primären
Das Mikrodilutionsverfahren zur Antibiotika-
Isolationsplatte aufgenommen, mit dem Kragen
Empfindlichkeitstestung bietet dem klinischen
abgewischt und in die Plastikflasche eingebracht.
Mikrobiologen eine zuverlässige Methode zur
Durch Schütteln werden die Bakterien in der Flasche
quantitativen Bestimmung von sinnvollen
suspendiert. Die Bakteriensuspension ist 4 Stunden
Empfindlichkeitsangaben. Das Verfahren wird zur
stabil. Wenn das Prompt-Inokulationssystem-D
Ermittlung der minimalen Hemmkonzentration (MHK)
innerhalb 4 Stunden benutzt wird, liegen 97% der
eines Antibiotikums eingesetzt und hat schnell breite
MHKs innerhalb ± 1 Verdünnungsstufe der mit der
Akzeptanz in klinischen Labors gefunden1. Präzision
konventionellen Methode bestimmten Ergebnisse.
und Reproduzierbarkeit der MHK-Bestimmung
Das Prompt-Inokulationssystem-D erleichtert die
hängen vom Gebrauch definierter Materialien und
Bereitung der MHK-Impfsuspension durch
Arbeitsweisen ab.
Eliminierung 1) der Inkubationsperiode und 2) der
Eine der wichtigen Voraussetzungen bei der Anpassung der Keimkonzentration.
MHK-Durchführung ist die Kontrolle der
Bakterienpopulation, die bei der Beimpfung innerhalb Suspendierlösung
gewisser Grenzen liegen muß. Diese Forderung kann Das Prompt-Inokulationssystem-D, Bestell-Nr.
auf zwei Arten erfüllt werden: B1026-10D, enthält 30 ml (± 1,0 ml) stabilisierte,
1) Inkubation und manuelle Angleichung der wäßrige PLURONIC**-Detergentien.
Impfsuspension an einen 0,5 McFarland- Vorsichtsmaßnahmen
Trübungsstandard2 mit anschließender geeigneter 1. Nur zum Gebrauch als In-vitro-Diagnostikum.
Verdünnung oder 2. Kolonien müssen von einer FRISCHEN
2) Inkubation bis zu einer stationären Kulturplatte (< 24 Stunden) abgenommen
Wachstumsphase in der Nährlösung3 mit werden.
anschließender geeigneter Verdünnung. 3. Die Bakteriensuspension sollte innerhalb 4
Das Prompt-Inokulationssystem-D liefert dem Stunden nach Bereitung weiter verarbeitet
Mikrobiologen eine Methode zum Erlangen einer werden.
standardisierten Impfsuspension, wobei die Inkubation 4. Das Plastik-Beimpfungsstäbchen unter KEINEN
und die Angleichung an einen Trübungsstandard UMSTÄNDEN ABFLAMMEN.
entfällt.4,5,6,7 Die Ergebnisse, die mit den Mikrodilutions- 5. Zur Vermeidung von Kontamination mit den
Empfindlichkeitstesten unter Verwendung des Prompt- Fingern nur den Rand des Stopfens und die
Inokulationssystem-D erzielt werden, zeigen eine 97%- äußere Oberfläche des Abstreifkragens berühren.
ige oder höhere Korrelation mit den Ergebnissen nach 6. Die Verpackung der Beimpfungsstäbchen nach
NCCLS (National Committee on Clinical Laboratory Gebrauch sogleich wieder schließen.
Standards2). 7. Keine Kolonien aufnehmen, deren Durchmesser
Prinzip kleiner als die Stäbchenspitze sind.
Das Prompt-Inokulationssystem-D besteht aus einem Anmerkung
Beimpfungsstäbchen und einer Flasche mit Lösung. Nach Beimpfung sollten die Prompt-
Das Beimpfungsstäbchen besteht aus einem Inokulationsflasche, das Beimpfungsstäbchen und
Polypropylenstift mit einem abbrechbaren Kragen, der der Abstreifkragen als Träger potentiell pathogener
zum Abwischen der Bakterien (Abstreifkragen) dient. Keime angesehen werden. Handhabung und
Das Beimpfungsstäbchen ist an einem Stopfen Abfallbeseitigung sind entsprechend durchzuführen.
3251-3000A 4-1
Lagerung Anmerkung
Die Prompt-Systeme sollten bei 2-27°C gelagert Bei sehr kleinen, stecknadelkopfgroßen
werden. Bestrahlung mit direktem Licht vermeiden. Kolonien mit der Inkubation der
Beimpfte Systeme können bis zu 4 Stunden bei Isolationsplatte fortfahren, bis die Kolonien
Zimmertemperatur gelagert werden. den Durchmesser des Beimpfungsstäbchens
Haltbarkeit erreicht haben. Wenn der Durchmesser der
Prompt-Flaschen sollten nicht mehr benutzt werden, Kolonien diese Größe nicht erreicht (z. B. bei
wenn die Flasche oder der Verschluß beschädigt sind. einigen Streptokokken) sollte eine alternative
Nach dem Verfalldatum nicht mehr verwenden. Methode zur Bereitung der Impflösung
angewandt werden.
Anzüchten und Aufbereiten der Keime 4. Den Griff des Beimpfungsstäbchens mit einer
Die an das Labor eingesandten Proben sollten in der Hand halten und den Abstreifkragen mit der
üblichen Weise auf einer Primärkulturplatte anderen Hand fassen und kräftig ziehen, um
angezüchtet werden. Drei abgegrenzte Kolonien, die Verbindung zwischen Abstreifkragen und
größer als die Stäbchenspitze, von einer 18-24 Beimpfungsstäbchen zu lösen. Hierbei den
Stunden alten Kultur werden zum Gebrauch des Abstreifkragen nicht drehen oder biegen.
Prompt-Inokulationssystems-D benötigt. Die Spitze des Beimpfungsstäbchens muß
Mitgeliefertes Material stets nach unten zeigen, niemals auf
62 Prompt Beimpfungsstäbchen Personen richten (Abb. 2-2).
60 Prompt Inokulationsflaschen
Durchführung
Das Prompt Inokulationssystem-D kann zur Bereitung
einer Impfsuspension für die MHK-Testung nach dem
Mikrodilutionsverfahren verwendet werden, wobei das
Inokulum, suspendiert in einer nicht-nutritiven
Lösung, zum Rehydrieren der Testplatten eingesetzt
wird. Hierzu sind folgende Arbeitsschritte
durchzuführen:
A. Bereitung der Bakteriensuspension
1. Die benötigte Anzahl vom Prompt-
Inokulationsflaschen bereitstellen.
2. Die benötigte Anzahl von Beimpfungsstäbchen
bereitstellen.
3. Das Beimpfungsstäbchen senkrecht zur
Oberfläche der Agarplatte halten und mit der Abb. 2-2
Spitze drei Kolonien, mindestens so groß wie
die Spitze, aufnehmen; dabei nicht den Agar
verletzen. Nicht mit der Spitze über die Kolonien 5. Den Abstreifkragen langsam vom Schaft des
kratzen oder schleifen (Abb. 2-1). Beimpfungsstäbchens ziehen und den Kragen
verwerfen (Abb. 2-3).
4-2 3251-3000A
6. Mit der freien Hand eine Inokulationsflasche
aufnehmen.
7. Den Verschluß der Flasche wie abgebildet
seitwärts biegen, bis er aufbricht (Abb. 2-4).
Abb. 2-6
3251-3000A 4-3
Anwendungseinschränkungen Verfahren verglichen.2 Dazu wurden 916 Isolate auf
1. Das Prompt-Inokulationssystem-D sollte nicht konventionellen MicroScan-Trockenplatten getestet.
benutzt werden, wenn die Größe der Kolonie kleiner Die Tests wurden in zwei verschiedenen Labors
als die Spitze des Beimpfungsstäbchens ist. durchgeführt, die beide MicroScan-Instumente und
Beispiele für Keime, die möglicherweise nicht die manuelle Nachprüfung einsetzten.
geforderte Koloniegröße zeigen sind Streptococcus Die Impflösungen wurden entsprechend dem
spp., nicht hingegen S. bovis und S. agalactiae Prompt-Inokulationssystem-D und der NCCLS-
(B-Gruppe). Die Verwendung von zu kleinen Vorschrift zubereitet. Die durchschnittliche Dichte
Kolonien resultiert in zu schwacher Beimpfung und für 100 Keime, gezählt unmittelbar nach Bereitung
kann bewirken, daß ein resistenter Keim als der Impflösung, betrug 6,9x105 CFU/ml. Das
empfindlich erscheint. Wenn die Kolonien kleiner allgemeine Ergebnis lag bei 97%. Für die MHKs von
als die Spitze des Beimpfungsstäbchens sind, P. aeruginosa und Aminoglycosiden (d.h. Amikacin,
sollte eine alternative Methode für die Bereitung Gentamicin, Tobramycin) mit Prompt lag die
der Impflösung gewählt werden. essentielle Übereinstimmung bei 97,5% (MHKs
2. Einige mukoide Stämme wie z.B. ‘fadenziehende’ innerhalb ± 1 Verdünnungsstufe der MHKs nach
Klebsiella spp. oder Pseudomonas spp. haften NCCLS-Methode). Weitere wirkstoffspezifische
möglicherweise nicht am Stäbchen, wenn man Leistungsdaten liegen vor.
diese Keime aufnehmen will, was ggf. deutlich Die Penicillin- und Ampicillin-MHKs einiger
sichtbar wird. Für solche Keime sollte eine β-Lactamase produzierender Staphylokokken sind
alternative Methode zur Bereitung der Impflösung extrem abhängig von der Impflösung. S. aureus
benutzt werden. ATCC 29213 ist ein solcher Keim. Penicillin und
3. Das Prompt-System zeigte im Vergleich zur Ampicillin-Resultate sollten als innerhalb des
Referenzmethode erhöhte MHK-Werte bei Kontrollbereiches angesehen werden, wenn dieser
Fluorchinolonen (z.B. Gatifloxacin), Lincosamiden Qualitätskontrollstamm eine Penicillin-MHK ≥ 0,25
(z.B. Clindamycin) und Makroliden µg/ml und eine Ampicillin-MHK ≥ 0,5 µg/ml zeigt
(z.B. Erythromycin), wenn der getestete Keim zu (d.h. für diese Kontrollbereiche sollte keine
den Staphylokokken zählt. Bei diesen Obergrenze festgesetzt werden). Wenn bei Penicillin
Kombinationen vonn Erreger und Antibiotika ist die und Ampicillin Unterschiede gefunden werden
Inokulumkonzentration von entscheidender zwischen Verwendung des Prompt-Systems und der
Bedeutung. Liefert das Prompt-System die Standardmethode (Tabelle 2-1), handelt es sich bei
Interpretation “Intermediate” (Mittel) oder den fraglichen Keimen um
“Resistant” (Resistent), sollte vor der Ausgabe der β-Lactamase-Bildner. Alle beobachteten
Resultate eine alternative Methode zur Erzielung abweichenden MHKs sollten als resistent
eines MHK-Wertes angewandt werden. interpretiert werden (MHK > 0,25 µg/ml für
Erwartete Ergebnisse Penicillin). Die MHK-Werte mit dem Prompt-System
Wenn das Prompt-Inokulationssystem-D gemäß der waren stets höher als die MHKs mit der
Gebrauchsanleitung benutzt wird, werden geeignete Standardmethode und zeigten somit deutlicher die
Impflösungen für das Mikrodilutionsverfahren zum resistenten Eigenschaften der Bakterien auf. Diese
MHK-Test für die meisten klinischen Isolate erhalten. Beobachtung ist auch von Flejzor und Bokkenheuser
MHK-Ergebnisse von Impflösungen, die mit dem beschrieben worden.8 Ein ähnliches Phänomen
Prompt-Inokulationssystem-D hergestellt wurden, wurde auch bei Methicillin-resistenten
zeigten eine über 97%-ige Übereinstimmung mit MHK- Staphylokokken und Penicillinase-resistenten
Resultaten von Impflösungen nach NCCLS-Vorschrift.2 Penicillinen beobachtet.
Staphylokokken-Koloniezählwerte können bei der
Spezifische Produkteigenschaften Prompt-Methode höher ausfallen und über dem
Die Resultate von Empfindlichkeitstesten im NCCLS-Erwartungsbereich liegen. Erhöhte Werte
Mikrodilutionsverfahren mit Impflösungen, die mit können die durch das Inokulum beeinflussten
dem Prompt-System hergestellt wurden, wurden mit Antibiotikaresultate beeinträchtigen. Bezüglich
den Resultaten von Impflösungen gemäß NCCLS- antimikrobieller Wirkstoffe mit bekannter Inokulum-
Abhängigkeit, siehe Abschnitt “Einschränkungen”.
4-4 3251-3000A
of standardized bacterial inocula. J. Clin.
Bibliographie
Microbiol. 18:84-91.
1. Gerlach, E.H. in Current Techniques for Antibiotic
7. Barry, A.L., R.E. Badal, and R. W. Hawkinson.
Susceptibility Testing, A. Balows, ed. (Charles C.
1983. Influence of inoculum growth phase on
Thomas, Publisher, Springfield, Illinois) 1974. pp.
microdilution susceptibility tests. J. Clin.
63-76.
Microbiol. 18:645-651.
2. National Committee for Clinical Laboratory
8. Flejzor, B. and V.D. Bokkenheuser. 1985.
Standards 2000. NCCLS approved Standard
Performance of the Prompt System in
M7-A5: Methods for Dilution Antimicrobial
identification and antimicrobial susceptibility
Susceptibility Tests for Bacteria that Grow
testing of clinical isolates. J. Clin. Microbiol.
Aerobically. National Committee for Clinical
21:267-268.
Laboratory Standards, 771 E. Lancaster Ave.,
Villanova, PA. 19085. Gewährleistung
3. Barry, A.L., F. Garcia, and L.D. Thrupp. 1970. An Wir garantieren, dass diese Produkte die
improved single-disc method for testing the Leistung erbringen, die in der Etikettierung bzw.
antibiotic susceptibility of rapidly-growing Packungsbeilage sowie der MicroScan-Literatur
pathogens, Am. J. Clin. Path. 53:49-158. beschrieben ist, wenn sie anweisungsgemäß
verwendet werden. ÜBER DIESE
4. Wicks, J.H., R.L. Nelson, and G.E. Krejcarek. 1981;
AUSDRÜCKLICHE GARANTIE HINAUS WERDEN
A rapid inoculum standardization system: a novel
KEINE GARANTIEN ÜBERNOMMEN, UND
device for standardization of inocula in
BECKMAN COULTER LEHNT JEGLICHE
antimicrobial susceptibility testing. J. Clin.
IMPLIZITE GARANTIE DER HANDELSÜBLICHEN
Microbiol. 17:1114-1119.
BRAUCHBARKEIT ODER DER EIGNUNG FÜR
5. Baker, C.N., C. Thornsberry, and R.W. Hawkinson. EINEN BESTIMMTEN ZWECK AB. Die einzige
1983. Inoculum standardization in antimicrobial Verpflichtung seitens Beckman Coulter und der
susceptibility testing: evaluation of overnight agar einzige Anspruch des Käufers bei
cultures and the rapid inoculum standardization Nichteinhaltung dieser Garantie besteht darin,
system. J. Clin. Microbiol. 17:450-457. dass die Produkte nach dem Ermessen von
6. Lund, M.E. and R.W. Hawkinson. 1983. Evaluation Beckman Coulter repariert oder ersetzt werden.
of the Prompt Inoculation System for preparation In keinem Fall haftet Beckman Coulter für
unmittelbare oder beiläufige Schäden oder
Folgeschäden in Zusammenhang mit den
Produkten.
3251-3000A 4-5
4-6 3251-3000A
Sistema de Inoculación Prompt™*-D
Para el estudio de la sensibilidad por
microdilución
Propósito del Uso diseñada para contener un determinado número de
El Sistema de Inoculación Prompt-D se emplea para bacterias. La botella de plástico contiene treinta (30)
estandarizar el inóculo empleado en el estudio de ml de líquido de dilución. La varilla se pone en
sensibilidad a antimicrobianos por microdilución. contacto con diversas colonias bacterianas en una
placa primaria de aislamiento, luego se seca con la
Resumen anilla, y posteriormente, se introduce en la botella de
El procedimiento de microdilución utilizado en los
plástico. Las bacterias se disuelven al agitar la
estudios de sensibilidad a antimicrobianos ha
botella, y esta suspensión bacteriana permanece
proporcionado al microbiólogo clínico un método
estable durante cuatro horas. Si se usa el Sistema
fiable con el que obtener resultados cuantitativos en
de Inoculación Prompt-D dentro de ese margen de
este tipo de pruebas; se emplea para determinar la
cuatro horas posterior a la preparación, el 97% de
concentración inhibitoria mínima (CIM) de los
las CMI están comprendidas dentro de un margen
agentes antimicrobianos, y ha sido muy bien acogido
de dilución de ± uno (1) con respecto a las CIM
en los laboratorios clínicos1. La precisión y la establecidas mediante los métodos convencionales.
reproducibilidad del procedimiento en la
determinación de la CIM dependen del uso de los El Sistema de Inoculación Prompt-D facilita la
materiales y los métodos establecidos. preparación del inóculo de CMI al eliminar: 1) el
Un requisito importante del procedimiento para la período de incubación y 2) la necesidad de ajustar la
determinación de la CIM es conseguir un inóculo concentración del inóculo.
bacteriano ajustado dentro de unos límites fijados, lo Suspensión de la solución
cual puede lograrse de dos formas: El número de catálogo B1026-10D del Sistema de
1) mediante un ajuste manual del inóculo hasta Inoculación Prompt-D contiene 30 ml (± 1,0 ml) de
alcanzar la turbidez estándar 0,5 de la escala de solución acuosa con surfactantes PLURONIC**
McFarland2, seguido por la dilución apropiada, o acuosos estabilizados.
2) mediante una incubación hasta la fase Advertencias y precauciones
estacionaria del caldo de cultivo3, seguida por la
1. Para uso diagnóstico in vitro exclusivamente.
dilución apropiada.
El Sistema de Inoculación Prompt-D proporciona al 2. Seleccionar las colonias de una placa de cultivo
microbiólogo un modo de obtener inóculos RECIENTE (< 24 horas).
estandarizados, eliminando al mismo tiempo la 3. Usar la suspensión bacteriana en un plazo de
necesidad de incubar y ajustar la turbidez.4, 5, 6, 7 Los cuatro horas después de su preparación.
resultados de sensibilidad mediante microdilución 4. NO COLOCAR la varilla de plástico de la
obtenidos utilizando el Sistema de Inoculación inoculación CERCA DE UNA LLAMA bajo
Prompt-D coinciden en al menos un 97% con los NINGUNA circunstancia.
resultados obtenidos en estas mismas pruebas con 5. Mantener los dedos por encima del borde del
inóculos preparados siguiendo el procedimiento tapón y en la superficie externa de la anilla, con
establecido por el National Committee on Clinical el fin de evitar la contaminax`ción.
Laboratory Standards (NCCLS).2 6. Mantener cubiertas las varillas cuando no se
estén utilizando.
Principios
El Sistema de Inoculación Prompt-D consiste en una 7. No emplear este procedimiento cuando el
varilla de inoculación y una botella de líquido de tamaño de las colonias sea inferior al de la
dilución. La varilla es de polipropileno, lleva una punta de la varilla.
anilla de seguridad que sirve para secarla, y va unida NOTA:
a un tapón. La punta de la varilla tiene una hendidura Tras la inoculación, la botella, la varilla y la
anilla de Prompt deben considerarse potencial
mente contaminadas. Manipular y desechar
estos instrumentos en consecuencia.
3251-3000A 5-1
NOTA:
Conservación
En el caso de colonias muy pequeñas, casi
Las unidades de Prompt deben conservarse en un
milimétricas, continúe incubando la placa
intervalo de temperatura de 2 a 27°C. Evitar que
primaria hasta que alcancen el diámetro de la
incida luz directa sobre ellas. No emplear las
punta de la varilla. Si resulta improbable que el
unidades después de la fecha de caducidad que
diámetro de la colonia alcance dicho tamaño
aparece en el paquete. Las unidades inoculadas
(por ejemplo, en el caso de determinados
pueden conservarse a temperatura ambiente hasta
estreptococos), deberá emplearse otro método
un máximo de cuatro horas.
de preparación de inóculos.
Deterioro del producto 4. Asiendo la varilla por el tapón con una mano,
Las botellas de Prompt no deben emplearse si la sujete la anilla con la otra y tire con firmeza
botella o el tapón presentan golpes o grietas. para romper la unión entre la anilla y el vástago
Obtención y preparación de las muestras de la varilla. No retuerza ni doble la anilla.
Las muestras que se reciban en el laboratorio deben Mantenga el extremo de la varilla apuntando
tratarse del modo habitual para preparar una placa de al suelo, alejada de usted y del resto de las
cultivo primaria. Para emplear el Sistema de personas. (Figura 1-2).
Inoculación Prompt-D se necesitan tres colonias
aisladas de un tamaño mayor al de la punta de la
varilla, de un cultivo de dieciocho a veinticuatro (18 a
24) horas.
Procedimiento
Material proporcionado
62 varillas de inoculación de Prompt
60 botellas de inoculación de Prompt
El Sistema de Inoculación Prompt-D puede
emplearse, con el fin de rehidratar la placa, en la
preparación inóculos destinados a determinar la CIM
mediante microdilución en aquellos procedimientos
en los que se emplee un inóculo realizado en una
solución no nutritiva. Para ello, deben seguirse las
siguientes instrucciones:
A. Preparación de la suspensión bacteriana
1. Extraiga de la caja la cantidad de botellas de Figura 1-2
inoculación de Prompt que necesite.
2. Extraiga de la caja una varilla de inoculación. 5. Tire de la anilla lentamente hacia abajo,
sepárela del vástago de la varilla y deséchela.
3. Mantenga la punta de la varilla perpendicular a
(Figura 1-3).
la superficie del agar y toque con ella 3
colonias aisladas cuyo tamaño sea al menos 6. Sujetando la varilla de inoculación con una
tan grande como la punta de la varilla. No mano, coja una botella de inoculación de
perfore el agar. No raspe ni arrastre el extremo Prompt.
de la varilla por las colonias (Figura 1-1).
Figura 1-3
Figura 1-1
5-2 3251-3000A
7. Doble el cierre de la botella hacia un lado 10. La suspensión bacteriana debe emplearse
hasta que éste se parta. (Figura 1-4). dentro de un plazo de cuatro horas después
de su preparación. Si no se utiliza
inmediatamente después de su preparación,
deberá agitarse bien antes de usar, con el fin
de resuspender las bacterias.
B. Colocación de la suspensión en el inoculador
1. Saque la varilla de inoculación de la botella y
deséchela.
2. Vierta la suspensión en el inoculador,
apretando suavemente la botella
(Figura 1-7).
E-0822B
Figura 1-4
Figura 1-7
3. Proceda a determinar la CIM mediante un
procedimiento de microdilución apropiado.
NOTA:
Tras la inoculación, la botella, la varilla y la
anilla del Prompt deben considerarse
portadoras potencialemente contaminados.
Manipular y desechar estos instrumentos en
consecuencia.
Control de calidad
Para el control de calidad, remítase al identificador
de sistema de la sensibilidad mediante microdilución
adecuado.
Limitaciones
Figura 1-5 1. El Sistema de Inoculación Prompt-D no debe
9. Agite bien la botella durante 8 ó 10 minutos emplearse cuando el tamaño de la colonia sea
para que las bacterias se desprendan del inferior al de la punta de la varilla. Entre los
extremo de la varilla. Si no se desprenden, organismos que no pueden alcanzar ese
deje reposar la solución durante 5 minutos y tamaño se encuentran losl Streptococcus spp.
agite de nuevo. (Figura 1-6). a excepción del S. bovis y el S. agalactiae
(Grupo B). Si se utilizan colonias demasiado
pequeñas, la inoculación será inferior a la
normal y esto puede hacer que un organismo
resistente parezca sensible. En el caso de
colonias con un tamaño inferior al de la punta
de la varilla, deberá emplearse otro método de
preparación de inóculos.
Figura 1-6
3251-3000A 5-3
2. Es posible que algunas cepas mucoides, como procedimiento establecido por el NCCLS). El resto de
las de Klebsiella spp o Pseudomonas spp, no se antibióticos estan en concordancia.
adhieran a la varilla al picar la colonia. Esto En el caso de algunos estafilococos productores de
podrá verse claramente. En el caso de este tipo β -lactamasa, la CIM de la penicilina y de la ampicilina
de organismos, deberá emplearse otro método dependen enormemente del inóculo. El S. aureus
de preparación de inóculos. ATCC 29213 es uno de estos casos, por lo que los
3. El Sistema Prompt ha mostrado CIMs elevadas resultados de la penicilina y la ampicilina deberán
a fluoroquinolonas (p.e. gatifloxacina), considerarse bajo control si esta cepa muestra una
lincosamidas (p.e. clindamicina) y macrolidos CIM de penicilina ≥0,25 µg/ml y una CIM de
(p.e. eritromicina) en estafilococos, comparado ampicilina ≥ 0,5 µg/ml (es decir, no debe aplicarse
con el método de referencia. La concentración ningún límite superior a estos intervalos de control).
del inóculo es crítica en estas combinaciones Las discrepancias que se observaron en los
de antibiótico y microorganismo. Si usando resultados de la penicilina y la ampicilina entre el
Prompt obtenemos una interpretación método de Prompt y los métodos convencionales
Intermedia o Resistente y un método (Tabla 1-1) correspondían todas a organismos
alternativo es Sensible (p.e. turbidez) debería productores de β-lactamasa. Todas las
repetirse por un método de turbidez antes de concentraciones inhibitorias mínimas discrepantes
informar los resultados. observadas se interpretaron como resistentes (CIM
0,25 µg/ml en el caso de la penicilina). Las CIM
Resultados esperados
obtenidas mediante el sistema de Prompt fueron
Si se siguen las indicaciones, el Sistema de
invariablemente mayores que las CIM estándar,
Inoculación Prompt-D proporcionará el inóculo
siendo mejores indicativos de la resistencia de las
apropiado para la determinación de la CIM mediante
bacterias. Este fenómeno también ha sido observado
microdilución en la mayoría de aislamientos
por Flejzor y Bokkenheuser;8 asimismo, se ha
clínicos. Las CIM obtenidas con inóculos
observado un fenómeno similar con estafilococos
preparados con el Sistema de Inoculación Prompt-
resistentes a la meticilina y con las penicilinas
D muestran una coincidencia superior al 97% con
resistentes a la penicilasa.
las obtenidas con inóculos preparados siguiendo el
procedimiento establecido por el National El contaje de colonias de estafilococos puede ser
Committee on Clinical Laboratory Standards elevada usando el método Prompt y puede ser
(NCCLS).2 superior al rango propuesto por NCCLS. El aumento
de colonias puede afectar al resultados de algunos
Características de comportamiento específicas
antibióticos muy inóculo dependientes. En en
Se compararon los resultados de las pruebas de
sensibilidad mediante microdilución obtenidos con apartado de Limitaciones están detallados estos
inóculos preparados con el sistema Prompt con los antibióticos inóculo dependientes.
resultados obtenidos con inóculos preparados Referencias bibliográficas
siguiendo el procedimiento establecido por el 1. Gerlach, E.H. in Current Techniques for Antibiotic
National Committee on Clinical Laboratory Susceptibility Testing, A. Balows, ed. (Charles C.
Standards (NCCLS).2 Novecientos dieciséis Thomas, Publisher, Springfield, Illinois) 1974. pp.
aislamientos fueron sometidos a prueba en paneles 63-76.
deshidratados convencionales de MicroScan. Las 2. National Committee for Clinical Laboratory
pruebas se llevaron a cabo en dos emplazamientos, Standards 2000. NCCLS approved Standard M7-
utilizando tanto instrumentación MicroScan como A5: Methods for Dilution Antimicrobial
verificación manual. Susceptibility Tests for Bacteria that Grow
Aerobically. National Committee for Clinical
Los inóculos se prepararon con el procedimiento Laboratory Standards, 771 E. Lancaster Ave.,
del Sistema de Inoculación Prompt-D y con el Villanova, PA. 19085.
procedimiento establecido por el NCCLS. La 3. Barry, A.L., F. Garcia, and L.D. Thrupp. 1970. An
densidad media del inóculo en 100 organismos improved single-disc method for testing the
registrada inmediatamente después de la antibiotic susceptibility of rapidly-growing
preparación del inóculo fue de 6,9 x 105 cfu/ml. El pathogens, Am. J. Clin. Path. 53:49-158.
porcentaje total de resultados en un margen de 4. Wicks, J.H., R.L. Nelson, and G.E. Krejcarek.
dilución de +/- 1 fue de un 97%. Las 1981; A rapid inoculum standardization system:
concentraciones inhibitorias mínimas para P. a novel device for standardization of inocula in
aeruginosa obtenidas con aminoglucósidos antimicrobial susceptibility testing. J. Clin.
(amikacina, gentamicina, tobramicina, etc.) Microbiol. 17:1114-1119.
mediante el método Prompt concuerdan en un 5. Baker, C.N., C. Thornsberry, and R.W.
97,5% (CIM dentro de un margen de dilución de +/- Hawkinson. 1983. Inoculum standardization in
1 con respecto a las CIM obtenidas con el antimicrobial susceptibility testing: evaluation of
overnight agar cultures and the rapid inoculum
standardization system. J. Clin. Microbiol.
17:450-457.
5-4 3251-3000A
6. Lund, M.E. and R.W. Hawkinson. 1983. Declaración de garantía
Evaluation of the Prompt Inoculation System for Estos productos están garantizados para
preparation of standardized bacterial inocula. J. funcionar como se describe en el etiquetado y la
Clin. Microbiol. 18:84-91. literatura de MicroScan cuando se usan siguiendo
7. Barry, A.L., R.E. Badal, and R. W. Hawkinson. las instrucciones. NO HAY GARANTÍAS QUE SE
1983. Influence of inoculum growth phase on EXTIENDAN MÁS ALLÁ DE LO EXPRESADO EN
microdilution susceptibility tests. J. Clin. ÉSTA Y BECKMAN COULTER RECHAZA
Microbiol. 18:645-651. CUALQUIER GARANTÍA ÍMPLICITA DE
8. Flejzor, B. and V.D. Bokkenheuser. 1985. COMERCIALIZACIÓN O ADECUACIÓN A UN
Performance of the Prompt System in PROPÓSITO CONCRETO. La única obligación de
identification and antimicrobial susceptibility Beckman Coulter y el exclusivo remedio al
testing of clinical isolates. J. Clin. Microbiol. comprador por el incumplimiento de esta garantía
21:267-268. será, a decisión de Beckman Coulter, la reparación
o el reemplazo de productos. En ningún caso
Beckman Coulter será responsable de daños por
proximidad, incidentales o derivados en conexión
con los productos.
3251-3000A 5-5
5-6 3251-3000A
Prompt™* Sistema-D de Inoculação
Para utilização com Testes de
Sensibilidade por Microdiluição
Fim a que se destina no frasco de plástico. As bactérias são suspensas por
O Sistema-D de Inoculação Prompt é utilizado para agitação do frasco. A suspensão bacteriológica
normalizar os inóculos destinados a testes de permanece estável durante quatro horas. Quando o
sensibilidade antimicrobiana por microdiluição. Sistema-D de Inoculação Prompt é utilizado nas quatro
horas seguintes à preparação, 97% das CIM
Resumo encontram-se a ± uma (1) diluição das CIM
O procedimento de microdiluição para o teste de
determinadas pelo método convencional.
sensibilidade antimicrobiana fornece ao microbiólogo
O Sistema-D de Inoculação Prompt facilita a
clínico um método fiável para obter resultados
preparação do inóculo CIM, eliminando: 1) o
consistentes em testes de sensibilidade quantitativa.
período de incubação, e 2) a necessidade de ajuste da
Este procedimento é utilizado para determinar a
concentração do inóculo.
concentração inibitória mínima (CIM) dos agentes
antimicrobianos e tem ganho uma larga aceitação na Solução de suspensão
clínica laboratorial.1 A exactidão e a reprodutibilidade O Sistema-D de Inoculação Prompt, número de
do procedimento de CIM dependem da utilização de catálogo B1026-10D, contém 30 ml (± 1,0 ml) de
materiais e de métodos definidos. surfactantes aquosos PLURONIC** estabilizados.
Uma das necessidades importantes do procedimento Advertências e precauções
de CIM é o controlo da população bacteriológica do
inóculo dentro de limites definidos. Este passo pode 1. Para utilização apenas em diagnóstico in vitro.
ser realizado de duas maneiras: 2. As colónias devem ser seleccionadas a partir de
1) ajuste manual do inóculo para se equiparar a uma placa de cultura FRESCA (<24 horas).
um padrão de turvação de McFarland2 de 0,5 3. A suspensão bacteriológica deve ser utilizada nas
seguido da diluição adequada ou quatro horas seguintes à preparação.
2) incubação até à fase estacionária em caldo de 4. NÃO APROXIMAR NENHUMA CHAMA da vara de
cultura3 seguido da diluição adequada. plástico para inoculação em nenhumas
O Sistema-D de Inoculação Prompt fornece ao circunstâncias.
microbiólogo um método de obter inóculos 5. Para evitar uma eventual contaminação, manter os
padronizados enquanto elimina a necessidade de dedos acima da borda da tampa e na superfície
ajustes por incubação e turvação.4,5,6,7 Os resultados exterior do anel.
da sensibilidade por microdiluição obtidos utilizando 6. Manter as varas tapadas quando estas não
o Sistema-D de Inoculação Prompt mostram uma estiverem a ser utilizadas.
correlação de 97% ou superior com os resultados de 7. Não utilizar no caso das colónias serem mais
sensibilidade por microdiluição obtidos com pequenas do que a ponta da vara.
inoculados preparados conforme o procedimento do NOTA:
National Committee on Clinical Laboratory Standards Após a inoculação, o frasco de inoculação
(NCCLS).2 Prompt, a vara e o anel devem ser considerados
Princípios potenciais portadores de agentes patogénicos.
O Sistema-D de Inoculação Prompt consiste numa Manusear e descartar o produto de forma
vara de inoculação e um frasco de diluente. A vara é adequada.
de polipropileno e tem um anel retirável que serve Armazenamento
como mecanismo de limpeza. A vara encontra-se As unidades de Prompt devem ser armazenadas a
presa a uma tampa. Na ponta da vara encontra-se 2-27ºC. Evitar a incidência de luz directa. Não utilizar
uma concavidade concebida para albergar um as unidades após o fim do prazo de validade
número específico de bactérias. São fornecidos trinta apresentado na embalagem. As unidades inoculadas
(30) ml de diluente no frasco de plástico. A vara toca podem ser armazenadas até quatro horas à
em várias colónias de bactérias numa placa de temperatura ambiente.
isolamento primário, é limpa e, em seguida, colocada
3251-3000A 6-1
NOTA:
Deterioração do produto
Para colónias muito pequenas, continuar a incubação
Os frascos de Prompt não devem ser utilizados no
da placa primária até que seja alcançado o diâmetro da
caso do frasco ou da tampa estarem fissurados.
ponta da vara. No caso de não ser previsível que o
Colheita e preparação da amostra diâmetro da colónia alcance este tamanho (por
As amostras recebidas no laboratório devem ser exemplo, alguns estreptococos), deve ser utilizado um
tratadas da maneira habitual para a preparação de método alternativo para a preparação do inóculo.
uma placa de cultura primária. São necessárias três 4. Segurando na vara pela pega com uma mão,
colónias isoladas maiores do que a ponta da vara agarrar o anel com a outra mão e puxar com
provenientes de uma cultura de dezoito a vinte e firmeza para quebrar a ligação entre o anel e o
quatro (18-24) horas para a utilização do Sistema-D eixo da vara. Não torcer ou entortar a vara.
de Inoculação Prompt. Manter a ponta direccionada para o chão,
longe de si e de outras pessoas
Procedimento
(Figura 1-2).
Materiais fornecidos
62 varas de inoculação Prompt
60 frascos de inoculação Prompt
O Sistema-D de Inoculação Prompt pode ser
utilizado para a preparação de inóculos para testes
de CIM por microdiluição que utilizem o inóculo em
suspensão numa solução não nutritiva para
rehidratar o tabuleiro. Para utilizar, seguir as
seguintes instruções:
A. Preparação da suspensão bacteriológica
1. Retirar o número pretendido de frascos de
inoculação Prompt da embalagem.
2. Retirar da embalagem uma vara de
inoculação.
3. Segurando na ponta da vara
perpendicularmente à superfície da gelose,
tocar em 3 colónias isoladas tão grandes ou
maiores do que a ponta. Não penetrar a Figura 1-2
gelose. Não raspar ou arrastar a ponta sobre
as colónias (figura 1-1). 5. Fazer deslizar lentamente o anel para baixo,
retirá-lo do eixo da vara e descartar o anel.
(Figura 1-3)
6. Enquanto se segura na vara de inoculação
com uma mão, pegar num frasco de
inoculação Prompt. 5.
Figura 1-1
Figure 1-3
6-2 3251-3000A
7. Dobrar a tampa do frasco para o lado até que 10. A suspensão bacteriológica deve ser utilizada
esta se quebre (Figura 1-4). nas quatro horas seguintes à preparação. No
caso de não ser utilizada imediatamente após a
preparação, agitar vigorosamente para voltar a
suspender as bactérias imediatamente antes da
utilização.
B. Colocação da suspensão no tabuleiro de
sementeira
1. Retirar do frasco a vara de inoculação e
descartá-la.
2. Deitar a suspensão no tabuleiro de sementeira,
apertando cuidadosamente o frasco com uma
acção de bombagem
(Figura 1-7).
E-0822B
Figura 1-4
Figura 1-7
Figura 1-6
3251-3000A 6-3
2. Algumas estirpes mucóides de As CIM de penicilina e de ampicilina para alguns
microorganismos tais como Klebsiella estafilococos produtores de β−lactamase são
spp. ou Pseudomonas spp. podem não extremamente inóculo-dependentes. S. aureus ATCC
aderir à vara quando se tentar picar a 29213 é um desses organismos. Os resultados para a
colónia. Este facto será visualmente penicilina e ampicilina devem ser considerados
identificável. Deve ser utilizado um controlados se essa estirpe de controlo de qualidade
método alternativo de preparação do apresentar qualquer CIM de penicilina ≥0,25 µg/ml e
inóculo para tais microorganismos. qualquer CIM de ampicilina ≥0,5 µg/ml (ou seja,
3. Sistema Prompt demonstrou CIMs nenhum limite superior deve ser aplicado a estes
elevadas com fluoroquinolonas intervalos de controlo). Quando ocorreram
(ex.gatifloxacina), lincosamidas (ex. discrepâncias para penicilina e ampicilina entre o
clindamicina), e macrólidos(ex. sistema de Prompt e os testes de método padrão
eritromicina) e estafilococos quando (Tabela 1-1), os microorganismos envolvidos eram
comparado com o método de referência. produtores de β–lactamase. Todas as CIM
A concentração do inóculo é critica com discrepantes seriam interpretadas como resistentes
esta combinação de (CIM 0,25 µg/ml para a penicilina). As CIM do sistema
organismo/antimicrobiano.Se se obtem de Prompt foram invariavelmente mais elevadas do
uma interpretação intermédia ou que as CIM padrão, assim indicando melhor a natureza
resistente com este método deve ser resistente da bactéria. Este fenómeno também foi
usado um método alternativo que relatado por Fleijzor e Bokkenheuser.8 Um fenómeno
permita a obtenção de um resultado semelhante foi também registado com estafilococos
susceptivel antes de reportar os resistentes à meticilina e as penicilinas resistentes à
resultados. penicilinase.
A contagem de colónias de estafilococos pode ser
Resultados Esperados elevada com o método Prompt em comparação com
Quando utilizado conforme as instruções, o os intervalos NCCLS esperados. A contagem elevada
Sistema-D de Inoculação Prompt fornecerá os de colónias pode afectar os resultados dos antibióticos
inóculos apropriados para testes de CIM por que são afectados pelo inóculo.Consulte a secção de
microdiluição para a maioria dos isolados clínicos. limitações de antibióticos que são inóculo-
Os resultados de CIM obtidos com inóculos dependentes.
preparados com o Sistema-D de Inoculação Prompt
apresentam uma concordância superior a 97% com Bibliografia
os resultados de CIM obtidos com inóculos 1. Gerlach, E.H. em Current Techniques for Antibiotic
preparados conforme o procedimento da NCCLS.2 Susceptibility Testing, A. Balows, ed. (Charles C.
Thomas, Publisher, Springfield, Illinois) 1974. pp.
Características específicas de desempenho 63-76.
Os resultados de sensibilidade por microdiluição 2. National Committee for Clinical Laboratory
obtidos com inóculos preparados pelo sistema de Standards 2000. NCCLS Norma aprovada M7-A5:
Prompt foram comparados com os resultados Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility
obtidos com inóculos preparados conforme o Tests for Bacteria that Grow Aerobically. National
procedimento da NCCLS.2 Novecentos e dezasseis Committee for Clinical Laboratory Standards, 771
isolados foram testados em painéis convencionais E. Lancaster Ave., Villanova, PA. 19085.
desidratados MicroScan. Os testes foram realizados 3. Barry, A.L., F. Garcia, e L.D. Thrupp. 1970. An
em dois locais, utilizando tanto instrumentos improved single-disc method for testing the
MicroScan, como verificação manual. antibiotic susceptibility of rapidly-growing
Os inóculos foram preparados conforme os pathogens, Am. J. Clin. Path. 53:49-158.
procedimentos do Sistema-D de Inoculação Prompt 4. Wicks, J.H., R.L. Nelson, e G.E. Krejcarek. 1981; A
e NCCLS. A densidade média do inóculo para 100 rapid inoculum standardization system: a novel
microorganismos contados imediatamente após a device for standardization of inocula in
preparação do inóculo foi de 6,9 x 105 cfu/ml. A antimicrobial susceptibility testing. J. Clin.
percentagem global de resultados a +/- 1 diluição foi Microbiol. 17:1114-1119.
de 97%. As CIM para P. aeroginosa obtidas com 5. Baker, C.N., C. Thornsberry, e R.W. Hawkinson.
aminoglucósidos (p.ex., amicacina, gentamicina, 1983. Inoculum standardization in antimicrobial
tobramicina) pelo Prompt têm uma concordância susceptibility testing: evaluation of overnight agar
essencial de 97,5% (CIM a +/- 1 diluição das CIM cultures and the rapid inoculum standardization
obtidas com o método NCCLS). Dados adicionais system. J. Clin. Microbiol. 17:450-457.
sobre a performance especifica de antibioticos
estão disponiveís.
6-4 3251-3000A
6. Lund, M.E. e R.W. Hawkinson. 1983. Evaluation Declaração Garantia
of the Prompt Inoculation System for preparation
of standardized bacterial inocula. J. Clin. Garante-se o desempenho destes produtos como
Microbiol. 18:84-91. descrito nas etiquetas e na literatura da MicroScan,
quando utilizados de acordo com as respectivas
7. Barry, A.L., R.E. Badal, e R. W. Hawkinson. 1983. instruções. NÃO EXISTEM QUAISQUER GARANTIAS
Influence of inoculum growth phase on QUE SE ESTENDAM ALÉM DESTA GARANTIA
microdilution susceptibility tests. J. Clin. EXPRESSA E A BECKMAN COULTER NÃO
Microbiol. 18:645-651. RECONHECE QUAISQUER GARANTIAS INFERIDAS DE
8. Flejzor, B. e V.D. Bokkenheuser. 1985. MERCANTIBILIDADE OU ADEQUAÇÃO PARA FIM
Performance of the Prompt System in PARTICULAR. A única obrigação da Beckman Coulter
identification and antimicrobial susceptibility e a compensação exclusiva para o comprador ao
testing of clinical isolates. J. Clin. Microbiol. abrigo desta garantia será, por opção da Beckman
21:267-268. Coulter, proceder à reparação ou à substituição dos
produtos. Em nenhum caso será a Beckman Coulter
responsável por quaisquer danos directos, indirectos
ou consequenciais relacionados com os produtos.
3251-3000A 6-5
6-6 3251-3000A
Σύστημα ενοφθαλμισμού D-PROMPT™*.
Για χρήση στις εξετάσεις ευαισθησίας στα
αντιβιοτικά με μικροαραιώσεις
Χρήση για την οποία προορίζεται Βασικές αρχές
Το σύστημα-D ενοφθαλμισμού Prompt Το σύστημα-D ενοφθαλμισμού Prompt
χρησιμοποιείται για την δηµιουργία αποτελείται από μία ακίδα ενοφθαλμισμού και
στανταρισµένων ενοφθαλμισμάτων για μία φιάλη αραιωτικού. Η ράβδος είναι
εξετάσεις αντιμικροβιακής ευαισθησίας με κατασκευασμένη από πολυπροπυλένιο και
μικροαραίωση. φέρει αποσπώμενο κάλυµα, το οποίο
Περίληψη χρησιμεύει ως μηχανισμός αποµάκρυνσης της
Η διαδικασία της μικροαραίωσης για την περίσσειας. Η ράβδος είναι προσαρτημένη σε
εξέταση της αντιμικροβιακής ευαισθησίας έχει ένα πώμα. Το άκρο της ράβδου φέρει μία
εφοδιάσει τον κλινικό μικροβιολόγο με μία αύλακα σχεδιασμένη για να συγκρατεί
αξιόπιστη μέθοδο για τη λήψη σημαντικών συγκεκριμένο αριθμό βακτηρίων. Στην
ποσοτικών αποτελεσμάτων από εξετάσεις πλαστική φιάλη παρέχονται τριάντα (30) ml
ευαισθησίας. Η διαδικασία αυτή χρησιμοποιείται αραιωτικού. Η ράβδος έρχεται σε επαφή με
για τον προσδιορισμό της ελάχιστης αρκετές βακτηριακές αποικίες σε ένα τρυβλίο
ανασταλτικής συγκέντρωσης (MIC) πρωτογενούς απομόνωσης, σκουπίζεται και
αντιμικροβιακών παραγόντων και έτυχε ταχείας κατόπιν τοποθετείται μέσα στην πλαστική
και ευρείας αποδοχής στο κλινικό εργαστήριο.1 φιάλη. Τα βακτήρια εναιωρούνται ανακινώντας
Η ακρίβεια και η αναπαραγωγιμότητα της τη φιάλη. Το βακτηριακό εναιώρημα
διαδικασίας MIC εξαρτώνται από τη χρήση παραμένει σταθερό για τέσσερις ώρες. Όταν
καθορισμένων υλικών και μεθόδων. το σύστημα-D ενοφθαλμισμού Prompt
Μία από τις σημαντικές απαιτήσεις της χρησιμοποιείται εντός τεσσάρων ωρών μετά
διαδικασίας MIC είναι ο έλεγχος του την παρασκευή, το 97% των MIC βρίσκονται
βακτηριακού πληθυσμού του ενοφθαλμίσματος εντός του πεδίου τιμών των MIC που
εντός καθορισμένων ορίων. Αυτό μπορεί να προσδιορίζονται με τη συμβατική μέθοδο ± μία
επιτευχθεί με δύο τρόπους: (1) αραίωση .
1) Μη αυτόματη ρύθμιση του Το σύστημα-D ενοφθαλμισμού Prompt
ενοφθαλμίσματος ώστε να ταιριάζει με ένα διευκολύνει την παρασκευή ενοφθαλμισμάτων
πρότυπο θολερότητας2 McFarland 0,5, η MIC καταργώντας: 1) την περίοδο επώασης
οποία ακολουθείται από την κατάλληλη και 2) την ανάγκη ρύθμισης της συγκέντρωσης
αραίωση ή του ενοφθαλμίσματος.
2) Επώαση κατά τη στάσιμη φάση σε Διάλυμα εναιώρησης
καλλιέργεια σε ζωμό3, που ακολουθείται Το σύστημα-D ενοφθαλμισμού Prompt με
από την κατάλληλη αραίωση. αριθμό καταλόγου B1026-10D περιέχει 30 ml
Το σύστημα-D ενοφθαλμισμού Prompt παρέχει (± 1,0 ml) σταθεροποιημένων, υδατικών
στο μικροβιολόγο μία μέθοδο λήψης διαβρεκτικών μέσων PLURONIC**.
τυποποιημένων ενοφθαλμισμάτων Προειδοποιήσεις και προφυλάξεις
εξαλείφοντας ταυτόχρονα την ανάγκη επώασης
1. Για διαγνωστική χρήση in vitro μόνο.
και ρύθμισης της θολερότητας.4,5,6,7 Τα
αποτελέσματα της ευαισθησίας με 2. Οι αποικίες πρέπει να επιλέγονται από ένα
μικροαραίωση που λαμβάνονται με χρήση του τρυβλίο ΦΡΕΣΚΙΑΣ καλλιέργειας (< 24
συστήματος-D ενοφθαλμισμού Prompt ώρες).
παρουσιάζουν μία συσχέτιση 97% ή 3. Το βακτηριακό εναιώρημα πρέπει να
μεγαλύτερη με τα αποτελέσματα ευαισθησίας χρησιμοποιείται εντός τεσσάρων ωρών
με μικροαραίωση που λαμβάνονται με από την παρασκευή του.
ενοφθαλμίσματα τα οποία παρασκευάζονται 4. ΣΕ ΚΑΜΙΑ ΠΕΡΙΠΤΩΣΗ ΜΗΝ
σύμφωνα με τη διαδικασία της National ΘΕΡΜΑΙΝΕΤΕ ΣΕ ΦΛΟΓΑ την πλαστική
Committee of Clinical Laboratory Standards ακίδα ενοφθαλμισμού.
(NCCLS) (Εθνική Επιτροπή Κλινικών
Εργαστηριακών Προτύπων).2
3251-3000A 7-1
5. Για να αποφύγετε τη μόλυνση, κρατήστε τα A. Παρασκευή του βακτηριακού
δάκτυλά σας πάνω από την προεξοχή του εναιωρήματος
πώματος και στην εξωτερική επιφάνεια του 1. Βγάλτε από του κουτί τον απαιτούμενο
κάλυμα. αριθμό φιαλών ενοφθαλμισμού Prompt.
6. Διατηρείτε τις ράβδους καλυμμένες όταν 2. Βγάλτε από το κουτί μία ακίδα
δεν χρησιμοποιούνται. ενοφθαλμισμού.
7. Μην τις χρησιμοποιείτε εάν οι αποικίες 3. Κρατώντας το άκρο της ράβδου κάθετα ως
είναι μικρότερες από το άκρο της ράβδου. προς την επιφάνεια του άγαρ, αγγίξτε 3
ΣΗΜΕΙΩΣΗ: απομονωμένες αποικίες μεγέθους ίσου ή
Μετά τον ενοφθαλµίσµατα, το φιαλίδιο μεγαλύτερου από το άκρο. Μη διεισδύετε
ενοφθαλμισμού, η ράβδος και το κάλυµα στο άγαρ. Μην ξύνετε ή σύρετε το άκρο
Prompt θα πρέπει να θεωρούνται ως κατά πλάτος των αποικιών (Σχήμα 1-1)
δυνητικοί φορείς παθογόνων. Ο χειρισμός
και η απόρριψη του προϊόντος πρέπει να
γίνονται λαμβάνοντας υπόψη αυτήν την
πιθανότητα.
Φύλαξη
Οι μονάδες Prompt θα πρέπει να φυλάσσονται
σε θερμοκρασία 2-27°C. Αποφεύγετε την
άμεση έκθεση σε φως. Μη χρησιμοποιείτε τις
μονάδες μετά την ημερομηνία λήξης που
αναγράφεται στη συσκευασία. Οι
ενοφθαλμισμένες μονάδες μπορούν να
φυλάσσονται έως τέσσερις ώρες σε
θερμοκρασία δωματίου.
Αλλοίωση των προϊόντων
Οι φιάλες Prompt δεν θα πρέπει να
χρησιμοποιούνται εάν η φιάλη ή το πώμα έχει Σχήμα 1-1
ραγίσει.
Συλλογή και προετοιμασία των ΣΗΜΕΙΩΣΗ:
δειγμάτων Για πολύ μικρές αποικίες, μεγέθους
Τα δείγματα που λαμβάνονται στο εργαστήριο μύτης βελόνας, συνεχίστε την επώαση
θα πρέπει να αντιμετωπίζονται με το συνήθη του πρωτογενούς τρυβλίου μέχρι να
τρόπο για την παρασκευή ενός τρυβλίου φθάσουν τη διάμετρο του άκρου της
πρωτογενούς καλλιέργειας. Για το σύστημα-D ράβδου. Εάν η διάμετρος της αποικίας
ενοφθαλμισμού Prompt χρειάζονται τρεις δεν είναι πιθανόν να φθάσει στο μέγεθος
απομονωμένες αποικίες μεγαλύτερες από το αυτό (για παράδειγμα, ορισμένοι
άκρο της ράβδου, από μία καλλιέργεια στρεπτόκοκκοι), θα πρέπει να
δεκαοκτώ έως είκοσι τεσσάρων (18-24) ωρών. χρησιμοποιηθεί μία εναλλακτική μέθοδος
για την παρασκευή του
Παρεχόμενα ενοφθαλμίσματος.
υλικά της διαδικασίας 4. Κρατώντας τη ακίδα από τη λαβή με το
62 ράβδοι ενοφθαλμισμού Prompt ένα χέρι, πιάστε το κάλυµα με το άλλο
60 φιάλες ενοφθαλμισμού Prompt χέρι και τραβήξτε σταθερά για να
Το σύστημα-D ενοφθαλμισμού Prompt μπορεί σπάσετε τη σύνδεση μεταξύ του κάλυμα
να χρησιμοποιηθεί για την παρασκευή και του άξονα της ράβδου. Μη στρίβετε
ενοφθαλμισμάτων για πλάκες εξέτασης MIC με και μην κάμπτετε το κάλυµα.
μικροαραίωση, οι οποίες χρησιμοποιούν το Κρατήστε το άκρο στραμμένο προς το
ενοφθαλμίσματα εναιωρημένο σε ένα μη δάπεδο, μακριά από τον εαυτό σας
θρεπτικό διάλυμα, για την επανενυδάτωση της και άλλα άτομα (Σχήμα 1-2).
πλάκας. Για να το χρησιμοποιήσετε,
ακολουθήστε τις παρακάτω οδηγίες:
7-2 3251-3000A
8. Τοποθετήστε τη ακίδα ενοφθαλμισμού
μέσα στη φιάλη και πιέστε την προς τα
κάτω με μία περιστροφική κίνηση, ώστε
να διασφαλιστεί η ερμητική
στεγανοποίηση (Σχήμα 1-5).
Σχήμα 1-2
Σχήμα 1-3
Σχήμα 1-6
7. Λυγίστε το καπάκι της φιάλης προς τα
πλάγια μέχρι να σπάσει (Σχήμα 1-4). 10. Το βακτηριακό εναιώρημα πρέπει να
χρησιμοποιείται εντός τεσσάρων ωρών
από την παρασκευή του. Εάν δεν
χρησιμοποιηθεί αμέσως μετά την
παρασκευή του, ανακινήστε το έντονα
για να επαναιωρήσετε τα βακτήρια
ακριβώς πριν από τη χρήση.
B. Προσθήκη εναιωρήματος στο σκαφάκι
ενοφθαλμισμού
1. Αφαιρέστε τη ακίδα ενοφθαλμισμού από
τη φιάλη και απορρίψτε την.
2. Εκχύσατε το εναιώρημα στο σκαφάκι
ενοφθαλμισμού σφίγγοντας απαλά τη
φιάλη με μία κίνηση που θυμίζει αντλία
(Σχήμα 1-7).
E-0822B
Σχήμα 1-4
3251-3000A 7-3
3. Το σύστηµα Prompt έδειξε αυξηµένες τιµές
MIC στις φλουοροκινολόνες (ή
γκατιφλοξασίνη) λινκοσαµίδες (πχ.
Κλινδαµυκίνη) και µακρολίδες
(ερυθροµυκίνη) µε σταφυλοκόκκους όταν
συγκρίνεται µε τη µέθοδο αναφοράς. Η
πυκνότητα του εναιωρήµατος είναι
καθοριστική στις παραπάνω αυτές
περιπτώσεις. Σε περίπτωση Ανοχής ή
ενδιάµεσης ευαισθησίας, θα πρέπει να
χρησιµοποιηθεί άλλη µέθοδος για την
επίτευξη του τεστ ευαισθησίας πριν δοθούν
τα αποτελέσµατα.
Αναμενόμενα αποτελέσματα
Σχήμα 1-7 Όταν χρησιμοποιείται σύμφωνα με τις οδηγίες,
το σύστημα-D ενοφθαλμισμού Prompt θα
παρέχει το σωστό ενοφθαλμίσματα για τη
3. Προχωρήστε στην κατάλληλη διαδικασία εξέταση MIC με μικροαραίωση για τις
MIC με μικροαραίωση. περισσότερες κλινικές απομονώσεις. Τα
ΣΗΜΕΙΩΣΗ: αποτελέσματα MIC που λαμβάνονται με
Η ενοφθαλμισμένη φιάλη Prompt, η ενοφθαλμίσματα παρασκευασμένα με το
ράβδος και το κάλυµα θα πρέπει να σύστημα-D ενοφθαλμισμού Prompt
θεωρούνται ως δυνητικοί φορείς παρουσιάζουν συμφωνία μεγαλύτερη από 97%
παθογόνων. Ο χειρισμός και η απόρριψή με τα αποτελέσματα MIC που λαμβάνονται με
τους πρέπει να γίνονται λαμβάνοντας ενοφθαλμίσματα παρασκευασμένα σύμφωνα
υπόψη αυτήν την πιθανότητα. με τη διαδικασία της NCCLS.2
Ποιοτικός έλεγχος Ειδικά χαρακτηριστικά απόδοσης
Ανατρέξτε στο κατάλληλο σύστημα ευαισθησίας Τα αποτελέσματα ευαισθησίας με
με μικροαραίωση/ταυτοποίησης για τον μικροαραίωση που ελήφθησαν με
ποιοτικό έλεγχο. ενοφθαλμίσματα, τα οποία παρασκευάστηκαν
Περιορισμοί από το σύστημα Prompt, συγκρίθηκαν με τα
1. Το σύστημα-D ενοφθαλμισμού Prompt δεν αποτελέσματα που ελήφθησαν με
θα πρέπει να χρησιμοποιείται όταν το ενοφθαλμίσματα που παρασκευάστηκαν
μέγεθος της αποικίας είναι μικρότερο από σύμφωνα με τη διαδικασία της NCCLS.2
το άκρο της ράβδου. Παραδείγματα Εξετάστηκαν εννιακόσιες δεκαέξι απομονώσεις
οργανισμών που ενδέχεται να μην σε αποξηραμένες συμβατικές πλάκες
ανταποκρίνονται στην απαίτηση ως προς MicroScan. Η εξέταση εκτελέστηκε σε δύο
το μέγεθος είναι ο Streptococcus spp. θέσεις, με χρήση τόσο συστήματος οργάνων
εκτός των S. bovis και S. agalactiae MicroScan όσο και μη αυτόματης επαλήθευσης.
(Oμάδα B). Η επιλογή αποικιών που είναι Τα ενοφθαλμίσματα παρασκευάστηκαν
υπερβολικά μικρές θα έχει ως αποτέλεσμα σύμφωνα με το σύστημα-D ενοφθαλμισμού
τον ανεπαρκή ενοφθαλµίσµατα και Prompt και τη διαδικασία της NCCLS. Η μέση
ενδέχεται να εμφανίσει έναν ανθεκτικό πυκνότητα ενοφθαλμίσματος για 100
οργανισμό ως ευαίσθητο. Για αποικίες οργανισμούς που καταμετρήθηκαν αμέσως
μικρότερες από το άκρο της ράβδου θα μετά την παρασκευή του ενοφθαλμίσματος
πρέπει να χρησιμοποιείται μία εναλλακτική ήταν 6,9 x 105 cfu/ml. Ο Το συνολικό ποσοστό
μέθοδος παρασκευής ενοφθαλμίσματος. των αποτελεσμάτων +/- 1 αραίωση ήταν 97%.
2. Ορισμένα βλεννώδη στελέχη οργανισμών Οι MIC για τη P. aeruginosa που ελήφθησαν με
όπως η Klebsiella spp. ή Pseudomonas αμινογλυκοζίτες (π.χ. αμικασίνη, γενταμυκίνη,
spp. ενδέχεται να μην προσκολλούνται στη τομπραμυκίνη) με το σύστημα Prompt είναι σε
ακίδα όταν επιχειρείται η επιλογή της ουσιαστική συμφωνία 97,5% (MIC, +/- 1
αποικίας. Αυτό θα είναι φανερό και με αραίωση, εντός του πεδίου τιμών των MIC που
γυμνό οφθαλμό. Για παρόμοιους λαμβάνονται με τη μέθοδο της NCCLS).
οργανισμούς θα πρέπει να Επιπρόσθετες πληροφορίες για άλλα
χρησιμοποιείται μία εναλλακτική μέθοδος αντιβιοτικά βρίσκονται σε αρχείο.
παρασκευής ενοφθαλμίσματος.
7-4 3251-3000A
Οι MIC της πενικιλλίνης και της αμπικιλλίνης για 4. Wicks, J.H., R.L. Nelson, and G.E.
ορισμένους σταφυλόκοκκους που παράγουν β- Krejcarek. 1981; A rapid inoculum
λακταμάση εξαρτώνται ιδιαίτερα από το standardization system: a novel device for
ενοφθαλμίσματα. Ο S. aureus ATCC 29213 είναι standardization of inocula in antimicrobial
ένας από τους οργανισμούς αυτούς. Τα susceptibility testing. J. Clin. Microbiol.
αποτελέσματα της πενικιλλίνης και της 17:1114-1119.
αμπικιλλίνης θα πρέπει να θεωρούνται ότι είναι 5. Baker, C.N., C. Thornsberry, and R.W.
υπό έλεγχο, εάν αυτό το στέλεχος ποιοτικού Hawkinson. 1983. Inoculum
ελέγχου παρουσιάζει οποιαδήποτε MIC standardization in antimicrobial
πενικιλλίνης >0,25 µg/ml και οποιαδήποτε MIC susceptibility testing: evaluation of
αμπικιλλίνης > 0,5 µg/ml (δηλ., δεν θα πρέπει να overnight agar cultures and the rapid
εφαρμόζεται κανένα άνω όριο σε αυτά τα πεδία inoculum standardization system. J. Clin.
τιμών ελέγχου). Όταν διαπιστώθηκαν Microbiol. 17:450-457.
ασυμφωνίες για την πενικιλλίνη και την 6. Lund, M.E. and R.W. Hawkinson. 1983.
αμπικιλλίνη μεταξύ του συστήματος Prompt και Evaluation of the Prompt Inoculation
των εξετάσεων τυπικών μεθόδων (Πίνακας 1-1), System for preparation of standardized
οι ενεχόμενοι οργανισμοί ήταν παραγωγοί της β- bacterial inocula. J. Clin. Microbiol. 18:84-
λακταμάσης. Όλες οι ασυμφωνίες των MIC που 91.
παρατηρήθηκαν θα ερμηνεύονταν ως ανθεκτικές 7. Barry, A.L., R.E. Badal, and R. W.
(MIC 0,25 µg/ml για την πενικιλλίνη). Οι MIC του Hawkinson. 1983. Influence of inoculum
συστήματος Prompt ήταν σταθερά υψηλότερες growth phase on microdilution
από τις τυπικές MIC, υποδηλώνοντας καλύτερα susceptibility tests. J. Clin. Microbiol.
την ανθεκτική φύση των βακτηρίων. Το 18:645-651.
φαινόμενο αυτό παρατηρήθηκε επίσης από τους 8. Flejzor, B. and V.D. Bokkenheuser. 1985.
Flejzor και Bokkenheuser.8 Ένα παρόμοιο Performance of the Prompt System in
φαινόμενο παρατηρήθηκε επίσης με ανθεκτικούς identification and antimicrobial susceptibility
στη μεθικιλλίνη σταφυλόκοκκους και ανθεκτικές testing of clinical isolates. J. Clin. Microbiol.
στην πενικιλλινάση πενικιλλίνες. 21:267-268.
Ο αριθμός των αποικιών στη περίπτωση των Δήλωση εγγύησης
σταφυλοκόκκων μπορεί να είναι αυξημένος με Τα προϊόντα αυτά παρέχονται με την εγγύηση
στο σύστημα Prompt, μεγαλύτερος από τον ότι θα έχουν την απόδοση που περιγράφεται
αναμενόμενο κατά των NCCLS. Αυτό μπορεί στην επισήμανσή τους και το έντυπο υλικό της
να έχει επίδραση στα αποτελέσματα των MicroScan, εφόσον χρησιμοποιούνται σύμφωνα
αντιβιοτικών που επηρεάζονται από τη με τις οδηγίες τους. ΔΕΝ ΥΠΑΡΧΟΥΝ
πυκνότητα του εναιωρήματος. Βλέπε την ΕΓΓΥΗΣΕΙΣ ΠΟΥ ΕΚΤΕΙΝΟΝΤΑΙ ΠΕΡΑΝ ΤΗΣ
παράγραφο με τους περιορισμούς για τα ΠΑΡΟΥΣΑΣ ΡΗΤΗΣ ΕΓΓΥΗΣΗΣ ΚΑΙ Η
αντιβιοτικά του. Είναι γνωστό ότι είναι BECKMAN COULTER ΑΠΟΠΟΙΕΙΤΑΙ
εξαρτώμενο από το εναιώρημα. ΟΠΟΙΑΔΗΠΟΤΕ ΣΙΩΠΗΡΗ ΕΓΓΥΗΣΗ
ΕΜΠΟΡΕΥΣΙΜΟΤΗΤΑΣ Ή ΕΓΓΥΗΣΗ
Βιβλιογραφικές αναφορές ΚΑΤΑΛΛΗΛΟΤΗΤΑΣ ΓΙΑ ΕΝΑ ΣΥΓΚΕΚΡΙΜΕΝΟ
1. Gerlach, E.H. in Current Techniques for ΣΚΟΠΟ. Η μοναδική υποχρέωση της Beckman
Antibiotic Susceptibility Testing, A. Balows, Coulter και η αποκλειστική μέθοδος
ed. (Charles C. Thomas, Publisher, αποκατάστασης του αγοραστή για τυχόν
Springfield, Illinois) 1974. pp. 63-76. παραβίαση της παρούσας εγγύησης θα είναι,
2. National Committee for Clinical Laboratory κατά την επιλογή της Beckman Coulter η
Standards 2000. NCCLS approved Standard επιδιόρθωση ή η αντικατάσταση των
M7-A5: Methods for Dilution Antimicrobial προϊόντων. Σε καμία περίπτωση η Beckman
Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Coulter δεν θα είναι υπεύθυνη για τυχόν άμεσες,
Aerobically. National Committee for Clinical τυχαίες ή παρεπόμενες ζημίες σε σχέση με τα
Laboratory Standards, 771 E. Lancaster προϊόντα.
Ave., Villanova, PA. 19085.
3. Barry, A.L., F. Garcia, and L.D. Thrupp.
1970. An improved single-disc method for
testing the antibiotic susceptibility of rapidly-
growing pathogens, Am. J. Clin. Path.
53:49-158.
3251-3000A 7-5
Beckman Coulter, the stylized logo, and MicroScan, autoSCAN, WalkAway, and RENOK are trademarks of
Beckman Coulter, Inc. Beckman Coulter and the stylized logo are registered with the USPTO.
Made in USA
Beckman Coulter, Inc. Beckman Coulter Eurocenter S.A.
250 S. Kraemer Blvd. 22, rue Juste-Olivier.
Brea, CA 92821 United States Case Postale 1044
www.beckmancoulter.com CH – 1260 Nyon 1, Switzerland
Tel: +41 (0) 22 365 36 11
03/2015